外泌體翻譯

來源: 發(fā)布時間:2023-06-13

人體內(nèi)多種細胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體,包括干細胞、免疫細胞、內(nèi)皮細胞、血小板及平滑肌細胞等。外泌體被包裹在堅硬的雙層膜中。雙層膜保護外泌體的內(nèi)容物,使外泌體能夠在組織中長距離移動。干細胞外泌體因在上皮組織的增殖、遷移、再生、炎癥和瘢痕控制等方面的作用,有望成為“無細胞的細胞治理”工具。干細胞來源的外泌體可通過囊泡,將干細胞的精華部分——mRNA、miRNA、IncRNA及蛋白質等生物活性物質,打包運出干細胞體外。通過“細胞間高速公路”來“快遞”到人體各個組織內(nèi)。外泌體天然的可以攜帶遺傳到靶細胞中,從而在生物學和致病過程中誘導遺傳修飾。外泌體翻譯

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建立記錄各論文實驗條件的數(shù)據(jù)庫也可作為規(guī)避混亂的方法之一。一方面,隨著EV研究倍受世界矚目,各國啟動了大型研究項目。美國啟動NIH戰(zhàn)略性大型項目(ExtracellularRNACommunication),國際厲害性學會——Gordon和KeystoneSymposia也從2016開始成立會議小組。受到歐洲藥物研究開發(fā)公司“創(chuàng)新藥物倡議組織(IMI)”的支持推進的CANCER-ID項目,也包含EV研究在內(nèi)。2017年日本選定了EV研究為文部科學省研究開發(fā)戰(zhàn)略的目標之一,期待會加速今后的研究發(fā)展。無論如何,今后EV研究的根本就是必須有強有力的研究方法和技術,而PS親和法有望成為其中之一。乳液外泌體提取試劑盒方法與正常細胞來源外泌體在結構分子上的差異倍受矚目。

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外泌體(Exosome)介導瘤細胞的增殖過程。瘤細胞通過與自身微環(huán)境的信息交流促進瘤細胞的增殖,而外泌體(Exosome)可以充當這種信息載體。當細胞中出現(xiàn)基因突變時,外泌體(Exosome)會通過膜融合把這種突變信息傳遞至其他的正常細胞,從而導致原病基因的喚醒、抗凋亡基因的表達,使瘤細胞獲得增殖特性。瘤細胞來源的外泌體(Exosome)還可以通過直接抑制免疫細胞,促進瘤細胞逃避免疫監(jiān)視,為瘤細胞在體內(nèi)生長創(chuàng)造條件。然而,雖然當前外泌體生物學仍然不成熟,但越來越多的興趣和資金投入必將加速外泌體基礎研究進展和臨床轉化。

外泌體中存在著某些特定的蛋白質、脂質和多糖,基于抗原–抗體特異性識別和結合作用原理,可將外泌體從其他組分中分離出來。四次跨膜蛋白家族、脂膜、膜聯(lián)蛋白、上皮細胞黏附分子或肝素等都可以作為抗原,而捕獲外泌體的抗體可以附著在平板、磁珠、二氧化硅、樹脂、膜親和過濾器、纖維素濾膜、聚酰氨基胺樹狀聚合物表面和微流控器件上。常用方法有酶聯(lián)免疫吸附法和磁珠法等。酶聯(lián)免疫吸附法使用聚苯乙烯微孔板作為抗體附著介質,其結果用吸光度值表示,該方法可以快速分析已知表面生物標志物的表達,也可以瞬時讀出外泌體的產(chǎn)量和特異性。磁珠法多使用共價包覆鏈霉親和素的磁珠,與樣品一起孵育后可通過磁泳將被結合的外泌體從樣品組分中分離出來。鑒于微米級磁珠可賦予更大的接觸面積,該方法不jin具有高度特異性,還具有比超速離心更高的外泌體產(chǎn)率。外泌體是具有生物活性的脂雙層囊泡。

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Exosome(外泌體)是由活細胞分泌小囊泡,具有典型的脂質雙分子層結構;參與細胞之間的交流,物質的運輸以及正常生理過程的維持,此外還與疾病的產(chǎn)生有關。對分離的外泌體進行體外標記或示蹤,有助于對外泌體的功能進行進一步的研究。目前對于外泌體的標記方法有很多種,包括親脂性的染料和膜滲透型的化合物等。PKH67的體內(nèi)熒光半衰期為10-12天。相比于PKH-67,PKH-26具有更長的半衰期,標記在兔紅細胞上的PKH26半衰期長達100天以上。特別適用于體外增殖研究以及長期的體內(nèi)細胞跟蹤研究。需要開發(fā)大規(guī)模生產(chǎn)質量可控的外泌體并快速純化外泌體的技術和策略。乳液外泌體提取試劑盒方法

細胞表面受體表達不同,外泌體對受體細胞的影響可能不同,可能誘導細胞存活,也可能誘導凋亡或免疫調(diào)節(jié)等。外泌體翻譯

要使外泌體在臨床上得以更加廣fan的應用,仍然需要更加深入的研究:(1)外泌體的提純方式主要是超速離心,這種提純方式效率較低,耗費時間長并且相對昂貴,并不適宜在臨床上應用。(2)外泌體雖然具有一定的靶向性,但這種靶向性較弱,不足以解決中流的靶向zhiliao問題。通過在外泌體表面表達特異性肽的方法可以為上述問題的解決提供較為有效的途徑。(3)在外泌體的載藥fang式方面,現(xiàn)在常用的電穿孔法雖更具優(yōu)勢,但往往會對外泌體或藥物的完整性產(chǎn)生影響,轉染外泌體法不能保證基因類藥物全部進入外泌體內(nèi)而不是粘附在外泌體表面,存在著安全隱患。(4)外泌體作為細胞分泌物質,其本身可調(diào)性并不如脂質體以及聚合物基藥物載體。外泌體翻譯

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