培養(yǎng)皿的清潔:1.浸泡:新的或用過(guò)的玻璃器皿要先用清水浸泡,軟化和溶解附著物。新玻璃器皿使用前得先用自來(lái)水簡(jiǎn)單刷洗,然后用5%鹽酸浸泡過(guò)夜;用過(guò)的玻璃器皿往往附有大量蛋白質(zhì)和油脂,干涸后不易刷洗掉,故用后應(yīng)立即浸入清水中備刷洗。2.刷洗:將浸泡后的玻璃器皿放到洗滌劑水中,用軟毛刷反復(fù)刷洗。不要留死角,并防止破壞器皿表面的光潔度。將刷洗干凈的玻璃器皿洗凈、晾干,備浸酸。3.浸酸:浸酸是將上述器皿浸泡到清潔液中,又稱(chēng)酸液,通過(guò)酸液的強(qiáng)氧化作用清理器皿表面的可能殘留物質(zhì)。浸酸不應(yīng)少于六小時(shí),一般過(guò)夜或更長(zhǎng)。放取器皿要小心。4.沖洗:刷洗和浸酸后的器皿都必須用水充分沖洗,浸酸后器皿是否沖洗的干凈,直接影響到細(xì)胞培養(yǎng)的成敗。手工洗滌浸酸后的器皿,每件器皿至少要反復(fù)“注水-倒空”15次以上,然后用重蒸水洗2-3次,晾干或烘干后包裝備用。5.一次性使用的塑料培養(yǎng)皿一般出廠時(shí)就已射線滅菌或者化學(xué)滅菌。去氧膽酸是一種抑制腸道細(xì)菌生長(zhǎng)的化合物,因此對(duì)于從非腸道來(lái)源中分離出的微生物具有選擇性。BAT瓊脂培養(yǎng)皿
EMB是伊紅美藍(lán)瓊脂(EosinMethyleneBlueAgar)的縮寫(xiě)。伊紅美藍(lán)瓊脂是一種微生物培養(yǎng)基,常用于分離和鑒定腸道細(xì)菌,特別是大腸桿菌和其他革蘭陰性菌。EMB培養(yǎng)基的主要成分包括水解酪蛋白、葡萄糖、伊紅染色劑和美藍(lán)染色劑。通過(guò)這些成分的作用,EMB培養(yǎng)基可以區(qū)分腸道細(xì)菌的發(fā)酵能力和產(chǎn)酸性,從而鑒定大腸桿菌等腸道細(xì)菌。在EMB培養(yǎng)基上,大腸桿菌等產(chǎn)酸性菌落會(huì)呈現(xiàn)出金屬光澤的特征,而其他非腸道細(xì)菌則不會(huì)產(chǎn)生這種顏色反應(yīng)。此外,EMB培養(yǎng)基還可以區(qū)分腸道細(xì)菌的產(chǎn)氣性能力,產(chǎn)氣菌落在瓊脂中發(fā)酵產(chǎn)生氣體,導(dǎo)致培養(yǎng)基表面顯示出環(huán)形凹陷。EMB培養(yǎng)基在微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中廣泛應(yīng)用,尤其是用于分離和鑒定腸道細(xì)菌,特別是大腸桿菌的篩選和定量。它也常用于監(jiān)測(cè)食品和水樣中的腸道細(xì)菌污染。需要注意的是,具體的EMB培養(yǎng)基配方和使用條件可能會(huì)根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求和樣品類(lèi)型進(jìn)行調(diào)整和優(yōu)化。在使用EMB培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)根據(jù)具體的研究目的和樣品類(lèi)型選擇合適的培養(yǎng)基和條件,并遵守?zé)o菌操作規(guī)范,以避免外源微生物的污染。淀粉酪蛋白瓊脂平板VRBA中的溴青紫紅是一種指示劑,具有抑菌和變色作用。
精氨酸葡萄糖斜面瓊脂(ArginineGlucoseSlantAgar)是一種用于細(xì)菌鑒定和培養(yǎng)的瓊脂培養(yǎng)基。它主要用于檢測(cè)細(xì)菌對(duì)精氨酸和葡萄糖的利用能力。精氨酸葡萄糖斜面瓊脂的配方主要包括以下成分:1.瓊脂:用于固化培養(yǎng)基,使其成為固體狀態(tài)方便細(xì)菌的生長(zhǎng)。2.精氨酸:作為一種氮源和碳源,供養(yǎng)細(xì)菌的生長(zhǎng)需求。3.葡萄糖:作為一種碳源,供養(yǎng)細(xì)菌的能量需求。4.pH指示劑:用于檢測(cè)細(xì)菌對(duì)精氨酸的降解產(chǎn)生氨基酸酶的活性,通過(guò)改變培養(yǎng)基的pH值來(lái)顯示。5.其他輔助成分:如鹽類(lèi)、維生素等,用于提供細(xì)菌生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。使用精氨酸葡萄糖斜面瓊脂進(jìn)行培養(yǎng)時(shí),可以將待測(cè)的細(xì)菌樣品涂布在瓊脂表面。細(xì)菌在培養(yǎng)基上生長(zhǎng)時(shí),通過(guò)分解精氨酸產(chǎn)生氨基酸酶。氨基酸酶的活性會(huì)使培養(yǎng)基的pH值升高,導(dǎo)致指示劑顏色的改變。通過(guò)觀察菌落的特征和瓊脂表面的顏色變化,可以初步鑒定細(xì)菌對(duì)精氨酸和葡萄糖的利用能力。精氨酸葡萄糖斜面瓊脂是一種常用的瓊脂培養(yǎng)基,用于檢測(cè)細(xì)菌對(duì)精氨酸和葡萄糖的利用能力。通過(guò)觀察細(xì)菌在瓊脂上的生長(zhǎng)和指示劑顏色的變化,可以初步鑒定細(xì)菌的代謝特性和分類(lèi)。然而,需要注意的是,細(xì)菌的鑒定通常需要進(jìn)一步的確認(rèn)試驗(yàn)和鑒定方法。
NAP培養(yǎng)皿是一種特殊的微生物培養(yǎng)皿,全稱(chēng)為N-acetylglucosamine(NAG),AmphotericinB,andPolymyxinB培養(yǎng)皿。它是在培養(yǎng)基中添加了N-乙酰葡萄糖(N-acetylglucosamine)、兩種——兩性霉素B(AmphotericinB)和多粘菌素B(PolymyxinB),用于選擇性培養(yǎng)。NAP培養(yǎng)皿的主要成分包括:1.N-乙酰葡萄糖:提供一種特定的碳源,促進(jìn)的生長(zhǎng)。2.兩性霉素B:一種廣譜抗,用于抑制細(xì)菌和的生長(zhǎng)。3.多粘菌素B:一種,對(duì)大多數(shù)革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌具有抑制作用。NAP培養(yǎng)皿常用于選擇性培養(yǎng)和鑒定,特別是對(duì)細(xì)菌和其他微生物有較強(qiáng)競(jìng)爭(zhēng)力的樣品。N-乙酰葡萄糖提供了所需的特定碳源,幫助生長(zhǎng),而兩性霉素B和多粘菌素B則抑制了其他微生物的生長(zhǎng),從而選擇性地促進(jìn)的生長(zhǎng)。需要注意的是,NAP培養(yǎng)皿的具體配方和使用條件可能會(huì)根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求和的特性進(jìn)行調(diào)整和優(yōu)化。在使用NAP培養(yǎng)皿時(shí),應(yīng)根據(jù)具體的研究目的和樣品類(lèi)型選擇合適的培養(yǎng)基和條件,并遵守?zé)o菌操作規(guī)范,以避免外源微生物的污染。NAC瓊脂培養(yǎng)皿可以用于微生物的計(jì)數(shù)和定量,通過(guò)培養(yǎng)皿計(jì)數(shù)法可以快速準(zhǔn)確地確定微生物的數(shù)量。
KF鏈球菌瓊脂(KFStreptococcusAgar)是一種特定的培養(yǎng)基,用于檢測(cè)和鑒定β溶血性鏈球菌(β-hemolyticstreptococci)的存在。它是由Kohn和Fulek于1969年提出并命名的,所以被稱(chēng)為KF瓊脂。KF鏈球菌瓊脂的配方包括以下主要成分:1.蛋白胨和酵母提取物:提供了細(xì)菌生長(zhǎng)所需的氮源和其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。2.葡萄糖:作為碳源提供能量。3.馬鈴薯淀粉:用于檢測(cè)鏈球菌的淀粉酶活性。4.血液:一般使用羊血,用于檢測(cè)鏈球菌的溶血活性。5.pH指示劑:用于顯示培養(yǎng)基的酸堿度。KF鏈球菌瓊脂的特點(diǎn)是在瓊脂中加入了馬鈴薯淀粉和血液。鏈球菌會(huì)通過(guò)產(chǎn)生淀粉酶和溶血活性來(lái)表現(xiàn)出特定的反應(yīng)。在使用KF鏈球菌瓊脂進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)時(shí),可以將待測(cè)的樣品均勻涂布在瓊脂表面。如果細(xì)菌具有淀粉酶活性,它們會(huì)分解瓊脂中的馬鈴薯淀粉,形成清晰的透明區(qū)域。同時(shí),如果細(xì)菌具有溶血活性,它們會(huì)在瓊脂上形成溶血區(qū),顯示為透明的環(huán)或斑點(diǎn)。通過(guò)觀察菌落的形態(tài)、溶血區(qū)的特征,以及其他相關(guān)的生化試驗(yàn),可以對(duì)β溶血性鏈球菌進(jìn)行初步鑒定和分類(lèi)。需要注意的是,KF鏈球菌瓊脂主要用于初步篩選和鑒定,進(jìn)一步的確認(rèn)和分類(lèi)還需要進(jìn)行其他補(bǔ)充試驗(yàn)和方法。mTEC是指Modified Tryptone Bile X-glucuronide Medium(改良的酪蛋白膽汁X-葡糖苷酸鹽培養(yǎng)基)。結(jié)晶紫中性紅膽鹽葡萄糖瓊脂(VRBDA)培養(yǎng)皿
結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂培養(yǎng)皿是一種常用的選擇性培養(yǎng)基,用于微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中對(duì)腸道病原菌的檢測(cè)和分離。BAT瓊脂培養(yǎng)皿
HE瓊脂(HektoenEntericAgar)是一種常用的微生物培養(yǎng)基,用于分離和鑒定腸道致病菌,特別是沙門(mén)菌屬(Salmonella)和志賀菌(Shigella)。HE瓊脂的主要成分包括紅蘇木素(BromothymolBlue)、大腸桿菌酪蛋白酶(E.coliProteosePeptone)、蔗糖(Sucrose)、瓊脂和其他一些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。紅蘇木素是一種指示劑,可以幫助區(qū)分不同的細(xì)菌,大腸桿菌酪蛋白酶是一種氨基酸來(lái)源,蔗糖為菌落提供碳源。HE瓊脂通常用于分離和鑒定沙門(mén)菌屬和志賀菌屬菌株,特別是從食品、水樣和糞便中。通過(guò)使用HE瓊脂,這些菌株可以在培養(yǎng)基上形成特征性的菌落,有助于其識(shí)別和鑒定。在HE瓊脂上,沙門(mén)菌屬和志賀菌屬菌株通常會(huì)產(chǎn)生特殊的菌落形態(tài)和顏色變化。沙門(mén)菌通常形成綠色或藍(lán)綠色的菌落,而志賀菌通常形成無(wú)色或透明的菌落,周?chē)h(huán)繞著黑色的沉淀物。需要注意的是,HE瓊脂是一種選擇性和差異性培養(yǎng)基,適用于大多數(shù)沙門(mén)菌屬和志賀菌屬菌株的生長(zhǎng)。然而,對(duì)于某些特殊的菌株,可能需要調(diào)整培養(yǎng)條件和添加其他特定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。因此,在使用HE瓊脂時(shí),需要根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)需求和菌株的特性進(jìn)行調(diào)整和優(yōu)化。BAT瓊脂培養(yǎng)皿