無(wú)錫數(shù)字PCR品牌

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2022-09-26

與常規(guī)PCR方法相比,數(shù)字PCR有如下優(yōu)勢(shì):1、能夠***定量:常規(guī)PCR定量需要制定已知拷貝數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)DNA曲線,但是由于待檢樣本與標(biāo)準(zhǔn)曲線不在統(tǒng)一體系,條件上會(huì)存在差異,另外加上PCR擴(kuò)增效率的差異從而影響定量結(jié)果的準(zhǔn)確性。而數(shù)字PCR不受標(biāo)準(zhǔn)曲線和擴(kuò)增動(dòng)力學(xué)影響,可進(jìn)行***定量。2、樣本需求量低:適用于珍貴樣本或核酸降解嚴(yán)重的樣本。3、靈敏度高:數(shù)字PCR是將傳統(tǒng)PCR反應(yīng)體系分割成數(shù)萬(wàn)個(gè) PCR反應(yīng),這些反應(yīng)可以精確地檢測(cè)很小的目的片段差異、單拷貝甚至低濃度的混雜樣本。且能避免非同源異質(zhì)雙鏈的形成。4、高耐受性:由于目的序列被分配到多個(gè) 反應(yīng)體系中,***降低了背景信號(hào)和***物對(duì)反應(yīng)的干擾,擴(kuò)增基質(zhì)效應(yīng)大大減小。單次微滴生成*需2分鐘。無(wú)錫數(shù)字PCR品牌

無(wú)錫數(shù)字PCR品牌,數(shù)字PCR

數(shù)字PCR也叫DigitalPCR(dPCR),是近幾年發(fā)展起來(lái)的一種核酸定量分析技術(shù)。相較于傳統(tǒng)熒光定量PCR來(lái)說(shuō),數(shù)字PCR對(duì)結(jié)果的判定不依賴于擴(kuò)增曲線循環(huán)Ct值,不受擴(kuò)增效率的影響,能夠直接讀出DNA的分子個(gè)數(shù),能夠?qū)ζ鹗紭颖竞怂岱肿?**定量。數(shù)字PCR基本原理是將一個(gè)樣本分成幾十到幾萬(wàn)份,然后再將其分配到不同的反應(yīng)單元中,使每個(gè)微滴單元包含一個(gè)或多個(gè)拷貝的核酸分子(即DNA模板),每個(gè)單元都會(huì)對(duì)目標(biāo)分子進(jìn)行擴(kuò)增,然后再對(duì)每個(gè)單元進(jìn)行熒光信號(hào)的統(tǒng)計(jì)并計(jì)算。相對(duì)而言,傳統(tǒng)PCR或qPCR反應(yīng)都是發(fā)生于同一體系當(dāng)中,這也是數(shù)字PCR與其比較大的區(qū)別。南京JUE對(duì)定量數(shù)字PCR代理商可使用第三方PCR反應(yīng)液,配備PCR A300(溫度范圍4°C-98°C,擴(kuò)增模塊溫控精度±0.2°C)。

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相對(duì)于二代測(cè)序、基因芯片和定量PCR而言,數(shù)字PCR具備以下優(yōu)勢(shì):·能夠有效區(qū)分濃度差異微小的樣品:更好的準(zhǔn)確度、精密度和重復(fù)性,可以用于精確測(cè)定靶基因的相對(duì)表達(dá),基因拷貝數(shù)變異分析等?!?shù)字PCR可開(kāi)發(fā)針對(duì)不同**、不同樣本以及不同的樣本環(huán)境提供檢測(cè)解決方案,該技術(shù)的應(yīng)用范圍廣,尤其在液體活檢領(lǐng)域,已開(kāi)發(fā)針對(duì)肺*、乳腺*、腸*、胃*等上百個(gè)位點(diǎn)檢測(cè)試劑盒,可精細(xì)指導(dǎo)臨床***的診斷,以便患者在后續(xù)得到更及時(shí)并且適當(dāng)?shù)?**方案提供。

研究方向無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前篩查無(wú)創(chuàng)傷的產(chǎn)前診斷,如21號(hào)染色體為3倍體的唐氏綜合征、已知父母基因型的胎兒地貧檢測(cè)或已知父母基因型的其它核酸病檢測(cè)(孟德?tīng)栂嚓P(guān)遺傳疾病)。目前標(biāo)本來(lái)源主要為血液,而待檢測(cè)的胎兒DNA受到母體DNA的干擾,影響了檢測(cè)的準(zhǔn)確性。而QX200檢測(cè)系統(tǒng)獨(dú)特的微滴化技術(shù)完全可以作為二代測(cè)序法的補(bǔ)充來(lái)進(jìn)行的無(wú)創(chuàng)傷產(chǎn)前診斷,從而提高工作效率及節(jié)約成本。轉(zhuǎn)基因食品或成分的檢測(cè)目前在確定轉(zhuǎn)基因作物或成分的含量時(shí)采取定量PCR的標(biāo)準(zhǔn)曲線法,這種方法需要依賴于已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品(CertifiedReferenceMaterialsCalibrants,CRMCs)。ddPCR***定量的方式可以徹底解決這些標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的定標(biāo)工作。采用微滴式技術(shù)高達(dá)100,000個(gè)的微滴。

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數(shù)字PCR為juedui定量,qPCR為相對(duì)定量,數(shù)字PCR較qPCR更精細(xì)、更靈敏。所以說(shuō),未來(lái)數(shù)字PCR將成為qPCR的重要補(bǔ)充,在部分領(lǐng)域逐步替代熒光定量PCR。未來(lái)這些領(lǐng)域?qū)V泛應(yīng)用到數(shù)字PCR:科研:高校(生命科學(xué)學(xué)院、環(huán)境學(xué)院、醫(yī)學(xué)院、藥學(xué)院)等。醫(yī)院:病理科、血液科、婦產(chǎn)科、心血管科、檢驗(yàn)科、轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)中心:研究院?jiǎn)挝?、疾控中心、海關(guān)(出入境檢驗(yàn)檢疫)、質(zhì)監(jiān)局、環(huán)境/環(huán)保局等。企業(yè):第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)、IVD(分子體外診斷試劑)、生物制藥等。國(guó)內(nèi)擁有完全自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的微滴式數(shù)字PCR儀。南通微滴式數(shù)字PCR簡(jiǎn)介

超高靈敏度,適用于稀有序列及稀有突變的檢測(cè)。無(wú)錫數(shù)字PCR品牌

數(shù)字PCR檢測(cè)及分析原理在上世紀(jì)90年代就被提出來(lái)了,但是無(wú)奈受限于當(dāng)時(shí)的技術(shù)條件,樣本稀釋及分配都是靠手工來(lái)完成的,受到很多因素的干擾和限制;并且結(jié)果分析對(duì)于研究者來(lái)說(shuō)也十分枯燥與繁瑣,因此在很長(zhǎng)一段時(shí)間dPCR發(fā)展停滯不前。后來(lái)由于微流控技術(shù)與微納集成制造工藝的發(fā)展解決了dPCR過(guò)程中的幾個(gè)關(guān)鍵技術(shù)問(wèn)題,推動(dòng)了dPCR的研究與商業(yè)化的發(fā)展。目前根據(jù)dPCR樣本稀釋分配的方式,基本可分為三大類,一種是基于大規(guī)模集成微流控芯片;第二種是使用微反應(yīng)室/孔板;第三種是微滴式。但不論是走芯片式還是微滴式,其基本原理都是將大量稀釋后的核酸溶液分散至芯片的微反應(yīng)器或者微滴當(dāng)中,每個(gè)反應(yīng)器的核酸模板數(shù)少于1或者等于1。經(jīng)過(guò)PCR擴(kuò)增之后,有一個(gè)核酸分子的模板的反應(yīng)器就會(huì)給出熒光信號(hào),沒(méi)有模板的反應(yīng)器沒(méi)有熒光信號(hào)。根據(jù)相對(duì)比例和反應(yīng)器的體積,可以推算出原始溶液的核酸濃度。無(wú)錫數(shù)字PCR品牌

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