福建外泌體lncRNA芯片

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2023-07-10

外泌體可以由體內(nèi)或體外培養(yǎng)的幾乎所有類(lèi)型的細(xì)胞分泌,并廣fan存在于血漿、膽汁、尿液、母乳、唾液、胸腔積液、淋巴、胃酸、支氣管肺泡灌洗液、腦脊液、眼淚、滑膜液、羊水、腹水、鼻分泌物和子宮抽吸物液體等體液中。目前,基于不同的分離原理,研究者建立了五種主要的提取純化技術(shù),分別為基于質(zhì)量密度的超速離心技術(shù)、基于粒徑大小的分離技術(shù)、基于溶解性質(zhì)的聚合物沉淀技術(shù)、基于免疫親和原理的分離技術(shù)和基于流體性質(zhì)的微流控技術(shù)。外泌體功能在研究初期階段發(fā)現(xiàn)是參與細(xì)胞成熟過(guò)程中去除不必要的蛋白質(zhì)。福建外泌體lncRNA芯片

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卵巢ai患者與良性卵巢疾病患者血清外泌體中的miRNA表達(dá)譜有明顯差異,表明血清外泌體中的miRNA可以作為卵巢ai活檢的替代診斷標(biāo)志物。多項(xiàng)研究表明外泌體中的miR-21在包括大多數(shù)ai癥的多種病理?xiàng)l件下過(guò)度表達(dá)。尿液外泌體來(lái)源于泌尿系統(tǒng)相關(guān)的各種細(xì)胞,包括腎小球足細(xì)胞、腎小管細(xì)胞和膀胱等,因此尿液外泌體數(shù)目、形態(tài)和生化性質(zhì)的改變往往反映泌尿系統(tǒng)疾病。通過(guò)對(duì)前列腺ai癥患者尿液中的外泌體進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組分析,鑒定到兩種已知的前列腺ai癥標(biāo)志物PCA-3(prostatecanceranti[1]gen3,前列腺ai抗原3)和TMPRSS2:ERG(thefusiongeneoftransmembraneproteaseserinestoERG,跨膜蛋白酶絲氨酸與ERG的融合基因),表明尿液外泌體具有診斷和監(jiān)測(cè)ai癥患者狀態(tài)的潛力。山東外泌體Dil外泌體中含有豐富的蛋白質(zhì)和遺傳物質(zhì)DNA以及RNA等。

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人體內(nèi)多種細(xì)胞及體液均可分泌外泌體,包括內(nèi)皮細(xì)胞、免疫細(xì)胞、血小板、平滑肌細(xì)胞等。當(dāng)其由宿主細(xì)胞被分泌到受體細(xì)胞中時(shí),外泌體可通過(guò)其攜帶的蛋白質(zhì)、核酸、脂類(lèi)等來(lái)調(diào)節(jié)受體細(xì)胞的生物學(xué)活性。外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞間通訊主要通過(guò)以下三種方式:一是外泌體膜蛋白可以與靶細(xì)胞膜蛋白結(jié)合,進(jìn)而喚醒靶細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路。二是在細(xì)胞外基質(zhì)中,外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切,剪切的碎片可以作為配體與細(xì)胞膜上的受體結(jié)合,從而喚醒細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路。有報(bào)道稱(chēng)一些外泌體膜上蛋白在其來(lái)源細(xì)胞膜上未能檢測(cè)出。三是外泌體膜可以與靶細(xì)胞膜直接融合,非選擇性的釋放其所含的蛋白質(zhì)、mRNA以及microRNA。

所有真核細(xì)胞類(lèi)型包括造血細(xì)胞、上皮細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、干細(xì)胞、脂肪細(xì)胞和病癥細(xì)胞均可在培養(yǎng)條件下分泌外泌體。體內(nèi)所有體液,包括血液、唾液、腦脊液、腹水,甚至尿液中都可以分離得到外泌體。這些外泌體傳輸多種信號(hào)分子,包括蛋白質(zhì)、信使核糖核酸(mRNA)和非編碼核糖核酸(RNA),其攜帶的分子可以被其他細(xì)胞吸收。因此,外泌體可以將生物信息轉(zhuǎn)移到相鄰細(xì)胞。這種細(xì)胞間通信不只涉及生理功能,還涉及一些疾病的發(fā)病機(jī)理,包括瘤、心血管疾病和神經(jīng)退行性疾病等。外泌體的功能取決于其所來(lái)源的細(xì)胞類(lèi)型。

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circZKSCAN1在肝ai細(xì)胞中低表達(dá)且抑制肝ai細(xì)胞的增殖,ciRS-7則被認(rèn)為是非小細(xì)胞肺ai、結(jié)腸ai和胃ai等中流的預(yù)后指標(biāo),其高表達(dá)與較高的臨床分期和較差的總體生存期相關(guān)。目前已發(fā)現(xiàn)組織、血液和外泌體中的circRNA分子表達(dá)失調(diào),而多種circRNA的聯(lián)合檢測(cè)會(huì)提高外泌體標(biāo)志物的敏感性和特異性,甚至可達(dá)到90%左右。外泌體可作為納米載體來(lái)介導(dǎo)細(xì)胞間的信息傳遞,發(fā)揮信息傳遞作用的方式主要有:在細(xì)胞間轉(zhuǎn)移受體,通過(guò)配體受體介導(dǎo)的方式作用于受體細(xì)胞,向受體細(xì)胞轉(zhuǎn)移功能蛋白,通過(guò)膜融合方式向受體細(xì)胞傳遞mRNA、miRNAs或轉(zhuǎn)錄因子等信息。這些方式為中流靶向zhiliao開(kāi)辟了新的途徑。外泌體的復(fù)雜性,為疾病檢測(cè)和監(jiān)測(cè)提供了一個(gè)多指標(biāo)的診斷窗口。提取試劑盒分類(lèi)

在從體液中提取外泌體后,體液可長(zhǎng)期穩(wěn)定保存。福建外泌體lncRNA芯片

為了解決外泌體實(shí)驗(yàn)遇到的上述的各種問(wèn)題,Wako研發(fā)出MagCapture?外泌體提取試劑盒PS(MagCapture?ExosomeIsolationKitPS)提取高純度細(xì)胞外囊泡。外泌體膜含有分泌細(xì)胞源的蛋白和脂質(zhì),眾所周知磷脂酰絲氨酸(PS)在活細(xì)胞通過(guò)翻轉(zhuǎn)酶作用導(dǎo)向細(xì)胞膜內(nèi)側(cè),暴露在外泌體膜外側(cè)3)。另外,T-cellimmunoglobulindomainandmucindomain-containingprotein4(Tim4通過(guò)巨噬細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞凋亡的吞噬受體)蛋白通過(guò)細(xì)胞外域IgV域與含有鈣離子的PS結(jié)合4)。基于上述知識(shí),我們利用Tim4固化磁珠,在鈣離子存在下捕捉培養(yǎng)上清和血清等樣品中的外泌體,再添加螯合劑洗脫外泌體,這種外泌體純化方法是和金澤大學(xué)醫(yī)學(xué)系免疫學(xué)華山教授共同開(kāi)發(fā),并取得了成功。5)這是迄今為止取代黃金標(biāo)準(zhǔn)超速離心法的新型外泌體純化方法。福建外泌體lncRNA芯片

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