深圳MII期紡錘體Oosight Meta

為了減少冷凍過程中紡錘體的損傷，研究者們嘗試在冷凍液及解凍液中添加細胞骨架保護劑，如紫杉醇（Taxol）。紫杉醇能夠穩(wěn)定微管結(jié)構(gòu)，防止其在低溫下解聚。通過偏光成像技術(shù)，研究者可以實時監(jiān)測紫杉醇對紡錘體的保護效果，評估其在冷凍保存過程中的作用機制。此外，還可以進一步觀察解凍后卵母細胞的發(fā)育潛能，為臨床應(yīng)用提供可靠依據(jù)。無需對細胞進行固定和染色，保持細胞的活性與完整性。能夠?qū)崟r監(jiān)測紡錘體的形態(tài)變化，評估冷凍效果。能夠捕捉到細微的紡錘體形態(tài)變化，提高評估的準確性。紡錘體在細胞分裂后期推動染色體向細胞兩極移動。深圳MII期紡錘體Oosight Meta

如何觀察紡錘體呢？

在普通光學顯微鏡下，人類卵母細胞是半透明的，無法對紡錘體的結(jié)構(gòu)進行觀察和分析。傳統(tǒng)方法是用一種特異的DNA熒光染料對卵母細胞染色，在紫外光下可顯示紡錘體，這種免疫熒光方法對卵母細胞有損傷，不能應(yīng)用于臨床。為了更好的觀測紡錘體，美國海洋生物學實驗室的R．Oldenbourg等利用紡錘體的雙折射特性，開發(fā)出偏振光顯微鏡?，F(xiàn)今，偏振光顯微鏡已經(jīng)發(fā)展成為一種無創(chuàng)性的觀察和分析紡錘體動態(tài)結(jié)構(gòu)的顯微觀測系統(tǒng)，我們也叫它紡錘體觀測儀。它不僅能對雙折射性紡錘體信號的有無進行定性分析，還能對信號的強弱進行定量分析。 美國卵母細胞紡錘體揭示卵母細胞關(guān)鍵結(jié)構(gòu)顯微鏡下的紡錘體，如同精密的分子機器，引導(dǎo)染色體分離。

在生殖醫(yī)學領(lǐng)域，卵母細胞的冷凍保存技術(shù)一直是研究的熱點之一。尤其是針對卵母細胞內(nèi)部高度復(fù)雜且精細的紡錘體結(jié)構(gòu)，其冷凍過程中的穩(wěn)定性與完整性直接關(guān)系到解凍后卵母細胞的存活率及發(fā)育潛能。紡錘體作為卵母細胞內(nèi)部的關(guān)鍵結(jié)構(gòu)，由微管等高分子物質(zhì)有序排列而成，具有雙折射性。這種特性使得紡錘體在偏振光下能夠呈現(xiàn)出獨特的形態(tài)和特征，從而被Polscope等偏振光顯微鏡捕捉并觀察。雙折射性紡錘體的形態(tài)、穩(wěn)定性和完整性對于卵母細胞的正常減數(shù)分裂及胚胎發(fā)育至關(guān)重要。

紡錘體觀測儀在補救ICSI中的應(yīng)用

我們知道，成熟的卵母細胞排出***極體。IVF加入精子后，精子會穿透層層障礙**終進入卵子，隨著時間的推移，卵子的紡錘體會將染色單體拉向兩極，進而排出第二極體，再往后大約加精后9-16小時，雌雄原核會出現(xiàn)，而原核的出現(xiàn)才是受精的標志。但是對于那些沒有受精的卵子，到了原核出現(xiàn)的時間窗，發(fā)現(xiàn)沒有受精時再去補救ICSI，往往錯過了卵子的比較好受精時間，因為沒有受精的卵子會在體外老化，即使受精，胚胎的發(fā)育潛能也很低。所以，我們在加精后的4-6小時，通過觀察第二極體的排出來初步判斷是否受精，**的增加了那些受精障礙患者的受精率，也避免了卵子的老化。

當然，偶爾也會出現(xiàn)錯誤補救。文獻報道對IVF受精后的未排出第二極體的卵母細胞進行ICSI補救，實驗組用紡錘體觀測儀觀察并統(tǒng)計紡錘體的數(shù)目，82.7%含有一個紡錘體，17.3%含有兩個紡錘體，并對含有一個紡錘體的卵母細胞進行補救ICSI；而對照組并未用紡錘體觀測儀觀察紡錘體，只對未排出第二極體的卵母細胞進行補救ICSI。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，使用紡錘體觀測儀觀察紡錘體的數(shù)目能顯著提高正常受精率，降低多原核受精比率。 紡錘體微管的排列和穩(wěn)定性受到細胞骨架的支撐。

紡錘體

      特殊細胞器

      紡錘體(Spindle Apparatus)，形似紡錘，是產(chǎn)生于細胞分裂前初期(Pre-Prophase)到末期(Telophase)的一種特殊細胞器。其主要元件包括微管(Microtubules)，附著微管的動力分子分子馬達(Molecular motors),以及一系列復(fù)雜的超分子結(jié)構(gòu)。一般來講，在動物細胞中，中心體是紡錘體的一部分。高等植物細胞的紡錘體不含中心體。而***細胞的紡錘體含紡錘極體(Spindle Pole Body)，一般被視為中心體的同源細胞器。

       紡錘體是由大量微管縱向排列組成的中部寬闊、兩級縮小的如紡錘狀的結(jié)構(gòu)。在細胞分裂中，紡錘體對卵母細胞染 色體的運動、平衡、分配以及極體排出都非常重要。卵母細胞紡錘體的異常會導(dǎo)致減數(shù)分裂異常，產(chǎn)生非整倍體的卵母細胞或者成熟阻滯的卵母細胞。 紡錘體微管的動態(tài)變化受到細胞周期蛋白的調(diào)控。武漢卵母細胞紡錘體透明帶

紡錘體微管的動態(tài)變化是細胞對外界刺激響應(yīng)的一部分。深圳MII期紡錘體Oosight Meta

隨著技術(shù)的不斷進步和創(chuàng)新，未來有望開發(fā)出更加便捷、高效、低成本的偏振光成像系統(tǒng)，進一步降低設(shè)備成本并提高操作簡便性。同時，通過優(yōu)化成像算法和數(shù)據(jù)處理技術(shù)，可以實現(xiàn)對紡錘體形態(tài)變化的更精細、更準確的評估。無需染色紡錘體卵冷凍研究涉及生殖醫(yī)學、細胞生物學、材料科學等多個領(lǐng)域。未來通過加強不同學科之間的交叉融合和協(xié)同創(chuàng)新，可以推動該領(lǐng)域取得更多突破性進展。隨著技術(shù)的不斷成熟和成本的降低，無需染色紡錘體卵冷凍技術(shù)有望在更多醫(yī)療機構(gòu)中得到應(yīng)用和推廣。這將為更多女性提供生育能力保存的機會，同時也為生殖醫(yī)學領(lǐng)域的發(fā)展注入新的活力。深圳MII期紡錘體Oosight Meta