細胞外囊泡 外泌體

外泌體（exosome）是一種由活細胞分泌的，直徑約為40～160nm的具有雙層膜結(jié)構(gòu)的生物活性囊泡。它攜帶了分泌細胞包含的生物活性物質(zhì)，如DNA、miRNAs、mRNA、長鏈非編碼RNA（LncRNA）、酶、蛋白質(zhì)和細胞代謝物等。外泌體在細胞間通信中扮演著十分重要的角色。目前對于外泌體的研究涉及包括瘤的發(fā)生和發(fā)展、侵襲轉(zhuǎn)移機制、瘤診斷標(biāo)志物以及藥物傳遞系統(tǒng)等諸多方面。外泌體是一個高度異質(zhì)性的群體，具有獨特的誘導(dǎo)復(fù)雜生物學(xué)反應(yīng)的能力。外泌體的異質(zhì)性可以根據(jù)其大小、含量(載物)、對受體細胞的功能影響以及細胞來源來區(qū)分。這些特征的不同組合導(dǎo)致了外泌體的復(fù)雜異質(zhì)性。外泌體由于包含的內(nèi)容物具有明顯的組織特異性，為其能成為瘤早期診斷的生物標(biāo)志物提供了重要保障。細胞外囊泡 外泌體

微流控芯片是一種可兼容多種外泌體分離方法的新興檢測平臺,這些方法包括免疫親和分離、膜過濾、納米線捕獲、聲納米過濾和確定性側(cè)向位移分選等。微流控裝置是由幾十到幾百微米的不同直徑微通道網(wǎng)絡(luò)組成的緊湊單元,能夠處理皮升到微升范圍內(nèi)的黏性介質(zhì)樣品;且根據(jù)特定的功能,微通道可以相互連接,使用額外的特定裝置來微調(diào)流體運動。微流控技術(shù)能夠以極高的準(zhǔn)確性和特異性在微尺度上重現(xiàn)眾多實驗室過程,取代昂貴的設(shè)備,基于微流控技術(shù)的電化學(xué)外泌體檢測芯片已經(jīng)受到廣fan關(guān)注。江蘇外泌體質(zhì)譜因外泌體內(nèi)含mRNA、microRNA等核酸和蛋白質(zhì)對相鄰細胞具有交換信息的功能。

外泌體的提取方法：免疫磁珠法，這種方法可以保證外泌體形態(tài)的完整，特異性高、操作簡單、不需要昂貴的儀器設(shè)備，但是非中性pH和非生理性鹽濃度會影響外泌體生物活性，不便進行下一步的實驗。PS親和法，該方法將PS（磷脂酰絲氨酸）與磁珠結(jié)合，利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS。該方法與免疫磁珠法相似，獲得的外泌體形態(tài)完整，純度較高。由于不使用變性劑，不影響外泌體的生物活性，外泌體可用于細胞共培養(yǎng)和體內(nèi)注射。PS法可提取相當(dāng)高純度的外泌體。色譜法，這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一，但是需要特殊的設(shè)備，應(yīng)用不寬泛。

外泌體（Exosome）開始被認(rèn)為是毫無作用的“垃圾”，但隨著研究的不斷深入，人們發(fā)現(xiàn)事實并非如此，外泌體（Exosome）是具有功能活性并可進行細胞間信息傳遞的微囊泡。外泌體（Exosome）介導(dǎo)瘤細胞的免疫耐受。瘤細胞來源的外泌體（Exosome）本身可作為瘤抗原，因此，瘤來源的外泌體（Exosome）既是一種抗原呈遞系統(tǒng)，同時也是瘤排斥抗原的來源。瘤來源的外泌體（Exosome）能夠通過傳遞某些抑制信號，在機體免疫應(yīng)答過程中起負(fù)性調(diào)節(jié)作用，誘導(dǎo)瘤細胞形成免疫耐受，從而逃避免疫細胞的殺傷。確認(rèn)外泌體生理作用的單獨方法就是明確外泌體的釋放機制，通過促進或壓制釋放機制。

利用抗ai癥藥物進行中流zhiliao是抑制中流的一個重要方法，不過目前抗ai癥藥物的運載存在著種種挑戰(zhàn)，主要體現(xiàn)在以下幾點:(1)抗ai癥藥物的疏水性;(2)抗ai癥藥物的毒性以及非靶向性;(3)易被人體清chu，體內(nèi)循環(huán)的半衰期很短等。采用外泌體運輸抗ai癥藥物，可以提高藥物體系的水溶性，降低藥物對人體的毒性以及避免被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)捕捉從而延長其循環(huán)時間。近期，兩種抗ai癥藥物———紫杉醇(PTX)和阿霉素(DOX)已經(jīng)成功被載入外泌體中，并對其抗中流作用進行了研究。外泌體觀察到它們可以在體內(nèi)刺激免疫應(yīng)答。成都血漿外泌體

外泌體作為核酸分子的藥物載體主要用于基因治理。細胞外囊泡 外泌體

外泌體是各種細胞外泌的直徑在30-100nm之間的膜囊泡。因外泌體內(nèi)含mRNA、microRNA等核酸和蛋白質(zhì)對相鄰細胞具有交換信息的功能。作為細胞間信號傳導(dǎo)的通訊工具和作為病等各種疾病的生物標(biāo)記話題比較熱門。近些年關(guān)于外泌體研究很普遍，但是關(guān)于外泌體相關(guān)的實驗技術(shù)，關(guān)于需要改進的課題存在很多。例如，外泌體提純方法中，超速離心法和聚合物沉淀法（市售試劑盒）混入多種雜質(zhì)，給后續(xù)實驗產(chǎn)生了許多障礙?？贵w親和法和密度梯度離心法，雖然可以提取到高純度的外泌體，但不能提取完整外泌體，無法分析外泌體具有的生理功能，也是兩種提取方法的問題所在。而免疫印跡法（WB）和Elisa檢測法作為被普遍應(yīng)用的外泌體檢測的一般方法，又存在檢測時需使用大量外泌體和難以檢測到低表達水平的標(biāo)記蛋白。細胞外囊泡 外泌體