膜片鉗電生理記錄技術(shù)：膜片鉗技術(shù)的基本原理：膜片鉗技術(shù)用特制的玻璃微吸管吸附于細胞表面，使之形成10~100MΩ的高阻封接，被孤立的小膜片面積為微米數(shù)量級，因此封接范圍內(nèi)細胞膜光有少數(shù)離子通道。然后對該膜片實行電壓鉗位，測量單個離子通道開放產(chǎn)生的微小電流，這種...

血清的安全風險因素主要有以下方面：地理因素，地理因素包括血清產(chǎn)地的流行病學趨勢、基礎(chǔ)設(shè)施情況以及血源供應(yīng)量。措施得當可以預(yù)防能避免的動物疾病，同時產(chǎn)地國穩(wěn)定可靠的基礎(chǔ)設(shè)施，對保證供應(yīng)鏈的安全也十分必要。血源是否充足則決定了血清是否可源源不斷地持續(xù)供應(yīng)。生產(chǎn)，生...

在體光纖成像記錄應(yīng)用：1、在體光纖成像記錄通過光學記錄特定細胞類型在自然狀態(tài)下的神經(jīng)活動；2、實時觀測動物在進行復雜行為時的神經(jīng)投射活動；3、闡明特殊的神經(jīng)環(huán)路在動物行為中的作用；4、通過直接觀測和投射相關(guān)的神經(jīng)環(huán)路的動態(tài)活動模式，整機一體化，輕巧便攜，集成信...

膜片鉗使用的注意事項：1.為了防止塵埃、靜電傷害機器，每天做實驗前請用清水拖地。2.拉制儀使用前需預(yù)熱15-30min。3.銀絲電極及地線發(fā)白時，請先用砂紙輕微打磨，再浸入新鮮的次氯酸鈉溶液鍍氯化銀，如果銀絲電極30min未變黑，則考慮更換次氯酸鈉。4.先開放...

聚合酶鏈式反應(yīng)：模板的制備，PCR的模板可以是DNA，也可以是RNA。模板的取材主要依據(jù)PCR的擴增對象，可以是病原體標本如病毒、細菌、菌類等。也可以是病理生理標本如細胞、血液、羊水細胞等。法醫(yī)學標本有血斑、精斑、毛發(fā)等。標本處理的基本要求是除去雜質(zhì)，并部分純...

我們知道，在體光纖成像記錄屬于單個原子的核外電子可以在不同能級之間躍遷。而對于無機閃爍體，電子可以在相鄰原子之間轉(zhuǎn)移，電子不再屬于某一個固定的原子，而是歸整個晶體共有，單個電子的能級也就演變成了晶體的電子能帶。晶體能帶的低能級為價帶，高能級為導帶。當γ射線入射...

在體光纖成像記錄的目的是實時檢測細胞的活性變化。基于鈣離子濃度變化的熒光成像技術(shù)被較多用來記錄神經(jīng)元活性。在體光纖記錄方法與傳統(tǒng)的在體電生理記錄方法有著不同的特點，光纖記錄因其穩(wěn)定、方便、易上手而應(yīng)用較多。首先，將熒光蛋白表達在特定類型的神經(jīng)元中，光纖記錄可以...

細胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點是污染嗎？如何處理？一旦您在細胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點生成，首先，要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁，然后，在鏡下觀察培養(yǎng)細胞生長的狀態(tài)，黑點是否游動。如果細胞被污染，微生物則會大量繁殖，培養(yǎng)基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。如果...

血清的保存應(yīng)該注意：血清中的沉淀物、絮狀物：主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成，這些絮狀物不會影響血清本身的質(zhì)量，可用離心3000rpm，5分鐘去除，也可不用處理，顯微鏡下"小黑點"。經(jīng)過熱處理過的血清，沉淀物的形成會明顯增多。有些沉淀物在顯微...

聚合酶鏈式反應(yīng)：三步：變性：模板DNA加熱變性；復性，引物與它的靶序列發(fā)生退火，引物DNA量多，使引物和模板在局部形成雜交鏈；延伸，4種dNTP 與 Mg2+ 存在的條件下，DNA合成酶催化以引物為起始點，按5'-3'方向進行延伸。上面三步為一個循環(huán)，可使拷貝...

聚合酶鏈式反應(yīng)準備：引物內(nèi)部不應(yīng)出現(xiàn)互補序列。兩個引物之間不應(yīng)存在互補序列，尤其是避免3 ′端的互補重疊。引物與非特異擴增區(qū)的序列的同源性不要超過70%，引物3′末端連續(xù)8個堿基在待擴增區(qū)以外不能有完全互補序列，否則易導致非特異性擴增。引物3‘端的堿基，特別是...

在體光纖成像記錄和傳統(tǒng)的體外成像或細胞培養(yǎng)相比有著明顯優(yōu)點。首先，在體光纖成像記錄能夠反映細胞或基因表達的空間和時間分布，從而了解活的物體動物體內(nèi)的相關(guān)生物學過程、特異性基因功能和相互作用。由于可以對同一個研究個體進行長時間反復查看成像，既可以進步數(shù)據(jù)的可比性...

光纖成像系統(tǒng)，所述光纖成像系統(tǒng)包括：激光器，圖像采集裝置，首先一多模光纖，第二多模光纖，光纖耦合器和第三多模光纖；所述光纖耦合器包括兩個首先一端口和一個第二端口，兩個首先一端口位于所述光纖耦合器的一側(cè)，所述第二端口位于所述光纖耦合器的另一側(cè)；所述首先一多模光纖...

膜片鉗技術(shù)本質(zhì)上也屬于電壓鉗范疇，兩者的區(qū)別關(guān)鍵在于：①膜電位固定的方法不同；②電位固定的細胞膜面積不同，進而所研究的離子通道數(shù)目不同。電壓鉗技術(shù)主要是通過保持細胞跨膜電位不變，并迅速控制其數(shù)值，以觀察在不同膜電位條件下膜電流情況。因此只能用來研究整個細胞膜或...

聚合酶鏈式反應(yīng)的常見問題：靶序列變異：如靶序列發(fā)生突變或缺失，影響引物與模板特異性結(jié)合，或因靶序列某 段缺失使引物與模板失去互補序列，其PCR擴增是不會成功的。假陽性：出現(xiàn)的PCR擴增條帶與目的靶序列條帶一致，有時其條帶更整齊，亮度更高。引物設(shè)計不合適：選擇的...

胎牛血清：八月齡胎牛心臟穿刺取血；新生牛血清：出生12-24小時新生牛靜脈;又可細分為：a.高級新生牛血清：后靜置自然析出的血清;b.標準新生牛血清：c.經(jīng)離心分離的血清;d.普通新生牛血清：融血或微融血的血清；小牛血清：出生三月齡小牛動脈分離血清；血清是血漿...

添加胎牛血清的時候要注意避免把沉淀加入培養(yǎng)液，因為如果培養(yǎng)液有沉淀的存在，會使得其中培養(yǎng)的細胞產(chǎn)生大量的黑點，除此之外，細胞的表面還很可能會覆蓋一層油狀物質(zhì)，總之出現(xiàn)這樣的情況會極其不利于細胞的正常生長。那么為了較為大程度減少血清的損失，可以把所有有沉淀的血清...

聚合酶鏈反應(yīng)：在檢測病原體方面,病原體培養(yǎng)是臨床診斷的金標準 .但是對于一些苛養(yǎng)菌 生長緩慢的細菌或難以培養(yǎng)的病原體等培養(yǎng)的陽性檢出率不高.檢測時間過長 無法滿足臨床早期快速診斷以指導醫(yī)治的需要[3]。當前 PCR 技術(shù)是在傳統(tǒng) PCR 技術(shù)應(yīng)用的基礎(chǔ)上進行的...

根據(jù)在體光纖成像記錄成像方式的不同, 在體生物發(fā)光成像主要有生物發(fā)光成像,和生物發(fā)光斷層成像兩種。其中,輸出是二維圖像, 即生物體外探測器上采集的光學信號，其原理簡單、 使用方便快捷, 適用于 定性分析及簡單的定量計算, 但無法獲得生物體內(nèi)發(fā)光光源的深度信息,...

在體光纖成像記錄人類大量的復雜行為主要取決于上千億個神經(jīng)元組成的精確神經(jīng)環(huán)路，而神經(jīng)環(huán)路的建立依賴于神經(jīng)元之間突觸連接的形成。突觸是神經(jīng)元交流的關(guān)鍵結(jié)構(gòu)，只有通過突觸連接，神經(jīng)元之間以及神經(jīng)元和靶向細胞（包括肌肉，腺體分析的細胞）才能有效的傳遞信號，因此突觸連...

industryTemplate血清的保存應(yīng)該注意：需要長期保存的血清必須儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中。寧波進口胎牛血清哪家好血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內(nèi)抽出，放入試管中，不加抗凝劑，則凝血反應(yīng)被，血液迅速凝固，形成膠凍。凝血塊收縮，其周...

聚合酶鏈式反應(yīng)的試驗污染：PCR反應(yīng)的很大特點是具有較大擴增能力與極高的靈敏性，但令人腦袋不適的問題是易污染，極其微量的污染即可造成假陽性的產(chǎn)生。 污染原因：標本間交叉污染：標本污染主要有收集標本的容器被污染，或標本放置時，由于密封不嚴溢于容器外，或容器外粘有...

聚合酶鏈反應(yīng)的常見問題分析與解決方法：無擴增條帶：酶失活或在反應(yīng)體系中未加入酶。Taq DNA聚合酶因保存或運輸不當而失活，往往通過更換新酶或用另一來源的酶以獲得滿意的結(jié)果。模板含有雜質(zhì)。特別是對甲醛固定及石蠟包埋的組織常含甲酸，造成DNA脫嘌呤而影響PCR的...

膜片鉗使用的注意事項：工作原理膜片鉗是一種能夠直接觀察單一的離子通道蛋白質(zhì)分子對相應(yīng)離子通透難易程度等特性的一種實驗技術(shù)。它的基本原理是以一個光潔，直徑約為0.5~3um的玻璃微電極同神經(jīng)或肌細胞的膜接觸，之后對微電極另一端開口處施加適當?shù)呢搲河秒姌O的纖細開口...

膜片鉗的數(shù)據(jù)如何處理：穿孔膜片(perforated patch)是為克服常規(guī)全細胞模式的胞質(zhì)滲漏問題,有學者將與離子親和的制霉菌素或二性霉素b經(jīng)微電極灌流到含有類甾醇的細胞膜上,形成只允許一價離子通過的孔,用此法在膜片上做很多導電性孔道,借此對全細胞膜電流進...

膜片鉗技術(shù)本質(zhì)上也屬于電壓鉗范疇，兩者的區(qū)別關(guān)鍵在于：①膜電位固定的方法不同；②電位固定的細胞膜面積不同，進而所研究的離子通道數(shù)目不同。電壓鉗技術(shù)主要是通過保持細胞跨膜電位不變，并迅速控制其數(shù)值，以觀察在不同膜電位條件下膜電流情況。因此只能用來研究整個細胞膜或...

一種電生理膜片鉗灌流裝置的制造方法：為了測量在不同藥物對細胞中的離子通道的影響，通常需要在膜片鉗實驗中實施灌流。例如，需要檢驗?zāi)撤N是否對某種離子通道的影響，則需要在細胞封接后記錄電流數(shù)據(jù)，然后通過在細胞周圍快速給藥再次記錄電流數(shù)據(jù)即可對比數(shù)據(jù)判斷該對離子通道的...

膜片鉗記錄的幾種形式：細胞吸附膜片(cell-attached patch)　將兩次拉制后經(jīng)加熱拋光的微管電極置于清潔的細胞膜表面上，形成高阻封接，在細胞膜表面隔離出一小片膜，既而通過微管電極對膜片進行電壓鉗制，高分辨測量膜電流，稱為細胞貼附膜片。由于不破壞細...

血清的主要作用：對培養(yǎng)中的細胞起到某些保護作用：有一些細胞，如內(nèi)皮細胞、骨髓樣細胞可以釋放蛋白酶，血清中含有抗蛋白酶成分，起到中和作用。這種作用是偶然發(fā)現(xiàn)的，則有目的的使用血清來終止胰蛋白酶的消化作用。因為胰蛋白酶已經(jīng)被較廣用于貼壁細胞的消化傳代。血清蛋白形成...

由于光學相干斷層掃描采用了波長很短的光波作為探測手段，在體光纖成像記錄它可以達到很高的分辨率。首先將一束光波照在組織上，一小部分光被樣品表面反射，然后被收集起來。大部分的光線被樣品散射掉了，這些散射光失去了遠視的方向信息，因此無法形成圖像，只能形成耀斑。散射光...