血漿外泌體iTRAQ

獲得囊泡粒徑分布的兩種方法動態(tài)光散射(DLS)和納米顆粒跟蹤分析(NTA)都被廣fan應(yīng)用于外泌體顆粒數(shù)目和粒徑分布的測量，但兩種方法也各有不足。動態(tài)光散射法中散射光強度依賴于顆粒質(zhì)量(體積)，混合體系中大囊泡的存在(即使只有很少的量)將嚴重影響測量結(jié)果，因此動態(tài)光散射法更適用于單分散體系。而且動態(tài)光散射法所得的結(jié)果強烈依賴于所應(yīng)用的數(shù)學算法。而采用納米顆粒跟蹤分析儀對不同粒徑范圍的囊泡進行檢測時，為了得到準確的濃度和粒徑信息，需要根據(jù)所要測量的顆粒粒徑范圍對儀器分別校準，操作繁瑣。受檢測靈敏度所限，納米顆粒跟蹤分析儀適用于粒徑范圍50nm～1μm的顆粒，粒徑小于50nm的外泌體無法檢測。除此之外，兩種方法都依賴光散射和粒子的布朗運動進行分析，難以區(qū)分合成的納米材料、大蛋白質(zhì)聚合體和生物囊泡。外泌體的形成始于細胞內(nèi)陷，成熟于多囊泡胞內(nèi)體，終于膜融合。血漿外泌體iTRAQ

泌體是細胞內(nèi)源性的小囊泡，由大多數(shù)細胞分泌。在抗原呈遞細胞中的外泌體發(fā)揮作用的報道后，人們對外泌體的興趣增強，并且觀察到它們可以在體內(nèi)刺激免疫應(yīng)答。在過去幾年中，有幾個實驗室報道了各種細胞類型的外泌體分泌，并討論了其潛在的生物學功能。該綜述描述了將外泌體定義為特定的分泌囊泡群體的物理性質(zhì)，總結(jié)了其生物學效應(yīng)，特別是免疫系統(tǒng)，討論了分泌囊泡可能作為細胞間信使的潛在作用。細胞分泌到細胞外環(huán)境中分別稱為外泌體和微泡的細胞外膜泡是內(nèi)源性和質(zhì)膜起源的不同類型的膜囊泡。這些細胞外囊泡（EVs）表示了細胞間通訊的一個重要模式，作為膜和細胞溶質(zhì)蛋白、脂質(zhì)和RNA細胞之間傳遞的載體。然而，我們對于EV形成的分子機制知識的缺乏以及缺乏干擾貨物包裝或囊泡釋放的方法仍然妨礙了其在體內(nèi)生理相關(guān)性的探索。這篇綜述專注于EV的特性和目前提出的形成、定位和功能的機制。外周血外泌體提取試劑盒產(chǎn)品標準外泌體在化療藥物的促轉(zhuǎn)移過程中具有重要的作用。

外泌體（Exosome）介導瘤細胞的增殖過程。瘤細胞通過與自身微環(huán)境的信息交流促進瘤細胞的增殖，而外泌體（Exosome）可以充當這種信息載體。當細胞中出現(xiàn)基因突變時，外泌體（Exosome）會通過膜融合把這種突變信息傳遞至其他的正常細胞，從而導致原病基因的喚醒、抗凋亡基因的表達，使瘤細胞獲得增殖特性。瘤細胞來源的外泌體（Exosome）還可以通過直接抑制免疫細胞，促進瘤細胞逃避免疫監(jiān)視，為瘤細胞在體內(nèi)生長創(chuàng)造條件。然而，雖然當前外泌體生物學仍然不成熟，但越來越多的興趣和資金投入必將加速外泌體基礎(chǔ)研究進展和臨床轉(zhuǎn)化。

外泌體起源于多泡體,以細胞管腔內(nèi)囊泡的形式存在.細胞的胞吞形成帶有外源性抗體的內(nèi)體小泡,在高爾基體等細胞器的作用下形成早期核內(nèi)體,早期核內(nèi)體的囊膜內(nèi)陷、突入形成多個小囊泡,并選擇性的接受細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、核酸、脂類等成分,較終形成晚期核內(nèi)體,晚期核內(nèi)體與細胞膜融合,并將外泌體排出胞外。這是一個連續(xù)而又復雜的過程,從內(nèi)體小泡到成熟外泌體,需要在各細胞器間傳遞并包裝,包括:TSG101、Alix蛋白、CD63、CD81、神經(jīng)酰胺、膽固醇等。外泌體的排出跟其他胞內(nèi)小泡大致相同,受到Rab家族蛋白的調(diào)控,敲除細胞的Rab27a和Rab27b蛋白后,外泌體不能排出,且從高爾基體到晚期核內(nèi)體的囊泡運輸不受影響。從體液和培養(yǎng)上清中高純度提取的高純度外泌體，在活內(nèi)是否真的能發(fā)生作用尚未能確定。

外泌體是由細胞細胞質(zhì)內(nèi)的晚期內(nèi)泡小體以膜融合的方式通過胞吐方式主動分泌到細胞外環(huán)境的一種直徑30-100nm的微型囊泡，其形態(tài)規(guī)則，呈圓形或橢圓形杯狀結(jié)構(gòu)，不同類型細胞分泌的外泌體具有很多共性，包括膜上富含脂筏及豐富的跨膜蛋白，如四次跨膜蛋白家族成員CD63、CD81等，表面為類似于細胞膜的脂質(zhì)雙分子層，具有一定的疏水性。外泌體能夠攜帶微小RNA(microRNAs,miRNAs)、RNA、蛋白質(zhì)等生物活性分子，并在細胞外環(huán)境穩(wěn)定存在，而且通過傳遞供體細胞信息，調(diào)節(jié)靶細胞的代謝通路。外泌體可由多種類型細胞分泌，妊娠期母體血清中存在表達胎盤堿性磷酸酶（placentalalkalinephosphatase,）的胎盤來源外泌體，并且在妊娠中發(fā)揮重要的作用。泌體是細胞內(nèi)源性的小囊泡，由大多數(shù)細胞分泌。血漿外泌體iTRAQ

各種細胞粘著分子在外泌體膜表面表達，由其決定外泌體被運輸往哪一種細胞。血漿外泌體iTRAQ

外泌體是新型治理劑，惡性瘤細胞往往能夠通過分泌大量外泌體抑制宿主固有免疫。對外泌體的質(zhì)譜研究發(fā)現(xiàn)，惡性瘤細胞的外泌體含有大量活化型的表皮生長因子受體（epidermalgrowthfactorreceptor，EGFR），可以抑制宿主細胞α型干擾素(IFN-α)的產(chǎn)生。這就解釋了為什么部分瘤患者固有免疫低下，也為晚期病癥患者的治理提供一個新的策略和理論依據(jù)。除了瘤，外泌體在其他疾病如心血管疾病等的診斷和治理的相關(guān)臨床試驗也在世界范圍內(nèi)開展中。血漿外泌體iTRAQ

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