由于儀器的制造和調(diào)整誤差,單色光的實(shí)際波長(zhǎng)與儀器的波長(zhǎng)讀數(shù)值間都存在一定的誤差。樣品中絕大部分的主要吸收峰都有一定的寬度,對(duì)波長(zhǎng)準(zhǔn)確度要求允許寬些。但是,當(dāng)吸收峰寬度較小,而且吸收峰兩側(cè)邊緣比較陡直,此時(shí)波長(zhǎng)準(zhǔn)確度的影響就必須引起注意。2、透射比(吸光度)準(zhǔn)確度很顯然,透射比或吸光度的誤差越大,測(cè)試結(jié)果的可信性越差,從而影響到測(cè)試數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。3、雜散光雜散光是由于光學(xué)元件制造誤差以及光學(xué)和機(jī)械零件表面的漫反射形成的。雜散光是分析樣品的非吸收光,隨著樣品濃度的增加,雜散光的影響也隨之增大,將給分析結(jié)果帶來一定的誤差。在紫外的短波區(qū)域光源強(qiáng)度和檢測(cè)器的靈敏度均明顯減弱,雜散光的影響更不能忽視。因此,雜散光的大小也是儀器性能的一項(xiàng)重要指標(biāo)。使用與維護(hù)1、若大幅度改變測(cè)試波長(zhǎng),需稍等片刻,等燈熱平衡后,重新校正“0”和“100%”點(diǎn)。然后再測(cè)量。2、指針式儀器在未接通電源時(shí),電表的指針必須位于零刻度上。若不是這種情況,需進(jìn)行機(jī)械調(diào)零。3、比色皿使用完畢后,請(qǐng)立即用蒸餾水沖洗干凈,并用干凈柔軟的紗布將水跡擦去,以防止表面光潔度被破壞,影響比色皿的透光率。4、操作人員不應(yīng)輕易動(dòng)燈泡及反光鏡燈。核酸的定量是超微量火焰光度計(jì)使用頻率較高的功能。山西f-100火焰光度計(jì)訂制價(jià)格
在上述6個(gè)容量瓶中對(duì)應(yīng)的溶液中鐵的含量不同其中鐵含量為,其余溶液構(gòu)成標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。并用移液管吸取,并編號(hào)為7。將溶液放置15min左右;3、接通722N分光光度計(jì)電源,調(diào)節(jié)分光光度計(jì)的透光度T示數(shù)為(即T%=100%)發(fā)現(xiàn)此時(shí)吸光度A的示數(shù)位,波長(zhǎng)調(diào)節(jié)至510nm條件下;4、拿出比色皿,一次只能測(cè)四種溶液,先用1、2、3、4號(hào)容量瓶中的溶液分別潤(rùn)洗(不能搞混了),并依次倒入編號(hào)溶液(不能倒太滿,否則容易溢出),用面巾紙擦干比色皿表面尤其是光滑的一面。將擦干裝有對(duì)應(yīng)溶液的比色皿依次放入分光光度計(jì)的光路中使測(cè)定的順序?yàn)?、2、3、4(要蓋上儀器的蓋子)。記錄對(duì)應(yīng)的吸光度;5、將4上述測(cè)完的比色皿拿出,將溶液倒入廢液缸中,先用蒸餾水洗凈4只比色皿。在按4步驟中的方法進(jìn)行操作,此時(shí)的溶液編號(hào)為5、6、7。記錄對(duì)應(yīng)的吸光度;6、將記錄的數(shù)據(jù)在電腦上用ORANGE軟件進(jìn)行處理。并繪出相應(yīng)的圖,并根據(jù)原理求出原始待測(cè)溶液中鐵的含量;7、實(shí)驗(yàn)完畢斷開分光光度計(jì)電源,清洗玻璃儀器和比色皿,整理實(shí)驗(yàn)臺(tái)離開實(shí)驗(yàn)室。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理結(jié)果記錄及討論標(biāo)準(zhǔn)系列的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)及測(cè)定結(jié)果鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液/mL鐵含量。寧夏哪里賣火焰光度計(jì)銷售公司火焰光度計(jì)是以發(fā)射光譜法為基本原理的一種分析儀器。
雜散光是分析樣品的非吸收光,隨著樣品濃度的增加,雜散光的影響也隨之增大,將給分析結(jié)果帶來一定的誤差。在紫外的短波區(qū)域光源強(qiáng)度和檢測(cè)器的靈敏度均明顯減弱,雜散光的影響更不能忽視。因此,雜散光的大小也是儀器性能的一項(xiàng)重要指標(biāo)。使用與維護(hù)1、若大幅度改變測(cè)試波長(zhǎng),需稍等片刻,等燈熱平衡后,重新校正“0”和“100%”點(diǎn)。然后再測(cè)量。2、指針式儀器在未接通電源時(shí),電表的指針必須位于零刻度上。若不是這種情況,需進(jìn)行機(jī)械調(diào)零。3、比色皿使用完畢后,請(qǐng)立即用蒸餾水沖洗干凈,并用干凈柔軟的紗布將水跡擦去,以防止表面光潔度被破壞,影響比色皿的透光率。4、操作人員不應(yīng)輕易動(dòng)燈泡及反光鏡燈。WFZ800-DA、756型等分光光度計(jì),由于其光電接收裝置為光電倍增管,它本身的特點(diǎn)是放大倍數(shù)大,因而可以用于檢測(cè)微弱光電信號(hào),而不能用來檢測(cè)強(qiáng)光。否則容易產(chǎn)生信號(hào)漂移,靈敏度下降。
以免影響光效率。5、WFZ800-DA、756型等分光光度計(jì),由于其光電接收裝置為光電倍增管,它本身的特點(diǎn)是放大倍數(shù)大,因而可以用于檢測(cè)微弱光電信號(hào),而不能用來檢測(cè)強(qiáng)光。否則容易產(chǎn)生信號(hào)漂移,靈敏度下降。針對(duì)其上述特點(diǎn),在維修、使用此類儀器時(shí)應(yīng)注意不讓光電倍增管長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下,因此在預(yù)熱時(shí),應(yīng)打開比色皿蓋或使用擋光桿,避免長(zhǎng)時(shí)間照射使其性能漂移而導(dǎo)致工作不穩(wěn)。6、放大器靈敏度換擋后,必須重新調(diào)零。7、比色杯的配套性問題。比色杯必須配套使用,否則將使測(cè)試結(jié)果失去意義。在進(jìn)行每次測(cè)試前均應(yīng)進(jìn)行比較。具體方法如下:分別向被測(cè)的兩只杯子里注入同樣的溶液,把儀器置于某一波長(zhǎng)處,石英比色杯;220nm、700nm裝蒸餾水,玻璃比色杯:700nm處裝蒸餾水,將某一個(gè)池的透射比值調(diào)至100%,測(cè)量其他各池的透射比值,記錄其示值之差及通光方向,如透射比之差在±,若超出此范圍應(yīng)考慮其對(duì)測(cè)試結(jié)果的影響。典型故障及其排除方法1、儀器不能調(diào)零??赡茉颍篴.光門不能完全關(guān)閉。解決方法:修復(fù)光門部件,使其完全關(guān)閉。b.透過率“100%”旋到底了。解決方法:重新調(diào)整“100%”旋鈕。c.儀器嚴(yán)重受潮。解決方法:可打開光電管暗盒,用電吹風(fēng)吹上一會(huì)兒使其干燥?;鹧婀舛扔?jì)具有靈敏度高、選擇性強(qiáng)、所需樣品少、分析速度快的特點(diǎn)。
試劑盒包含一個(gè)空白濾光片、三個(gè)檢查光度的濾光片和三個(gè)校正波長(zhǎng)的濾光片。每個(gè)濾光片的吸光值是相對(duì)空白濾光片測(cè)定的。這個(gè)試劑盒不僅能讓用戶獲得測(cè)量準(zhǔn)確性的信息,也能提供精確度的信息,包括平均值和變異系數(shù)。在測(cè)量準(zhǔn)確性和精確度時(shí),將空白濾光片和樣品濾光片放入插槽內(nèi)。將測(cè)得的輸出吸光度值與允許值范圍比較。在檢查波長(zhǎng)時(shí),測(cè)定三個(gè)測(cè)試濾光片在對(duì)應(yīng)波長(zhǎng)(260nm、280nm和800nm)下的吸光度,以確定每個(gè)波長(zhǎng)的變異系數(shù)。許多分光光度計(jì),包括Eppendorf的所有儀器,都帶有一個(gè)特殊的功能——自檢。Eppendorf建議用戶至少每周運(yùn)行一次自檢,但自動(dòng)自檢的頻率可根據(jù)需要進(jìn)行設(shè)定。自檢主要檢查儀器的幾個(gè)部分。它通過測(cè)定現(xiàn)有波長(zhǎng)的隨機(jī)誤差來校驗(yàn)檢測(cè)器,通過檢查大能量、隨機(jī)誤差、基準(zhǔn)傳感器的信號(hào)和光強(qiáng)度來校驗(yàn)光源。它還通過測(cè)定紫外光譜范圍內(nèi)強(qiáng)度峰值位置的精確度來確定波長(zhǎng)的系統(tǒng)及隨機(jī)誤差。遵照這些建議來維護(hù)分光光度計(jì),那么在今后的使用過程中再也不用擔(dān)心測(cè)量結(jié)果有問題啦。在測(cè)定時(shí),紫外可見火焰光度計(jì)受到強(qiáng)電磁場(chǎng)干擾,應(yīng)去除無線電干擾環(huán)境后,再次測(cè)量。江蘇哪里賣火焰光度計(jì)推薦
保持紫外-可見火焰光度計(jì)表面和工作環(huán)境的清潔。山西f-100火焰光度計(jì)訂制價(jià)格
羅丹明B的標(biāo)準(zhǔn)溶液的熒光光譜如圖4所示。短波長(zhǎng)側(cè)的熒光被再次吸收,導(dǎo)致標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度變高的同時(shí)峰頂向長(zhǎng)波長(zhǎng)側(cè)變化。根據(jù)577nm的熒光強(qiáng)度值創(chuàng)建的標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖5以及圖6所示。如圖5所示,在ug/ml(Abs)或更高的高濃度區(qū)域,標(biāo)準(zhǔn)曲線是彎曲的,但在圖6的低濃度區(qū)域,可獲得線性度良好的標(biāo)準(zhǔn)曲線。3比較結(jié)果、定量下限值來比較靈敏度與應(yīng)用報(bào)告,使用標(biāo)準(zhǔn)曲線和10次空白測(cè)定中計(jì)算得的標(biāo)準(zhǔn)偏差σ,計(jì)算出了定量下限值(10σ)和檢測(cè)下限值(3σ)。另外,采用了線性度較高的標(biāo)準(zhǔn)曲線。UV-2600i和RF-6000的定量下限值和檢測(cè)下限值如表3所示。從通過本實(shí)驗(yàn)算出的定量下限值的比可知,RF-6000的靈敏度較高,是UV-2600i的400倍以上。即使對(duì)圖3和圖6的低濃度區(qū)域的標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行比較,圖6(RF-6000)的結(jié)果中得到了離散較小的標(biāo)準(zhǔn)曲線。與對(duì)未被樣品吸收的照射光進(jìn)行檢測(cè)的吸光光度法不同,熒光光度法以零為標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)熒光,因此噪聲水平低,可得到較高的靈敏度。UV-2600i和RF-6000的標(biāo)準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)的平方值與濃度范圍的關(guān)系如表4所示。另外,使用UV-2600i時(shí),低于空白以外的定量下限值的點(diǎn)除外。即使在未達(dá)到UV-2600i的定量下限值的區(qū)域(0~)。山西f-100火焰光度計(jì)訂制價(jià)格