細(xì)胞外泌體質(zhì)譜

為了解決外泌體實(shí)驗(yàn)遇到的上述的各種問(wèn)題,Wako研發(fā)出MagCapture?外泌體提取試劑盒PS（MagCapture?ExosomeIsolationKitPS）提取高純度細(xì)胞外囊泡。外泌體膜含有分泌細(xì)胞源的蛋白和脂質(zhì)，眾所周知磷脂酰絲氨酸（PS）在活細(xì)胞通過(guò)翻轉(zhuǎn)酶作用導(dǎo)向細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)，暴露在外泌體膜外側(cè)3）。另外，T-cellimmunoglobulindomainandmucindomain-containingprotein4（Tim4通過(guò)巨噬細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞凋亡的吞噬受體）蛋白通過(guò)細(xì)胞外域IgV域與含有鈣離子的PS結(jié)合4）。基于上述知識(shí)，我們利用Tim4固化磁珠，在鈣離子存在下捕捉培養(yǎng)上清和血清等樣品中的外泌體，再添加螯合劑洗脫外泌體，這種外泌體純化方法是和金澤大學(xué)醫(yī)學(xué)系免疫學(xué)華山教授共同開(kāi)發(fā)，并取得了成功。5）這是迄今為止取代黃金標(biāo)準(zhǔn)超速離心法的新型外泌體純化方法。外泌體是一種由活細(xì)胞分泌的，直徑約為40～160nm的具有雙層膜結(jié)構(gòu)的生物活性囊泡。細(xì)胞外泌體質(zhì)譜

外泌體在各種疾病的診斷和治理中的應(yīng)用研究火熱。外泌體的復(fù)雜性，為疾病檢測(cè)和監(jiān)測(cè)提供了一個(gè)多指標(biāo)的診斷窗口。此外，能夠向病變細(xì)胞輸送功能性物質(zhì)的特性使外泌體有潛力作為基因和藥物遞送的載體。有研究總結(jié)了從外泌體中篩選的生物標(biāo)志物，可用于疾病的診斷、預(yù)后及治理。外泌體在生物液體中寬泛分布，包括血液、尿液、唾液、胸腹水、腦脊液、膽汁、乳汁以及淚液等，其復(fù)雜的內(nèi)容物被認(rèn)為是疾病診斷的無(wú)創(chuàng)或微創(chuàng)生物標(biāo)志物，具有檢測(cè)包括病癥在內(nèi)的許多病理狀況的潛力，可以用于對(duì)心血管疾病和病癥等多種疾病的診斷和監(jiān)測(cè)。牛奶提取試劑盒分類(lèi)外泌體提取在短時(shí)間（一周之內(nèi)）使用，可以放在4度保存，如果長(zhǎng)時(shí)間保存可以放在-20度或-80度保存。

Exosome（外泌體）是由活細(xì)胞分泌小囊泡，具有典型的脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu)；參與細(xì)胞之間的交流，物質(zhì)的運(yùn)輸以及正常生理過(guò)程的維持，此外還與疾病的產(chǎn)生有關(guān)。對(duì)分離的外泌體進(jìn)行體外標(biāo)記或示蹤，有助于對(duì)外泌體的功能進(jìn)行進(jìn)一步的研究。目前對(duì)于外泌體的標(biāo)記方法有很多種，包括親脂性的染料和膜滲透型的化合物等。PKH67的體內(nèi)熒光半衰期為10-12天。相比于PKH-67，PKH-26具有更長(zhǎng)的半衰期，標(biāo)記在兔紅細(xì)胞上的PKH26半衰期長(zhǎng)達(dá)100天以上。特別適用于體外增殖研究以及長(zhǎng)期的體內(nèi)細(xì)胞跟蹤研究。

外泌體（Exosome）是一種直徑為30-100nm的納米級(jí)脂質(zhì)包裹體結(jié)構(gòu)，內(nèi)部包裹了蛋白、mRNA和microRNA等物質(zhì)。外泌體由細(xì)胞分泌釋放出來(lái)，在血液等體液內(nèi)傳播，較后又可被其他細(xì)胞吞噬，是細(xì)胞間通訊的重要介質(zhì)。源自于間充質(zhì)干細(xì)胞內(nèi)分泌的外泌體，富含一百多種胞外基質(zhì)蛋白，mRNA信使核糖核酸和多重生長(zhǎng)因子。在臨床上，干細(xì)胞外泌體主要治理燒傷、燙傷、皮膚潰瘍，再生健康皮膚；在護(hù)膚方面，主要是對(duì)外傷受損、衰老中毒皮膚進(jìn)行修復(fù)，比較全的調(diào)理皮膚、改善膚質(zhì)，令肌膚恢復(fù)年輕、健康的狀態(tài)。外泌體膜含有MHC-1/2蛋白，能綁定特異性的肽鏈。

小鼠骨髓樹(shù)突狀細(xì)胞產(chǎn)生的外泌體中含有的中流多肽能夠啟動(dòng)特異性細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞，根除或抑制小鼠中流的生長(zhǎng)，這一發(fā)現(xiàn)為中流免疫zhiliao提供了新的研究思路。另外，樹(shù)突狀細(xì)胞來(lái)源的外泌體也能夠通過(guò)激huo其他免疫細(xì)胞誘導(dǎo)抗中流反應(yīng)，從而抑制中流。B細(xì)胞分泌的外泌體包含MHCⅡ-多肽復(fù)合物，能夠激huo人和小鼠抗原特異性T細(xì)胞，從而實(shí)現(xiàn)調(diào)節(jié)免疫響應(yīng)的功能。細(xì)菌或病原體感ran的巨噬細(xì)胞外泌體能夠刺激巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞分泌炎性介質(zhì)，在增強(qiáng)機(jī)體免疫監(jiān)督方面發(fā)揮重要作用。外泌體被認(rèn)為是疾病的生物標(biāo)志物和預(yù)后因子，具有重要的臨床診斷和治理意義。細(xì)胞外泌體質(zhì)譜

外泌體由于包含的內(nèi)容物具有明顯的組織特異性，為其能成為瘤早期診斷的生物標(biāo)志物提供了重要保障。細(xì)胞外泌體質(zhì)譜

由于這些胞外囊泡（EV）與生理和病理狀況之間的關(guān)系，人們對(duì)EV的興趣呈指數(shù)增長(zhǎng)。EVs對(duì)新型診斷和臨床轉(zhuǎn)化有很大希望。近的研究已經(jīng)將這些交流所需的一些任務(wù)歸結(jié)為細(xì)胞外囊泡（如外泌體和微泡），主要參與髓鞘膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元之間的相互信號(hào)傳遞從而促進(jìn)神經(jīng)元存活、由小膠質(zhì)細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答、突觸組裝和可塑性。這種囊泡也被認(rèn)為是神經(jīng)變性疾病和腦病擴(kuò)散的重要因素。這些細(xì)胞外囊泡功能為以前無(wú)法識(shí)別的神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)跨細(xì)胞相互作用增加了新方式。細(xì)胞外泌體質(zhì)譜

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