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液相色譜類型液相色譜按其分離機(jī)理,可分為四種類型--吸附色譜法、分配色譜法、離子交換色譜、凝膠色譜法吸附色譜法吸附色譜法的固定相為吸附劑,色譜的分離過程是在吸附劑表面進(jìn)行的,不進(jìn)入固定相的內(nèi)部。與氣相色譜不同,流動(dòng)相(即溶劑)分子也與吸附劑表面發(fā)生吸附作用。在吸附劑表面,樣品分子與流動(dòng)相分子進(jìn)行吸附競(jìng)爭(zhēng),因此流動(dòng)相的選擇對(duì)分離效果有很大的影響,一般可采用梯度淋洗法來提高色譜分離效率。在聚合物的分析中,吸附色譜一般用來分離添加劑,如偶氮染料、抗氧化劑、表面活性劑等,也可用于石油烴類的組成分析。上海禹重實(shí)業(yè)有限公司是一家專業(yè)提供液相色譜系統(tǒng)的公司,期待您的光臨!北京專業(yè)高效液相色譜系統(tǒng)廠家直銷
高效液相色譜的歷史1903年俄國(guó)植物化學(xué)家茨維特(Tswett)***提出“色譜法”(Chromatography)和“色譜圖”(Chromatogram)的概念。茨維特使用色譜法chromatography來描述他的彩色試驗(yàn)。1930年以后,相繼出現(xiàn)了紙色譜、離子交換色譜和薄層色譜等液相色譜技術(shù)。1952年,英國(guó)學(xué)者M(jìn)artin和Synge基于他們?cè)诜峙渖V方面的研究工作,提出了關(guān)于氣-液分配色譜的比較完整的理論和方法,把色譜技術(shù)向前推進(jìn)了一大步,這是氣相色譜在此后的十多年間發(fā)展十分迅速的原因。1958年,基于Moore和Stein的工作,離子交換色譜的儀器化導(dǎo)致了氨基酸分析儀的出現(xiàn),這是近代液相色譜的一個(gè)重要嘗試,但分離效率尚不理想。1960年中后期,氣相色譜理論和實(shí)踐發(fā)展,以及機(jī)械、光學(xué)、電子等技術(shù)上的進(jìn)步,液相色譜又開始活躍。到60年代末期把高壓泵和化學(xué)鍵合固定相用于液相色譜就出現(xiàn)了HPLC。1970年中期以后,微處理機(jī)技術(shù)用于液相色譜,進(jìn)一步提高了儀器的自動(dòng)化水平和分析精度。1990年以后,生物工程和生命科學(xué)在國(guó)際和國(guó)內(nèi)的迅速發(fā)展,為高效液相色譜技術(shù)提出了更多、更新的分離、純化、制備的課題,如人類基因組計(jì)劃,蛋白質(zhì)組學(xué)有HPLC作預(yù)分離等。湖南液相色譜系統(tǒng)上海禹重實(shí)業(yè)有限公司為您提供液相色譜系統(tǒng),有需要可以聯(lián)系我司哦!
高效液相色譜分離原理液-液分配(Liquid-liquidPartitionChromatography)及化學(xué)鍵合相色譜(ChemicallyBondedPhaseChromatography) 流動(dòng)相和固定相都是液體。流動(dòng)相與固定相之間應(yīng)互不相溶(極性不同,避免固定液流失),有一個(gè)明顯的分界面。當(dāng)試樣進(jìn)入色譜柱,溶質(zhì)在兩相間進(jìn)行分配。達(dá)到平衡時(shí),服從于高效液相色譜計(jì)算公式:式中,cs—溶質(zhì)在固定相中濃度;cm—溶質(zhì)在流動(dòng)相中的濃度;Vs—固定相的體積;Vm—流動(dòng)相的體積。LLPC與GPC有相似之處,即分離的順序取決于K,K大的組分保留值大;但也有不同之處,GPC中,流動(dòng)相對(duì)K影響不大,LLPC流動(dòng)相對(duì)K影響較大。a.正相液-液分配色譜法(NormalPhaseliquidChromatography):流動(dòng)相的極性小于固定液的極性。b.反相液-液分配色譜法(ReversePhaseliquidChromatography):流動(dòng)相的極性大于固定液的極性。c.液-液分配色譜法的缺點(diǎn):盡管流動(dòng)相與固定相的極性要求完全不同,但固定液在流動(dòng)相中仍有微量溶解;流動(dòng)相通過色譜柱時(shí)的機(jī)械沖擊力,會(huì)造成固定液流失。上世紀(jì)70年代末發(fā)展的化學(xué)鍵合固定相(見后),可克服上述缺點(diǎn)。
液相色譜與氣相色譜的比較液相色譜所用基本概念:保留值、塔板數(shù)、塔板高度、分離度、選擇性等與氣相色譜一致。液相色譜所用基本理論:塔板理論與速率方程也與氣相色譜基本一致,但由于在液相色譜中以液體代替氣相色譜中氣體作為流動(dòng)相,而液體和氣體的性質(zhì)不相同。此外,液相色譜所用的儀器設(shè)備和操作條件也與氣相色譜不同,所以,液相色譜與氣相色譜有一定的差別。主要有以下幾力‘面:①操作條件及應(yīng)用范圍不同②液相色譜能完成難度較高的分離工作③由于液體的擴(kuò)散性比氣體的小105倍,因此,溶質(zhì)在液相中的傳質(zhì)速率慢,柱外效應(yīng)就顯得特別重要;而在氣相色譜中,由色譜柱外區(qū)域引起的擴(kuò)張可以忽略不計(jì)。④液相色譜中,制備樣品簡(jiǎn)單,回收樣品也比較容易,而且回收是定量的,適合于大量制備,但液相色譜尚缺乏通用的檢測(cè)器,一起比較復(fù)雜,價(jià)格昂貴。在實(shí)際應(yīng)用中,這兩種技術(shù)是相互補(bǔ)充的。綜上所述,液相色譜具有柱效高,選擇性高,靈敏性**析速度快,重復(fù)性好,應(yīng)用范圍廣等優(yōu)點(diǎn),該法已成為現(xiàn)代分析技術(shù)的主要手段之一。目前在化學(xué),化工,醫(yī)藥,生化,環(huán)保,農(nóng)業(yè)等科學(xué)領(lǐng)域獲得***的應(yīng)用。上海禹重實(shí)業(yè)有限公司為您提供液相色譜系統(tǒng),歡迎您的來電哦!
高效液相色譜梯度洗脫類似于GC中的程序升溫。已成為現(xiàn)代高效液相色譜中不可缺少的部分。梯度洗提,就是載液中含有兩種(或更多)不同極性的溶劑,在分離過程中按一定的程序連續(xù)改變載液中溶劑的配比和極性,通過載液中極性的變化來改變被分離組分的分離因素,以提**離效果。梯度洗提可以分為兩種:a.低壓梯度(也叫外梯度):在常壓下,預(yù)先按一定程序?qū)煞N或多種不同極性的溶劑混合后,再用一臺(tái)高壓泵輸入色譜柱。b.高壓梯度(或稱內(nèi)梯度系統(tǒng)):利用兩臺(tái)高壓輸液泵,將兩種不同極性的溶劑按設(shè)定的比例送入梯度混合室,混合后,進(jìn)入色譜柱。液相色譜系統(tǒng),就選上海禹重實(shí)業(yè)有限公司,用戶的信賴之選,歡迎您的來電!山東賽默飛世爾Vanquish液相色譜系統(tǒng)供應(yīng)商
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賽默飛高效液相色譜業(yè)務(wù)副總裁兼總經(jīng)理FraserMcLeod表示:“在整個(gè)生物制藥的流程中,從藥物研發(fā)到質(zhì)控的批次放行,數(shù)據(jù)完整性對(duì)于決策是必不可少的。為快速獲取可靠結(jié)果,靈敏度和通量非常關(guān)鍵。我們開發(fā)出的這套系統(tǒng)展示出在復(fù)雜分析應(yīng)用時(shí)的**辨分離和重復(fù)性?!?VanquishFlexUHPLC系統(tǒng)采用獨(dú)特設(shè)計(jì),即便在高通量的情況下,仍可以保證分析物色譜峰擁有尖銳峰形,實(shí)現(xiàn)在較短時(shí)間內(nèi)分析更多樣品。該系統(tǒng)良好的穩(wěn)定性和重復(fù)性為數(shù)據(jù)質(zhì)量提供了可靠保障,確保能夠分析大量的樣品,以供質(zhì)控分析比較。其重要特點(diǎn)如下:?新型四元梯度泵模塊,設(shè)計(jì)穩(wěn)健,性能良好,保證高通量的前提下依然可提供方法開發(fā)的靈活性。?泵比較大耐壓1000bar,性能***,流速高達(dá)8mL/min,應(yīng)用靈活,可實(shí)現(xiàn)**辨分離。?新型熒光檢測(cè)器模塊靈敏度高,與高靈敏度、寬線性范圍的UV、DAD檢測(cè)器和針對(duì)非揮發(fā)性化合物的電霧式檢測(cè)器互為補(bǔ)充。北京專業(yè)高效液相色譜系統(tǒng)廠家直銷