由于不同物體分子的結(jié)構(gòu)不同,對(duì)不同波長(zhǎng)光線的吸收能力也不同,因此,每種物體都具有特定的吸收光譜。能從含有各種波長(zhǎng)的混合光中,將每一種單色光分離出來(lái),并測(cè)量其強(qiáng)度的儀器叫做分光光度計(jì)。分光光度法是比色法的發(fā)展。比色法只限于在可見(jiàn)光區(qū),分光光度法則可以擴(kuò)展到紫外光區(qū)和紅外光區(qū)。分光光度法則要求近于真正單色光,其光譜帶寬比較大不超過(guò)3-5nm,在紫外區(qū)可到1nm以下,來(lái)自棱鏡或光柵,具有較高的精度。分光光度計(jì)?就是利用分光光度法對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定量定性分析的儀器。紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)應(yīng)避免長(zhǎng)期不用??梢?jiàn)分光分光光度計(jì)原理
在前面幾期《聚創(chuàng)環(huán)保小科普》中,小聚從光度計(jì)的原理到紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的使用說(shuō)明,再到適用領(lǐng)域給各位看官介紹的明明白白,本期小聚給大家重點(diǎn)介紹一下“為什么光度計(jì)分為紅外的?紫外的?原子熒光的?超微量的?火焰的?”是不是在選購(gòu)上很是迷茫呢?不要著急,下面重點(diǎn)給大家介紹。首先:什么是光度計(jì)?簡(jiǎn)單說(shuō),光度計(jì)是將成分復(fù)雜的光,分解成光譜線的科學(xué)檢測(cè)儀器。JC-UT2000紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)一、紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)和紅外分光光度計(jì)的原理不同:紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的原理:物質(zhì)的吸收光譜本質(zhì)上是物質(zhì)中的分子和原子吸收了光中的光波能量,相應(yīng)地發(fā)生了分子振動(dòng)級(jí)躍遷和電子能級(jí)躍遷的結(jié)果,由于各種物質(zhì)具有不同的分子原子和分子結(jié)構(gòu),所以在吸收光能量的情況也各不相同,儀器通過(guò)各種物質(zhì)特有的吸光光譜的曲線,來(lái)判定被檢測(cè)物質(zhì)的含量,這就是紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)定性和定量的基礎(chǔ),紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)就是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分,結(jié)構(gòu)。紅外分光光度計(jì)的原理:由光源發(fā)出的光,被分為能量相同的兩束光線,其中一束通過(guò)樣品,另外一束作為參考光作為參照基準(zhǔn)。這兩束光通過(guò)樣品進(jìn)入紅外分光光度計(jì)后,被扇形鏡以一定的頻率調(diào)制,形成交變信號(hào)。山東原子吸收分光分光光度計(jì)操作關(guān)于儀器的系統(tǒng)誤差,可通過(guò)對(duì)分光光度計(jì)的定期校正來(lái)克服,若所需準(zhǔn)確度很高的測(cè)量,則必須天天校正。
由于儀器的制造和調(diào)整誤差,單色光的實(shí)際波長(zhǎng)與儀器的波長(zhǎng)讀數(shù)值間都存在一定的誤差。樣品中絕大部分的主要吸收峰都有一定的寬度,對(duì)波長(zhǎng)準(zhǔn)確度要求允許寬些。但是,當(dāng)吸收峰寬度較小,而且吸收峰兩側(cè)邊緣比較陡直,此時(shí)波長(zhǎng)準(zhǔn)確度的影響就必須引起注意。透射比(吸光度)準(zhǔn)確度很顯然,透射比或吸光度的誤差越大,測(cè)試結(jié)果的可信性越差,從而影響到測(cè)試數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。雜散光雜散光是由于光學(xué)元件制造誤差以及光學(xué)和機(jī)械零件表面的漫反射形成的。
由于儀器的制造和調(diào)整誤差,單色光的實(shí)際波長(zhǎng)與儀器的波長(zhǎng)讀數(shù)值間都存在一定的誤差。但是,當(dāng)吸收峰寬度較小,而且吸收峰兩側(cè)邊緣比較陡直,此時(shí)波長(zhǎng)準(zhǔn)確度的影響就必須引起注意。2、透射比(吸光度)準(zhǔn)確度很顯然,透射比或吸光度的誤差越大,測(cè)試結(jié)果的可信性越差,從而影響到測(cè)試數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。3、雜散光雜散光是由于光學(xué)元件制造誤差以及光學(xué)和機(jī)械零件表面的漫反射形成的。雜散光是分析樣品的非吸收光,隨著樣品濃度的增加,雜散光的影響也隨之增大,將給分析結(jié)果帶來(lái)一定的誤差。在紫外的短波區(qū)域光源強(qiáng)度和檢測(cè)器的靈敏度均明顯減弱,雜散光的影響更不能忽視。因此,雜散光的大小也是儀器性能的一項(xiàng)重要指標(biāo)。使用與維護(hù)1、若大幅度改變測(cè)試波長(zhǎng),需稍等片刻,等燈熱平衡后,重新校正“0”和“100%”點(diǎn)。然后再測(cè)量。2、指針式儀器在未接通電源時(shí),電表的指針必須位于零刻度上。若不是這種情況,需進(jìn)行機(jī)械調(diào)零。3、比色皿使用完畢后,請(qǐng)立即用蒸餾水沖洗干凈,并用干凈柔軟的紗布將水跡擦去,以防止表面光潔度被破壞,影響比色皿的透光率。4、操作人員不應(yīng)輕易動(dòng)燈泡及反光鏡燈。紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)的安裝應(yīng)滿足電源電壓要求。
兩束光合為一束。并交替通過(guò)入射狹縫進(jìn)入單色器中,經(jīng)離軸拋物鏡將光束平行地投射在光柵上,色散并通過(guò)出射狹縫之后,被濾光片濾除高級(jí)次光譜,再經(jīng)橢球鏡聚焦在探測(cè)器的接收面上。探測(cè)器將上述交變的信號(hào)轉(zhuǎn)換為相應(yīng)的電信號(hào),經(jīng)放大器進(jìn)行電壓放大后,轉(zhuǎn)入A/D轉(zhuǎn)換單位,計(jì)算機(jī)處理后得到從高波數(shù)到低波數(shù)的紅外吸收光譜圖。元析儀器紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)二、紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)和紅外分光光度計(jì)的概述不同:1、紫外分光光度計(jì)的概述:根據(jù)吸收光譜圖上的一些特征吸收,特別是比較大吸收波長(zhǎng)λmax和摩爾吸收系數(shù)ε是檢定物質(zhì)的常用物理參數(shù)。這在藥物分析上就有著很***的應(yīng)用。在國(guó)內(nèi)外的藥典中,已將眾多的藥物紫外吸收光譜的比較大吸收波長(zhǎng)和吸收系數(shù)載入其中,為藥物分析提供了很好的手段。2、紅外分光光度計(jì)的概述:由光源發(fā)出的光,被分為能量均等對(duì)稱(chēng)的兩束,一束為樣品光通過(guò)樣品,另一束為參考光作為基準(zhǔn)。這兩束光通過(guò)樣品室進(jìn)入光度計(jì)后,被扇形鏡以一定的頻率所調(diào)制,形成交變信號(hào)。三、紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)和紅外分光光度計(jì)的應(yīng)用不同:1、紫外分光光度計(jì)的應(yīng)用:將分析樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品以相同濃度配制在同一溶劑中,在同一條件下分別測(cè)定紫外可見(jiàn)吸收光譜。帶寬是分光光度計(jì)的一個(gè)重要特性。中國(guó)臺(tái)灣紫外可見(jiàn)分光分光光度計(jì)廠家
雙光束分光光度計(jì)一般能自動(dòng)記錄吸收光譜曲線,其靈敏度較好,但結(jié)構(gòu)較復(fù)雜、價(jià)格較貴??梢?jiàn)分光分光光度計(jì)原理
分光光度計(jì)可分為紫外分光光度計(jì)、可見(jiàn)光分光光度計(jì)(或比色計(jì))、紅外分光光度計(jì)或原子吸收分光光度計(jì)。項(xiàng)目對(duì)分析結(jié)果的影響1、波長(zhǎng)準(zhǔn)確度分光光度法原理要求照射在樣品池上的單色光必須對(duì)應(yīng)于樣品吸收光譜中的某一個(gè)吸收峰的波長(zhǎng)。試劑盒包含一個(gè)空白濾光片、三個(gè)檢查光度的濾光片和三個(gè)校正波長(zhǎng)的濾光片。每個(gè)濾光片的吸光值是相對(duì)空白濾光片測(cè)定的。這個(gè)試劑盒不僅能讓用戶獲得測(cè)量準(zhǔn)確性的信息,也能提供精確度的信息,包括平均值和變異系數(shù)。可見(jiàn)分光分光光度計(jì)原理