培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項(xiàng):1.培養(yǎng)基配方的選定同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會(huì)有某些差別。因此,除所用的是標(biāo)準(zhǔn)方法,應(yīng)嚴(yán)格按其規(guī)定進(jìn)行配制外.一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料.加以比較核對(duì).再依據(jù)自己的使用目的加以選用,記錄其來(lái)源。2.培養(yǎng)基的制備記錄每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄,包括培養(yǎng)推各稱,配方及其來(lái)源.和各種成份的牌號(hào)。較終pH值、消毒的溫度和時(shí)間制各的日期和制備者等,記錄應(yīng)復(fù)制一份,原記錄保存?zhèn)洳?,?fù)制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。培養(yǎng)基根據(jù)物理狀態(tài)可分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基。山東進(jìn)口培養(yǎng)基制備器微生物培養(yǎng)基制備:溶解滅菌后,盤子上無(wú)不溶性結(jié)晶紫、無(wú)紫色斑;與...
根據(jù)培養(yǎng)基的用途來(lái)區(qū)分,可分為選擇培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基等。1)選擇培養(yǎng)基在培養(yǎng)基中加入某種物質(zhì)以殺死或克制不需要的菌種生長(zhǎng)的培養(yǎng)基,稱之為選擇培養(yǎng)基。如鏈霉素、氯霉素等克制原核微生物的生長(zhǎng);而制霉菌素、灰黃霉素等能克制真核微生物的生長(zhǎng);結(jié)晶紫能克制革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌的生長(zhǎng)等。2)增殖培養(yǎng)基在自然界中,不同種的微生物常生活在一起,為了分離我們所需要的微生物,在普通培養(yǎng)基中加入一些某種微生物特別喜歡的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),以增加這種微生物的繁殖速度,逐漸淘汰其它微生物,這種培養(yǎng)基稱為增殖培養(yǎng)基,這種培養(yǎng)基常用于菌種篩選和選擇增菌中。在某種程度上講,增殖培養(yǎng)基也是一種選擇培養(yǎng)基。3)鑒別培養(yǎng)基在培養(yǎng)基中加...
馬鈴薯培養(yǎng)基的制作過(guò)程:(1)稱量和熬煮:按培養(yǎng)基配方逐一稱取去皮土豆。土豆切成小塊放入鍋中,加水1000ml,在加熱器上加熱至沸騰,維持20-30min,用可用2層紗布趁熱在量杯上過(guò)濾,濾渣棄取。濾液補(bǔ)充水分到1000ml。(2)加熱溶解:把濾液放入鍋中,加入葡萄糖20g,瓊脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉網(wǎng)上,小火加熱,并用玻棒不斷攪拌,以防瓊脂糊底或溢出,待瓊脂完全溶解后,再補(bǔ)充水分至所需量。(3)分裝:按實(shí)訓(xùn)要求,將配制的培養(yǎng)基分裝入試管或500ml三角瓶?jī)?nèi)。分裝時(shí)可用三角漏斗以免使培養(yǎng)基沾在管口或瓶口上造成污染。分裝量:固體培養(yǎng)基約為試管高度的1/5,滅菌后制成斜面,分裝入三...
制備培養(yǎng)基有什么要求:1、根據(jù)培養(yǎng)基配方的成分按量稱取,然后溶于蒸餾水中,在使用前對(duì)應(yīng)用的試劑藥品應(yīng)進(jìn)行質(zhì)量檢驗(yàn)。2、PH測(cè)定及調(diào)節(jié):PH測(cè)定要在培養(yǎng)基冷至室溫時(shí)進(jìn)行,因在熱或冷的情況下,其PH有一定差異,當(dāng)測(cè)定好時(shí),按計(jì)算量加入堿或酸混勻后應(yīng)再測(cè)試一次。培養(yǎng)基PH值一定要準(zhǔn)確,否則會(huì)影響微生物的生長(zhǎng)或影響結(jié)果的觀察。但需注意因高壓滅菌可影響一些培養(yǎng)基的PH降低或升高,故不宜滅菌壓力過(guò)高或次數(shù)太多,以免影響培養(yǎng)基的質(zhì)量,指示劑、去氧膽酸鈉、瓊脂等一般在調(diào)完P(guān)H后再加入對(duì)一些需嚴(yán)格滅菌的培養(yǎng)基(如組織培養(yǎng)基),較長(zhǎng)時(shí)間的貯存,必須放在3~6℃的冰箱內(nèi)。大容量 培養(yǎng)基制備器報(bào)價(jià)培養(yǎng)基的分裝:培養(yǎng)基...
培養(yǎng)基的分類:培養(yǎng)基的分裝,應(yīng)按使用的目的和要求,分裝于試管、燒瓶等適當(dāng)容器內(nèi)。分裝量不得超過(guò)容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵,其外還須用防水紙包扎(現(xiàn)試管一般多有用螺旋蓋者)。分裝時(shí)較好能使用半自動(dòng)或電動(dòng)的定量分裝器。分裝瓊脂斜面培養(yǎng)基時(shí),分裝量應(yīng)以能形成2/3底層和1/3斜面的量為洽當(dāng)。分裝容器應(yīng)預(yù)先清洗干凈并經(jīng)干烤消毒,以利于培養(yǎng)基的徹底滅菌。每批培養(yǎng)基應(yīng)另外分裝20ml培養(yǎng)基于一小玻璃瓶中,隨該批培養(yǎng)基同時(shí)滅菌,以為測(cè)定該批培養(yǎng)基較終pH之用。合成培養(yǎng)基是一類化學(xué)成分和數(shù)量完全知道的培養(yǎng)基,它是用已知化學(xué)成分的化學(xué)藥品配制而成。內(nèi)蒙古瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器微生物檢驗(yàn)...
培養(yǎng)基制備技術(shù):一、玻璃器皿的清洗:在制備培養(yǎng)基的過(guò)程中,首先要使用一些玻璃器皿,如試管、三角瓶、培養(yǎng)皿、燒杯和吸管等。這些器皿在使用前都要根據(jù)不同的情況,經(jīng)過(guò)一定的處理,洗刷干凈。有的還要進(jìn)行包裝,經(jīng)過(guò)滅菌等準(zhǔn)備就緒后,才能使用。1、新購(gòu)的玻璃器皿:除去包裝沾染的污垢后,先用熱肥皂水刷洗,流水沖凈,再浸泡于1~2%的工業(yè)鹽酸中數(shù)小時(shí),使游離的堿性物質(zhì)除去,再以流水沖凈。對(duì)容量較大的器皿,如大燒瓶、量筒等,洗凈后注入濃鹽酸少許,轉(zhuǎn)動(dòng)容器使其內(nèi)部表面均沾有鹽酸,數(shù)分鐘后傾去鹽酸,再以流水沖凈,倒置于洗滌架上將水空干,即可使用。2、用過(guò)的玻璃器皿:凡確無(wú)病原菌或未被帶菌物污染的器皿,使用后可隨時(shí)沖...
對(duì)LST(月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌時(shí),有時(shí)發(fā)酵管內(nèi)會(huì)有氣泡。為防止發(fā)酵管內(nèi)產(chǎn)生氣泡,可以采取以下幾項(xiàng)措施:(1)小倒管浸滿培養(yǎng)基(不留氣泡)后再加入到盛LST的試管中。(2)滅菌鍋關(guān)閉放氣閥前,將鍋內(nèi)氣體排干凈。(3)試管塞不要塞得太緊(使用硅膠塞的時(shí)候),勿使用橡皮塞。(4)不要過(guò)早打開滅菌鍋,要等滅菌鍋內(nèi)氣體和溫度都降到與室溫一致或相差不大時(shí)再打開滅菌鍋。如果以上情況都做到還有氣泡,可用水做培養(yǎng)基組的對(duì)照試驗(yàn),若培養(yǎng)基組有氣泡,而對(duì)照組沒(méi)有氣泡,可確定是培養(yǎng)基自身的原因。培養(yǎng)基由于富含營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),易被污染或變質(zhì)。海南瓊脂培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)室制備:正確制備培養(yǎng)基時(shí)微生物檢...
固體斜面培養(yǎng)基配制:培養(yǎng)基各成份的混合和溶化:培養(yǎng)基所用化學(xué)藥品均應(yīng)是化學(xué)純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中,使細(xì)菌不易生長(zhǎng)。較好使用不銹鋼萵加熱溶化,可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動(dòng)蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時(shí)、可先用溫水加熱并隨時(shí)擾動(dòng)、以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用,應(yīng)重新制備。待大部分固體成分溶化后,再用較小火力使所有成分完全溶化,迄至煮沸。如為瓊脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過(guò)程中,因蒸發(fā)而丟失的水分,較后必須加以補(bǔ)足。培養(yǎng)基pH的初步調(diào)正:因培養(yǎng)基在加熱消毒過(guò)程中、pH會(huì)有所變化,培養(yǎng)...
培養(yǎng)基的滅菌:一般培養(yǎng)基可采用121°C高壓蒸汽滅菌15分鐘的方法。在各種培養(yǎng)基制備方法中,如無(wú)特殊規(guī)定,即可用此法滅菌。某些畏熱成分,如糖類,應(yīng)另行配成20%或更高的濃液,以過(guò)濾或間歇滅菌法消毒,以后再用無(wú)菌操作技術(shù)、定量加于培養(yǎng)基。明膠培養(yǎng)基亦應(yīng)用較低溫度滅菌。血液、體液和物品等則應(yīng)以無(wú)菌操作技術(shù)抽取和加入于經(jīng)冷卻約50°C左右的培養(yǎng)基中。瓊脂斜面培養(yǎng)基應(yīng)在滅菌后立即取出,冷至55℃-60℃時(shí),擺置成適當(dāng)斜面,待其自然凝固。制備培養(yǎng)基的操作要點(diǎn):固體培養(yǎng)基在液體培養(yǎng)基中加入適量的凝固劑即成固體培養(yǎng)基。貴州實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基的安全分裝:無(wú)菌補(bǔ)料:通過(guò)分裝口可以定量添加無(wú)菌添加劑。大尺寸...
制備培養(yǎng)基有什么要求:1、培養(yǎng)基需保持澄清,便于觀察細(xì)菌的生長(zhǎng)情況,培養(yǎng)基加熱煮沸后,可用脫脂棉花或絨布過(guò)濾,以除去沉淀物,必要時(shí)可用雞蛋白澄清處理,所用瓊脂條要預(yù)先洗凈晾干后使用,避免因瓊脂含雜質(zhì)而影響透明度。2、盛裝培養(yǎng)基不宜用鐵、銅等容器,使用洗凈的中性硬質(zhì)玻璃容器為好。3、培養(yǎng)基的滅菌既要達(dá)到完全滅菌目的,又要注意不因加熱而降低其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,121℃15min即可,如為含有不耐高熱物質(zhì)的培養(yǎng)基如糖類、血清、明膠等,則應(yīng)采用低溫滅菌或間歇法滅菌,一些不能加熱的試劑如亞碲酸鉀、卵黃、TTC、克菌素等,待基礎(chǔ)瓊脂高壓滅菌后涼至50℃左右再加入。使用商品化脫水合成培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)嚴(yán)格按照廠...
培養(yǎng)基的重要性:培養(yǎng)基的質(zhì)量是微生物實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)工作的基礎(chǔ),事關(guān)檢測(cè)工作的準(zhǔn)確性、可靠性,在微生物實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)工作中舉足輕重。如果在工作中忽視任何一個(gè)環(huán)節(jié)的質(zhì)量問(wèn)題,都將導(dǎo)致檢驗(yàn)結(jié)果科學(xué)性、客觀性的偏離。因此,加強(qiáng)培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制,認(rèn)真地做好培養(yǎng)基的質(zhì)控工作,不斷完善和提高培養(yǎng)基的質(zhì)控水平,才能為微生物檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室提供高質(zhì)量的培養(yǎng)基。滅菌,一般培養(yǎng)基采用濕熱滅菌,即高壓蒸汽滅菌。第五,pH測(cè)定,微生物必須在適宜的pH范圍內(nèi)才能正常生長(zhǎng)繁殖或體現(xiàn)其生物特性。培養(yǎng)基制備器必須附有該批培養(yǎng)基制備記錄副頁(yè)或明顯標(biāo)簽。陜西培養(yǎng)基制備器品牌一種斜面培養(yǎng)基制備器,包括底板,所述底板左右兩側(cè)分別固定一塊側(cè)板,...
培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)室制備:1.pH的測(cè)定和調(diào)整:用pH計(jì)測(cè)定pH,必要時(shí)在滅菌前調(diào)節(jié)pH,除特殊說(shuō)明外,培養(yǎng)基滅菌后冷卻至25℃時(shí),要求pH的變化不超過(guò)0.2pH單位.通常使用濃度約為40g/L(約1mol/L)的氫氧化鈉溶液或濃度約為36.5g/L(約1mol/L)的鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH。如果滅菌后調(diào)節(jié)pH,溶液需滅菌。注:商品化培養(yǎng)基在高壓滅菌前后pH可能發(fā)生明顯變化,但使用蒸餾水或去離子水時(shí),滅菌前無(wú)需調(diào)節(jié)pH。2.分裝:將配置好的培養(yǎng)基分裝到適當(dāng)?shù)娜萜髦?,容器的體積至少為體積的1.2倍。培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度過(guò)大,會(huì)使?jié)B透壓過(guò)高,使細(xì)胞發(fā)生質(zhì)壁分離而抑制微生物生長(zhǎng)。內(nèi)蒙古不銹鋼內(nèi)桶培養(yǎng)基制備器培...
培養(yǎng)平板培養(yǎng)基是被用于獲得微生物純培養(yǎng)的很常用的固體培養(yǎng)基形式,它是冷卻凝固后的固體培養(yǎng)基在無(wú)菌培養(yǎng)皿中形成的培養(yǎng)基固體平面,常被簡(jiǎn)稱為培養(yǎng)平板。也叫平面培養(yǎng)基、平皿培養(yǎng)基。平板培養(yǎng)基常用于單孢分離,測(cè)定菌絲生長(zhǎng)速度,觀察菌落的形態(tài),拮抗實(shí)驗(yàn),測(cè)定接種空間雜菌數(shù)。平板培養(yǎng)基制作方法如下:將培養(yǎng)皿洗凈、干燥,使各培養(yǎng)皿蓋方向一致,用牛皮紙包好,或放入特制鐵罐內(nèi),注明皿蓋的方向。高壓滅菌或干燥滅菌后備用。取剛滅菌后尚未凝固的培養(yǎng)基置于無(wú)菌箱或超凈工作臺(tái)內(nèi),先左手持三角瓶,右手反轉(zhuǎn)手掌用中指和無(wú)名指撥出棉塞或硅膠賽(或不翻轉(zhuǎn)手掌用小指和手掌撥出棉塞),同時(shí)將三角瓶轉(zhuǎn)換至右手,而后左手拿平皿,以大拇指...
液體培養(yǎng)基:為確定液體培養(yǎng)基的生長(zhǎng)率,應(yīng)接種適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)物。下面介紹的是用定量、半定量和定性方法評(píng)估生長(zhǎng)率和選擇性的方法。所推薦的這些方法都是通過(guò)將液體培養(yǎng)基以傾注或劃線方式接種到瓊脂平板上培養(yǎng)后,計(jì)數(shù)或計(jì)算液體培養(yǎng)基分?jǐn)?shù)而得出其生長(zhǎng)數(shù)量的。對(duì)于液體培養(yǎng)基定性測(cè)試方法,則通過(guò)肉眼觀察來(lái)實(shí)現(xiàn)。目標(biāo)菌和非目標(biāo)菌的定量稀釋法步驟如下:選擇液體培養(yǎng)基10mL/管待檢。接種目標(biāo)菌:將少量測(cè)試菌株培養(yǎng)物(每管10CFU~100CFU)接種測(cè)試肉湯和標(biāo)準(zhǔn)肉湯,混勻。接種非目標(biāo)菌:將大量測(cè)試菌株培養(yǎng)物(每管大于1000CFU)接種測(cè)試肉湯和標(biāo)準(zhǔn)肉湯,混勻。全自動(dòng)培養(yǎng)基制備儀主要特點(diǎn):可連接電腦進(jìn)行打印。安徽培養(yǎng)...
利用三角培養(yǎng)瓶制備培養(yǎng)基:包扎,分裝好后,塞上棉塞,在用牛皮紙將棉塞包裹好,防止滅菌時(shí)水份進(jìn)入把棉塞弄濕。滅菌,按配方上要求的溫度、壓力進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高,營(yíng)養(yǎng)成分會(huì)被破壞,培養(yǎng)基中的糖、氨基酸會(huì)使培養(yǎng)基的顏色變深。擺斜面,滅菌后需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放,使其凝固成為一個(gè)斜面,約占試管長(zhǎng)度的1/2。貯存,培養(yǎng)基在30℃下放置,無(wú)污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用。培養(yǎng)基是細(xì)胞生長(zhǎng)的必需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),利用三角培養(yǎng)瓶制備培養(yǎng)基可按照以上步驟操作,在使用前需確保培養(yǎng)基的無(wú)菌性,以免影響細(xì)胞正常繁殖。培養(yǎng)基pH值的調(diào)正:pH因培養(yǎng)基在加熱消毒過(guò)程中、pH會(huì)有...
物理分類:液體培養(yǎng)基,80%~90%是水,其中配有可溶性的或不溶性的營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基。固體培養(yǎng)基,一類配制成的固體狀態(tài)的基質(zhì)。根據(jù)性質(zhì)又分為固化培養(yǎng)基、非可逆性固化培養(yǎng)基、天然固態(tài)培養(yǎng)基、濾膜。半固體培養(yǎng)基,指在液體培養(yǎng)基中加入少量的凝固劑而配制成的半固體狀態(tài)的培養(yǎng)基。脫水培養(yǎng)基,又稱預(yù)制干燥培養(yǎng)基,指含有除水分外的一切成分的商品培養(yǎng)基。微生物分類;選擇性培養(yǎng)基:一類根據(jù)某微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基,具有使混合菌樣中的劣勢(shì)菌變成優(yōu)勢(shì)菌的功能,較廣用于菌種篩選等領(lǐng)域。鑒別培養(yǎng)基:一類在成分中加有能與目的菌的無(wú)色代謝產(chǎn)物發(fā)生顯色反應(yīng)的指示劑,從而達(dá)到只須用肉眼辨...
培養(yǎng)基配置原則:選擇適宜的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),總體而言,所有微生物生長(zhǎng)繁殖均需要培養(yǎng)基含有碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子、水及能源,但由于微生物營(yíng)養(yǎng)類型復(fù)雜,不同微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需求是不一樣的,因此首先要根據(jù)不同微生物的營(yíng)養(yǎng)需求配制針對(duì)性強(qiáng)的培養(yǎng)基。自養(yǎng)型微生物能從簡(jiǎn)單的無(wú)機(jī)物合成自身需要的糖類、脂類、蛋白質(zhì)、核酸、維生素等復(fù)雜的有機(jī)物,因此培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基完全可以(或應(yīng)該)由簡(jiǎn)單的無(wú)機(jī)物組成。在該培養(yǎng)基配制過(guò)程中并未專門加入其他碳源物質(zhì),而是依靠空氣中和溶于水中的CO2為氧化硫硫桿菌提供碳源。就微生物主要類型而言,有細(xì)菌、放線菌、酵母菌、霉菌、原生動(dòng)物、藻類及病毒之分,培養(yǎng)它們所需的培養(yǎng)基各不...
消毒與滅菌的區(qū)別:消毒指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法單殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。消毒方法常用煮沸消毒法,巴氏消毒法(對(duì)于一些不耐高溫的液體)還有化學(xué)藥劑(如酒精、氯氣、石炭酸等)消毒、紫外線消毒。滅菌則是指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽孢和孢子。滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。滅菌方法:①接種環(huán)、接種針、試管口等使用灼燒滅菌法;②玻璃器皿、金屬用具等使用干熱滅菌法,所用器械是干熱滅菌箱;③培養(yǎng)基、無(wú)菌水等使用高壓蒸汽滅菌法,所用器械是高壓蒸汽滅菌鍋。④表面滅菌和空氣滅菌等使用紫外線滅菌法,所用器械是紫外燈。培養(yǎng)基制備器注意不...
培養(yǎng)基的制備:正確制備培養(yǎng)基時(shí)微生物檢驗(yàn)的較基礎(chǔ)步驟之一。使用脫水培養(yǎng)基和其他成分,尤其是含有有毒物質(zhì)(如膽鹽或其他選擇劑)的成分時(shí),應(yīng)遵守良好實(shí)驗(yàn)室規(guī)范和生產(chǎn)廠商提供的使用說(shuō)明。培養(yǎng)基的不正確制備會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基出現(xiàn)質(zhì)量問(wèn)題。使用商品化脫水合成培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)嚴(yán)格按照廠商提供的使用說(shuō)明配置。記錄所有相關(guān)數(shù)據(jù),如質(zhì)量/體積、pH、制備日期、滅菌條件和制備人員等。使用各別成分制備培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)按照配方準(zhǔn)確配制,記錄所有細(xì)節(jié)信息,如;培養(yǎng)基名稱和類型及試劑級(jí)別、每個(gè)成分物質(zhì)含量、制造商、批號(hào)、pH、培養(yǎng)基體積(分裝體積)、無(wú)菌措施(包括實(shí)施的方式、溫度及時(shí)間)、配置日期、人員等,以便潮源。培養(yǎng)基制...
培養(yǎng)基配置原則:滅菌處理,要獲得微生物純培養(yǎng),必須避免雜菌污染,因此對(duì)所用器材及工作場(chǎng)所進(jìn)行消毒與滅菌。對(duì)培養(yǎng)基而言,更是要進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌。對(duì)培養(yǎng)基一般采取高壓蒸汽滅菌,一般培養(yǎng)基用1.05kg/cm2,121.3℃條件下維持15-30min可達(dá)到滅菌目的。在高壓蒸汽滅菌過(guò)程中,長(zhǎng)時(shí)間高溫會(huì)使某些不耐熱物質(zhì)遭到破壞,如使糖類物質(zhì)形成氨基糖、焦糖,因此含糖培養(yǎng)基常在0.56kg/cm2,112.6℃15-30分鐘進(jìn)行滅菌,某些對(duì)糖類要求較高的培養(yǎng)基,可先將糖進(jìn)行過(guò)濾除菌或間歇滅菌,再與其他已滅菌的成分混合;長(zhǎng)時(shí)間高溫還會(huì)引起磷酸鹽、碳酸鹽與某些陽(yáng)離子(特別是鈣、鎂、鐵離子)結(jié)合形成難溶性復(fù)合物而...
配制培養(yǎng)基的原則:滅菌處理:為了避免雜菌污染,獲得微生物純培養(yǎng)物,培養(yǎng)基必須及時(shí)嚴(yán)格滅菌。通常采用高壓蒸汽滅菌。一般培養(yǎng)基用0.IMPa(121℃)維持15~30min即可徹底滅菌。長(zhǎng)時(shí)間的高溫滅菌會(huì)使某些不耐熱的物質(zhì)破壞,如使糖類物質(zhì)形成氨基糖、焦糖。因此,含糖培養(yǎng)基常用0.05MPa(110℃)滅菌20~30min某些對(duì)糖類要求更高的培養(yǎng)基,可先將糖過(guò)濾除菌或間歇滅菌,再與其他已滅菌的成分混合。長(zhǎng)時(shí)間高溫滅菌也會(huì)使磷酸鹽、碳酸鹽與鈣、鎂鐵等陽(yáng)離子形成難溶性化合物而產(chǎn)生沉淀。為了防止這類沉淀發(fā)生,可將這些物質(zhì)分別滅菌,冷卻后再混合;也可在培養(yǎng)基中加入少量整合劑(0.01%乙二胺四乙酸,即ED...
培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)室制備:①概述:培養(yǎng)基和試劑的滅菌通常采用濕熱滅菌或過(guò)濾滅菌。有些培養(yǎng)基無(wú)需高壓滅菌,可煮滅菌。如,含亮綠的腸道菌培養(yǎng)基對(duì)光和熱特別敏感,應(yīng)在煮沸后快速冷卻,避光保存。同樣,一些試劑則不需要滅菌,直接使用(參見相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)或生產(chǎn)廠商的使用說(shuō)明)。②濕熱滅菌;p濕熱滅菌在高壓鍋或培養(yǎng)基制備器中進(jìn)行。高壓霉菌一般采用121℃±3℃霉菌15min。如果培養(yǎng)基的體積超過(guò)1000mL,要對(duì)滅菌條件進(jìn)行適當(dāng)?shù)恼{(diào)整。所有操作均要按照標(biāo)準(zhǔn)和使用說(shuō)明的規(guī)定進(jìn)行。注:大容量培養(yǎng)基(>1000mL)滅菌時(shí)可能會(huì)造成過(guò)度加熱。加熱后應(yīng)采取適當(dāng)?shù)姆绞嚼鋮s,防止沸溢。這對(duì)大容量培養(yǎng)基和敏感性培養(yǎng)基(如含亮綠的培養(yǎng)...
培養(yǎng)基的類型:1、根據(jù)對(duì)培養(yǎng)基組成物質(zhì)的化學(xué)成分是否完全了解來(lái)區(qū)分,可以將培養(yǎng)基分為天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基和半合成培養(yǎng)基。(1)天然培養(yǎng)基:天然培養(yǎng)基是指利用各種動(dòng)、植物或微生物的原料,其成分難以確切知道。用作這種培養(yǎng)基的主要原料有:牛肉膏、麥芽汁、蛋白胨、酵母膏、玉米粉、麩皮、各種餅粉、馬鈴薯、牛奶、血清等。用這些物質(zhì)配成的培養(yǎng)基雖然不能確切知道它的化學(xué)成分,但一般來(lái)講,營(yíng)養(yǎng)是比較豐富的,微生物生長(zhǎng)旺盛,而且來(lái)源多方面,配制方便,所以較為常用,尤其適合于配制實(shí)驗(yàn)室常用的培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基的穩(wěn)定性常受生產(chǎn)廠或批號(hào)等因素的影響。(2)合成培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基是一類化學(xué)成分和數(shù)量完全知道的培養(yǎng)基,它是...
培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)室制備:1.pH的測(cè)定和調(diào)整:用pH計(jì)測(cè)定pH,必要時(shí)在滅菌前調(diào)節(jié)pH,除特殊說(shuō)明外,培養(yǎng)基滅菌后冷卻至25℃時(shí),要求pH的變化不超過(guò)0.2pH單位.通常使用濃度約為40g/L(約1mol/L)的氫氧化鈉溶液或濃度約為36.5g/L(約1mol/L)的鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH。如果滅菌后調(diào)節(jié)pH,溶液需滅菌。注:商品化培養(yǎng)基在高壓滅菌前后pH可能發(fā)生明顯變化,但使用蒸餾水或去離子水時(shí),滅菌前無(wú)需調(diào)節(jié)pH。2.分裝:將配置好的培養(yǎng)基分裝到適當(dāng)?shù)娜萜髦?,容器的體積至少為體積的1.2倍。培養(yǎng)基制備器真彩色液晶屏顯示,觸摸屏加按鍵操作。湖南培養(yǎng)基制備器多少錢培養(yǎng)基的類型:1.合成培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基是...
微生物發(fā)酵培養(yǎng)基配制注意事項(xiàng):①養(yǎng)分濃度和配比合適:微生物只有在培養(yǎng)基中養(yǎng)分濃度合適的情況下才能生長(zhǎng)良好是合適的。當(dāng)養(yǎng)分濃度過(guò)低時(shí),不能滿足微生物正常生長(zhǎng)的需要。②微生物培養(yǎng)基pH條件控制:培養(yǎng)基的pH必須控制在一定范圍內(nèi),以滿足不同種類微生物的生長(zhǎng)繁殖或產(chǎn)生代謝物。各種微生物生長(zhǎng)繁殖或代謝產(chǎn)物產(chǎn)生的較佳pH條件不同。通常細(xì)菌和放線菌適合在7~7.5pH范圍內(nèi)生長(zhǎng),酵母菌和霉菌一般在4.5~6pH范圍內(nèi)生長(zhǎng)。③微生物培養(yǎng)基原料來(lái)源選擇:培養(yǎng)基配制時(shí),應(yīng)盡可能使用低廉易得的原料作為培養(yǎng)基成分。尤其在發(fā)酵行業(yè),培養(yǎng)基用量大,使用成本較低原料實(shí)現(xiàn)產(chǎn)品附加價(jià)值。例如在微生物單細(xì)胞蛋白的工業(yè)化生產(chǎn)過(guò)程中...
馬鈴薯培養(yǎng)基的制作過(guò)程:(1)稱量和熬煮:按培養(yǎng)基配方逐一稱取去皮土豆。土豆切成小塊放入鍋中,加水1000ml,在加熱器上加熱至沸騰,維持20-30min,用可用2層紗布趁熱在量杯上過(guò)濾,濾渣棄取。濾液補(bǔ)充水分到1000ml。(2)加熱溶解:把濾液放入鍋中,加入葡萄糖20g,瓊脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉網(wǎng)上,小火加熱,并用玻棒不斷攪拌,以防瓊脂糊底或溢出,待瓊脂完全溶解后,再補(bǔ)充水分至所需量。(3)分裝:按實(shí)訓(xùn)要求,將配制的培養(yǎng)基分裝入試管或500ml三角瓶?jī)?nèi)。分裝時(shí)可用三角漏斗以免使培養(yǎng)基沾在管口或瓶口上造成污染。分裝量:固體培養(yǎng)基約為試管高度的1/5,滅菌后制成斜面,分裝入三...
天然培養(yǎng)基中血清主要作用:對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用:有一些細(xì)胞,如內(nèi)皮細(xì)胞、骨髓樣細(xì)胞可以釋放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。這種作用是偶然發(fā)現(xiàn)的,則有目的的使用血清來(lái)終止胰蛋白酶的消化作用。因?yàn)橐鹊鞍酌敢呀?jīng)被較廣用于貼壁細(xì)胞的消化傳代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械損傷,特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時(shí),粘度起到重要作用。血清還含有一些微量元素和離子,他們?cè)诖x中起重要作用,如SeO3、硒等。培養(yǎng)基制備器全自動(dòng)程序,無(wú)人值守;分裝過(guò)程無(wú)需人工干預(yù)。廣東培養(yǎng)基制備器品牌培養(yǎng)基配制:素:為防止培養(yǎng)時(shí)期細(xì)菌的污染,可在培養(yǎng)基中添加適當(dāng)素,一般用量與組織細(xì)胞培養(yǎng)相同:卡那霉...
培養(yǎng)基的類型:天然培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基是指利用各種動(dòng)、植物或微生物的原料,其成分難以確切知道。用作這種培養(yǎng)基的主要原料有:牛肉膏、麥芽汁、蛋白胨、酵母膏、玉米粉、麩皮、各種餅粉、馬鈴薯、牛奶、血清等。用這些物質(zhì)配成的培養(yǎng)基雖然不能確切知道它的化學(xué)成分,但一般來(lái)講,營(yíng)養(yǎng)是比較豐富的,微生物生長(zhǎng)旺盛,而且來(lái)源普遍,配制方便,所以較為常用,尤其適合于配制實(shí)驗(yàn)室常用的培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基的穩(wěn)定性常受生產(chǎn)廠或批號(hào)等因素的影響。培養(yǎng)基是生物制品領(lǐng)域中常用的物質(zhì),在細(xì)菌和細(xì)胞培養(yǎng)中十分必要。培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器價(jià)格分裝:配制好的培養(yǎng)基根據(jù)不同的用途分裝在三角瓶、試管等容器中,分裝試管,如果試管量很大,可用自動(dòng)...
馬鈴薯培養(yǎng)基的分裝:1.根據(jù)需要將培養(yǎng)基分裝于不同容量的三角燒瓶、試管中。分裝的量不宜超過(guò)容器的2/3以免滅菌時(shí)外溢。2.瓊脂斜面分裝量為試管容量的1/5,滅菌后須趁熱放置成斜面,斜面長(zhǎng)約為試管長(zhǎng)的2/3。3.半固體培養(yǎng)基分裝量約為試管長(zhǎng)的1/3,滅菌后直立凝固待用。4.高層瓊脂分裝量約為試管的1/3,滅菌后趁熱直立,待冷后凝固待用。5.液體培養(yǎng)基分裝于試管中,約是試管長(zhǎng)度的1/3。6.瓊脂平板:將滅菌(或加熱融化)后的培養(yǎng)基冷至50℃左右,以無(wú)菌手續(xù)傾人滅菌平皿內(nèi),內(nèi)徑225px的平皿傾注培養(yǎng)基約13~15ml,輕搖平皿底,使培養(yǎng)基平鋪于平皿底部,待凝固后即成,傾注培養(yǎng)基時(shí),切勿將皿蓋全部啟...
加棉塞:分裝完畢后,需要用棉塞堵住管口或瓶口。堵棉塞的主要目的是過(guò)濾空氣,避免污染。棉塞應(yīng)采用普通新鮮、干燥的棉花制作,不要用脫脂棉,以免因脫脂棉吸水使棉塞無(wú)法使用。制作棉塞時(shí),要根據(jù)棉塞大小將棉花鋪展成適當(dāng)厚度,揪取手掌心大小一塊,鋪在左手拇指與食指圈成的圓孔中,用右手食指插入棉花中部,同時(shí)左手食指與姆指稍稍緊握,就會(huì)形成1個(gè)長(zhǎng)棒形的棉塞。棉塞作成后,應(yīng)迅速塞入管口或瓶口中,棉塞應(yīng)緊貼內(nèi)壁不留縫隙,以防空氣中微生物沿皺折侵入。棉塞不要過(guò)緊過(guò)松,塞好后,,以手提棉塞、管、瓶不下落為合適。棉塞的2/3應(yīng)在管內(nèi)或瓶?jī)?nèi),上端露出少許棉花便于拔取。塞好棉塞的試管和錐形瓶應(yīng)蓋上厚紙用繩捆札,準(zhǔn)備滅菌。要...