編輯|steins來源|島津分析中心背景摘要:紫外可見分光光度計和熒光分光光度計都經(jīng)常用于樣品定量。使用紫外可見分光光度計進行定量時基于朗伯比爾定律,測定的吸收值一定范圍內(nèi)與樣品濃度成正比。另一方面,利用熒光分光光度計時,使用熒光強度。在低濃度時,熒光強度與濃度成正比,所以,可以用于定量。本次使用紫外可見分光光度計和熒光分光光度計兩臺儀器分別測定了羅丹明B溶液。羅丹明B是用于纖維和皮革的染色的熒光物質(zhì)。關(guān)于測定結(jié)果,對兩個機種的定量、檢測下限值和標準曲線的線性度進行了比較,下面將進行介紹。1紫外1羅丹明B溶液的吸光度測定使用了紫外可見分光光度計UV-260Oi測定樣品吸光度。測定條件如表1所示。將粉末狀的羅丹明B溶解在蒸餾水中,調(diào)配~5ug/ml的標準溶液。羅丹明B的標準溶液的吸光光譜如圖1所示,根據(jù)544nm的吸光度值創(chuàng)建的標準曲線如圖2和圖3所示。在圖2中,用~5ug/ml的6點和空白樣品(蒸餾水)創(chuàng)建,得到了線性度良好的標準曲線(相關(guān)系數(shù)的平方值是)。在圖3所示的低濃度區(qū)域中,噪聲的影響相對較大,導(dǎo)致線性較差。2熒光2羅丹明B溶液的熒光強度測定使用了熒光分光光度計RF-60O0測定了樣品熒光強度。測定條件如表2所示。超微量火焰光度計不需要預(yù)熱,可隨時檢測,檢測時間短。湖北生物火焰光度計價格
光度計在使用過程中,由于機械振動、溫度變化、燈絲變形、燈座松動或更換燈泡等原因,經(jīng)常會出現(xiàn)刻度盤上的讀數(shù)與實際通過溶液的波長不符合的現(xiàn)象,因而導(dǎo)致儀器靈明度降低,影響測定結(jié)果的精度,需要進行檢驗。檢驗波長準確度較簡單的方法是用干涉濾光片或鐠釹濾光片測量儀器的吸收峰值,如果,測出的值與濾光片標準值之差超出規(guī)程規(guī)定,則需要進行波長調(diào)節(jié)。用透射比標準值分別為10%、20%、30%左右的光譜中性濾光片,可見光區(qū)分別在440、546、635nm波長處,以空氣為參比,分別測量各濾光片的透射比,紫外光區(qū)用重鉻酸鉀溶液分別在235、257、313、350nm波長處,以高氯酸溶液為參比,測量其透射比。江西生物火焰光度計訂制價格核酸的定量是超微量火焰光度計使用頻率較高的功能。
紫外可見分光光度計T2600紫外可見分光光度計T2602S雙光束紫外可見分光光度計U9雙光束紫外可見分光光度計T2600紫外可見分光光度計全新的光路設(shè)計,跨國際采購的**配件,優(yōu)越的儀器性能、具極大地滿足用戶的分析工作需求??善毡閼?yīng)用在有機化學(xué)、生物化學(xué)、藥品分析、食品檢驗、醫(yī)藥衛(wèi)生、環(huán)境保護、生命科學(xué)等各個領(lǐng)域的科研、生產(chǎn)中。01儀器特點1、7寸TFT大屏幕真彩液晶顯示,歐姆龍輕觸按鍵,使用手感更舒服、使用千萬次不會損壞,超大屏幕顯示直接顯示各種掃描曲線和圖譜。2、支持U盤存儲,數(shù)據(jù)的打開和編輯不需要任何專業(yè)輔助軟件支持,可支持excel、txt格式、圖片格式,可輸出四種格式:*.csv、*.qua.*.tet,*.bmp。3、數(shù)據(jù)輸出:搭配RS-232C串口(打印)、USBdrive(聯(lián)機)、USBHOST(接U盤),標配16GB存儲器。4、業(yè)內(nèi)使用先進的ARM11處理器,可存儲2000條測試數(shù)據(jù)或500條工作曲線。5、懸架式光學(xué)系統(tǒng)設(shè)計,加強加厚鋁底板設(shè)計,消除震動或變形對光學(xué)系統(tǒng)的影響;雙層設(shè)計,將光路各電路部分完全分開,提高了儀器的分辨率與穩(wěn)定性。6、儀器采用獲得國家光電信號檢測裝置使儀器信噪比更低,儀器更穩(wěn)定。7、可選配內(nèi)置全自動進樣流路系統(tǒng)。
由于儀器的制造和調(diào)整誤差,單色光的實際波長與儀器的波長讀數(shù)值間都存在一定的誤差。樣品中絕大部分的主要吸收峰都有一定的寬度,對波長準確度要求允許寬些。但是,當(dāng)吸收峰寬度較小,而且吸收峰兩側(cè)邊緣比較陡直,此時波長準確度的影響就必須引起注意。2、透射比(吸光度)準確度很顯然,透射比或吸光度的誤差越大,測試結(jié)果的可信性越差,從而影響到測試數(shù)據(jù)的準確性。3、雜散光雜散光是由于光學(xué)元件制造誤差以及光學(xué)和機械零件表面的漫反射形成的。雜散光是分析樣品的非吸收光,隨著樣品濃度的增加,雜散光的影響也隨之增大,將給分析結(jié)果帶來一定的誤差。在紫外的短波區(qū)域光源強度和檢測器的靈敏度均明顯減弱,雜散光的影響更不能忽視。因此,雜散光的大小也是儀器性能的一項重要指標。使用與維護1、若大幅度改變測試波長,需稍等片刻,等燈熱平衡后,重新校正“0”和“100%”點。然后再測量。2、指針式儀器在未接通電源時,電表的指針必須位于零刻度上。若不是這種情況,需進行機械調(diào)零。3、比色皿使用完畢后,請立即用蒸餾水沖洗干凈,并用干凈柔軟的紗布將水跡擦去,以防止表面光潔度被破壞,影響比色皿的透光率。4、操作人員不應(yīng)輕易動燈泡及反光鏡燈。紫外火焰光度計是測樣品中物質(zhì)吸收了光能量。
并發(fā)現(xiàn)吸收光譜相似的有機物質(zhì),它們的結(jié)構(gòu)也相似。并且,可以解釋用化學(xué)方法所不能說明的分子結(jié)構(gòu)問題,初步建立了紫外可見分光光度計的理論基礎(chǔ),以此推動了紫外可見分光光度計的發(fā)展。1918年美國國家標準局研制成了世界上diyi臺紫外可見分光光度計(不是商品儀器,很不成熟)。此后,紫外可見分光光度計很快在各個領(lǐng)域的分析工作中得到了應(yīng)用。朗伯早在1760年就發(fā)現(xiàn)物質(zhì)對光的吸收與物質(zhì)的厚度成正比,后被人們稱之為朗伯定律;比耳在1852年又發(fā)現(xiàn)物質(zhì)對光的吸收與物質(zhì)濃度成正比,后被人們稱之為比耳定律。在應(yīng)用中,人們把朗伯定律和比耳定律聯(lián)合起來,又稱之為朗伯-比耳定律。隨后,人們開始重視研究物質(zhì)對光的吸收,并試圖在物質(zhì)的定性、定量分析方面予以使用。因此,許多科學(xué)家開始研究以比耳定律為理論基礎(chǔ)的儀器裝置。經(jīng)過一個漫長的時期后,美國Beckman公司于1945年,推出世界上diyi臺成熟的紫外可見分光光度計商品儀器。從此,紫外可見分光光度計的應(yīng)用開始得到飛速發(fā)展。紫外可見分光光度計的展望紫外可見分光光度計雖然是一類有著很長歷史的分析儀器,但每一次吸收了新的技術(shù)成果都使它煥發(fā)出新的活力?;鹧婀舛扔嬀哂袖噧?nèi)標、雙通道、雙數(shù)字顯示的特點。山東大容量火焰光度計廠家
避免將紫外-可見火焰光度計放在有陽光直接照射和有較大氣流擾動、以及有腐蝕性氣體和灰塵多的場所。湖北生物火焰光度計價格
WFZ800-DA、756型等分光光度計,由于其光電接收裝置為光電倍增管,它本身的特點是放大倍數(shù)大,因而可以用于檢測微弱光電信號,而不能用來檢測強光。否則容易產(chǎn)生信號漂移,靈敏度下降。針對其上述特點,在維修、使用此類儀器時應(yīng)注意不讓光電倍增管長時間暴露于光下,因此在預(yù)熱時,應(yīng)打開比色皿蓋或使用擋光桿,避免長時間照射使其性能漂移而導(dǎo)致工作不穩(wěn)。放大器靈敏度換擋后,必須重新調(diào)零。比色杯的配套性問題。比色杯必須配套使用,否則將使測試結(jié)果失去意義。在進行每次測試前均應(yīng)進行比較。具體方法如下:分別向被測的兩只杯子里注入同樣的溶液,把儀器置于某一波長處,石英比色杯;220nm、700nm裝蒸餾水,玻璃比色杯:700nm處裝蒸餾水,將某一個池的透射比值調(diào)至100%,測量其他各池的透射比值,記錄其示值之差及通光方向,如透射比之差在,若超出此范圍應(yīng)考慮其對測試結(jié)果的影響。典型故障及其排除方法1、儀器不能調(diào)零??赡茉颍篴.光門不能完全關(guān)閉。解決方法:修復(fù)光門部件,使其完全關(guān)閉。b.透過率“100%”旋到底了。解決方法:重新調(diào)整“100%”旋鈕。c.儀器嚴重受潮。解決方法:可打開光電管暗盒,用電吹風(fēng)吹上一會兒使其干燥。湖北生物火焰光度計價格