杭州微滴式數(shù)字PCR簡介

       數(shù)字PCR也叫Digital PCR（dPCR），是近幾年發(fā)展起來的一種核酸定量分析技術。相較于傳統(tǒng)熒光定量PCR來說，數(shù)字PCR對結果的判定不依賴于擴增曲線循環(huán)Ct值，不受擴增效率的影響，能夠直接讀出DNA的分子個數(shù)，能夠對起始樣本核酸分子***定量。

       數(shù)字PCR基本原理是將一個樣本分成幾十到幾萬份，然后再將其分配到不同的反應單元中，使每個微滴單元包含一個或多個拷貝的核酸分子（即DNA模板），每個單元都會對目標分子進行擴增，然后再對每個單元進行熒光信號的統(tǒng)計并計算。相對而言，傳統(tǒng)PCR或qPCR反應都是發(fā)生于同一體系當中，這也是數(shù)字PCR與其比較大的區(qū)別。

線性范圍達到6個數(shù)量級，靈敏度高達萬分之一。杭州微滴式數(shù)字PCR簡介

       CNV（Copy Number Variations，拷貝數(shù)變異）研究需要極高的定量精度以區(qū)別不同拷貝數(shù)之間的微小差異，測序方法適用于高于30%的變異率檢測，而qPCR的比較**辨在1.5倍左右，數(shù)字PCR通過直接計數(shù)目標基因與參照基因( 拷貝數(shù)為1的基因，例如RNaseP) 的數(shù)目，計算比值，直接得到目標基因的拷貝數(shù)可以達到極高的拷貝數(shù)分辨精度。

       除此之外，dPCR在病原微生物檢測、microRNA研究、基因表達研究、NGS測序文庫的***定量、表觀遺傳學直接相關的DNA甲基化定量檢測、ChIP定量鑒定等領域的應用都令人極為期待，而在轉基因成分鑒定、分子標準品精確定量、環(huán)境樣本檢測等具體的應用方向上，已經有大量實驗數(shù)據和結果證明了dPCR技術的優(yōu)良性能。

杭州微滴式數(shù)字PCR簡介FAM、VIC雙通道熒光檢測。

無創(chuàng)產前檢查

       鐮狀細胞貧血（sickle cell anemia）是HBB基因突變引起的常染色體顯性遺傳病，有嚴重的危害，可以導致高達5%的胎兒死亡率及4.62%的孕婦死亡率。而精細有效的無創(chuàng)產前診斷是預防鐮狀細胞貧血患兒出生的有效方法。研究人員采用dPCR技術檢測孕婦胎兒游離DNA（cff-DNA）HBB基因突變。結果顯示，dPCR技術能夠確定87%的男性胎兒（n=45）和75%的女性胎兒（n=20）HBB基因的突變狀態(tài)。當cff-DNA濃度大于7%時，可以**的檢測出HBB基因突變[3]，可以說是相當厲害了。

       數(shù)字PCR是一種核酸分子***值定量技術，能夠直接數(shù)出DNA分子的個數(shù)，是對起始樣品的***值定量。該試劑盒采用創(chuàng)新的一步法逆轉錄數(shù)字PCR技術，將*****的RNA逆轉錄及數(shù)字PCR擴增整合到一個反應體系，單管雙檢同時測定*****的兩個**基因，消除***變異帶來的漏檢風險。

       MicroDrop-100全新微滴式數(shù)字PCR系統(tǒng)為永諾生物旗下子公司永諾醫(yī)療自主研發(fā)的檢測設備，此系統(tǒng)檢測無需依賴標準物質，可達到***定量，具有超高靈敏度，檢測靈敏度高達1個拷貝，且具有較好的重復性，降低同樣本不同批次的檢測差異。數(shù)字PCR結果采取終點判讀法，相比熒光定量PCR的過程性讀取可有效降低對PCR 擴增效率的依賴、降低PCR***物對檢測結果的影響，對于復雜樣本也能提供穩(wěn)定的檢測結果等特點，在******臨床實驗及***患者的治療過程中可發(fā)揮重要作用。 高靈敏度——數(shù)字PCR的靈敏度與同體積反應體系的分割份數(shù)成正比。

定量PCR和數(shù)字PCR的特點：

1. 在20多年的使用和發(fā)展中，定量PCR作為一種技術平臺，已經產出海量的數(shù)據，在工業(yè)界和分子檢測的某些應用上，定量PCR已經成為“金標準”?；A研究方面，則形成了被稱為MIQE的“定量PCR標準實驗指南”。   

2. 在定量PCR的各種應用中，基因表達分析(gene expression analysis)的應用比重約占七成，綜合各種因素來看，眼下定量PCR還是進行基因表達研究的理想手段。   

3. 上述的“各種因素”具體展開，主要包括：通量、自動化程度、各種檢測探針與染料、檢測通道、成本和可參考文獻與protocol的數(shù)目等等。   

4. 就目前市場上已有的數(shù)字PCR設備來看，定量PCR在檢測的線性范圍上具有優(yōu)勢，意味著同一個run內可對各種表達豐度的樣品進行分析。

液體活檢：早篩、用藥、監(jiān)測、復發(fā)。杭州微滴式數(shù)字PCR簡介

產品特點

       無需依賴傳統(tǒng)熒光定量PCR的標準曲線即可實現(xiàn)核酸的***定量。

       全封閉防污染設計，一鍵式自動化操作。

       采用主流可靠的解決方案，系統(tǒng)由微滴生成儀、微滴檢測儀、數(shù)據分析軟件組成，并可選配同品牌封膜儀、PCR儀等

       微滴生成采用油包水乳化微滴技術，在微管道中利用氣壓驅動，2mins生成高達10萬個皮升級的微滴，高效高產，支持多重數(shù)字PCR的開發(fā)。

       微滴生成芯片為高精度微流控芯片設計，三維微納防污染結構，一張芯片可同時處理8個樣本。

       微滴檢測使用雙通道熒光，支持EvaGreen染料法及探針法。

       檢測線性范圍達到6個數(shù)量級，基因突變檢測靈敏度高達0.01%。

       檢測通量高，可一次檢測高達96個樣本，支持靈活設定。

       全中文分析軟件，人性化界面設置，多種分析工具供用戶選擇。

       本系統(tǒng)為開放式平臺，可使用第三方PCR反應液，支持用戶自行開發(fā)試劑、產品。

杭州微滴式數(shù)字PCR簡介

浚和（上海）儀器有限公司是一家供應國內外先進儀器和設備的專業(yè)供應商和服務商，致力于為客戶提供專業(yè)的定制化解決方案。多年來，持續(xù)為醫(yī)藥、化工、高校、科研單位、檢測院等多個行業(yè)提供先進的產品和專業(yè)的服務。

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浚和儀器將始終以行業(yè)特點為立足點，以客戶需求為導向，不斷地提高自身專業(yè)技術能力，不停地完善客戶服務質量，在發(fā)展中保持創(chuàng)新的精神，力求與客戶共同進步，為行業(yè)的發(fā)展作出不懈的努力。