南京國產(chǎn)數(shù)字PCR原理

來源: 發(fā)布時間:2023-03-14

研究方向無創(chuàng)產(chǎn)前篩查無創(chuàng)傷的產(chǎn)前診斷,如21號染色體為3倍體的唐氏綜合征、已知父母基因型的胎兒地貧檢測或已知父母基因型的其它核酸病檢測(孟德爾相關遺傳疾病)。目前標本來源主要為血液,而待檢測的胎兒DNA受到母體DNA的干擾,影響了檢測的準確性。而QX200檢測系統(tǒng)獨特的微滴化技術完全可以作為二代測序法的補充來進行的無創(chuàng)傷產(chǎn)前診斷,從而提高工作效率及節(jié)約成本。轉基 因食品或成分的檢測目前在確定轉基因作物或成分的含量時采取定量PCR的標準曲線法,這種方法需要依賴于已知濃度的標準品(CertifiedReferenceMaterialsCalibrants,CRMCs)。ddPCR***定量的方式可以徹底解決這些標準物質(zhì)的定標工作。油包水乳化微滴技術,在微管道中利用氣壓驅(qū)動生成十萬個微滴,單個微滴體積體積低至皮升級。南京國產(chǎn)數(shù)字PCR原理

南京國產(chǎn)數(shù)字PCR原理,數(shù)字PCR

數(shù)字PCR是一種核酸分子 定量技術。當前核酸分子的定量有三種方法,光度法基于核酸分子的吸光度來定量;,Ct值就是指可以檢測到熒光值對應的循環(huán)數(shù);數(shù)字PCR是***的定量技術,基于單分子PCR方法來進行計數(shù)的核酸定量,是一種 定量的方法。主要采用當前分析化學熱門研究領域的微流控或微滴化方法,將大量稀釋后的核酸溶液分散至芯片的微反應器或微滴中,每個反應器的核酸模板數(shù)少于或者等于1個。這樣經(jīng)過PCR循環(huán)之后,有一個核酸分子模板的反應器就會給出熒光信號,沒有模板的反應器就沒有熒光信號。根據(jù)相對比例和反應器的體積,就可以推算出原始溶液的核酸濃度。常州JUE對定量數(shù)字PCR現(xiàn)貨MicroDrop?數(shù)字PCR平臺是由永諾生物自主研發(fā)并已投入生產(chǎn)的微滴式數(shù)字PCR檢測系統(tǒng)。

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研究方向甲基化含量鑒定作為表觀遺傳學研究中重要的一個研究方向——甲基化程度分析,現(xiàn)階段有不同的方法或技術來進行研究:如傳統(tǒng)的亞硫酸氫鹽處理后的克隆測序統(tǒng)計法、抗體檢測法、定量PCR檢測法等。這些方法皆因方法學的問題而不能獲得精確的定量,而微滴式數(shù)字PCR系統(tǒng)通過對樣品的微滴化處理及目標因子的***拷貝數(shù)定量,為甲基化程度的精確定量檢測提供了一種全新 的技術。*****的伴隨診斷常用體液來源(如血液,胸腹水,唾液及尿液等)的待檢標本中的DNA,有正常脫落體細胞和病變脫落細胞兩種來源,前者的量遠大于后者。通過微液滴處理能在每個微液滴中有效減少正常體細胞DNA的干擾,實現(xiàn)**標記物的有效檢測,如EGFR,ALK,ROS1,KRAS、BRAF等基因的突變檢測、乳腺*/胃*的HER2基因擴增檢測等,應用于**精細醫(yī)學的伴隨診斷。

研究方向*****的實時監(jiān)控已有數(shù)篇文章報道了使用數(shù)字PCR技術對患者***過程中的循環(huán)**DNA(ctDNA)進行檢測,實時監(jiān)控疾病進展。在非小細胞肺*、乳腺*和腸*等多種**患者中都取得了令人鼓舞的結果。與影像學及其他常規(guī)指標相比,ctDNA突變及豐度改變通常會提前數(shù)月出現(xiàn),這樣就可以提醒醫(yī)生及時調(diào)整***方案,使患者得到更有效的***。隨著數(shù)字PCR熒光通道的增加和多指標檢測的成熟,數(shù)字PCR將會進入更多應用領域,有力推動生命科學、醫(yī)學診斷、檢驗檢疫、農(nóng)業(yè)等領域的快速發(fā)展。超高靈敏度,適用于稀有序列及稀有突變的檢測。

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數(shù)字PCR(dPCR)是近年來引起重視并迅速發(fā)展起來的一種突破性的核酸定量分析技術。該技術先將核酸模板進行稀釋,分配到大量 的反應單元中,使每個反應單元中只有單個模板分子,然后進行PCR擴增反應,擴增結束后對每個反應室的熒光信號進行統(tǒng)計學分析,來定量DNA拷貝數(shù)。數(shù)字PCR采用先擴增后定量,因此不依賴擴增曲線的循環(huán)閾值(Ct),也無需采用內(nèi)參基因和標準曲線,準確度高、重現(xiàn)性好,可以實現(xiàn)***定量分析。由于其獨特的技術優(yōu)勢,已經(jīng)在臨床診斷、轉基因成分定量、單細胞基因表達分析、環(huán)境微生物檢測和下一代測序等研究領域顯示出巨大的優(yōu)勢和應用前景。線性范圍達到6個數(shù)量級,靈敏度高達萬分之一。深圳微流控芯片數(shù)字PCR哪家好

單細胞研究:測序、PCR。南京國產(chǎn)數(shù)字PCR原理

無創(chuàng)產(chǎn)前檢查鐮狀細胞貧血(sicklecellanemia)是HBB基因突變引起的常染色體顯性遺傳病,有嚴重的危害,可以導致高達5%的胎兒死亡率及4.62%的孕婦死亡率 。而精細有效的無創(chuàng)產(chǎn)前診斷是預防鐮狀細胞貧血患兒出生的有效方法。研究人員采用dPCR技術檢測孕婦胎兒游離DNA(cff-DNA)HBB基因突變。結果顯示,dPCR技術能夠確定87%的男性胎兒(n=45)和75%的女性胎兒(n=20)HBB基因的突變狀態(tài)。當cff-DNA濃度大于7%時,可以**的檢測出HBB基因突變[3],可以說是相當厲害了。南京國產(chǎn)數(shù)字PCR原理

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