細(xì)胞支原體預(yù)防價格

來源: 發(fā)布時間:2024-06-27

支原體預(yù)防的主要成分通常是指用于預(yù)防支原體污染的抗*素或化學(xué)試劑。在細(xì)胞培養(yǎng)中,預(yù)防支原體污染的措施包括在培養(yǎng)基中添加抗*素,以及采取其他預(yù)防措施來保持實驗室環(huán)境的清潔和無菌操作。以下是一些用于預(yù)防支原體污染的主要成分:
1. 四環(huán)素類抗*素:這類抗*素對支原體具有抑制作用,常用于治*和預(yù)防支原體感*。
2. 大環(huán)內(nèi)酯類抗*素:例如羅紅霉素、克拉霉素、阿奇霉素等,用于治*肺炎支原體感*。
3. 喹諾酮類藥物:如氧氟沙星、司帕沙星等,也用于治*肺炎支原體感*。
4. 其他抗*素:例如氨基糖苷類、氯霉素等,對支原體有較小的抑制作用。
細(xì)胞培養(yǎng)過程中支原體污染怎么預(yù)防?細(xì)胞支原體預(yù)防價格

細(xì)胞支原體預(yù)防價格,支原體

支原體污染一旦發(fā)生,不僅對細(xì)胞培養(yǎng)造成嚴(yán)重影響,甚至可能導(dǎo)致實驗結(jié)果失真。而且支原體污染在細(xì)胞培養(yǎng)實驗中相當(dāng)常見。因此,預(yù)防措施是確保細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境和實驗結(jié)果可靠性的重要手段。
01/ 良好的無菌技術(shù)及實驗操作,保證操作不會引入新的污染
02/ 保持實驗空間的清潔
03/ 確保從可靠的來源獲取細(xì)胞,減少不同細(xì)胞之間的交叉?zhèn)魅?/span>
04/ 防止交叉污染
05/ 減少氣溶膠生成
06/ 謹(jǐn)慎使用抗*素
07/ 定期支原體篩查
08/ 丟棄或處理受到支原體污染的細(xì)胞
09/ 保持良好的記錄
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細(xì)胞支原體預(yù)防價格,支原體

方法

靈敏度

優(yōu)勢

劣勢

培養(yǎng)法

☆☆☆

ü 便捷

ü 便宜

ü 金標(biāo)準(zhǔn)

ü 費(fèi)勞力

ü 耗時長

ü 需要特定的培養(yǎng)基

ü 特定支原體種類需要特定的培養(yǎng)基

DNA染色

(DAPI or Hoescht)

ü 迅速

ü 便捷

ü 便宜

ü 可能難以判讀結(jié)果

ü 無法鑒別支原體種屬

ü 可能假陽性可能性

間接染色

☆☆☆

ü 迅速

ü 便宜

ü 易檢測

ü 費(fèi)時

ü 需要細(xì)胞系指示

ELISA

☆☆

ü 迅速

ü 客觀,易判讀結(jié)果

ü 可以鑒別支原體種屬

ü 受抗體限制

ü 價格高

免疫染色

☆☆

ü 迅速

ü 可檢測支原體種屬

ü 價格略高

ü 可檢測的支原體種屬有限

放射自顯影

☆☆

ü 迅速

ü 難以判讀結(jié)果

ü 無法鑒別支原體種屬

ü 費(fèi)勞力

生物發(fā)光

☆☆

ü 迅速

ü 便捷

ü 便宜

ü 難以判讀結(jié)果

ü 無法鑒別支原體種屬

PCR

☆☆☆

ü 便宜

ü 迅速

ü 具有特異性

ü 可能假陽性可能性

ü 檢測特異性依賴引物特異性

ü 需要提取DNA

Real-Time PCR

☆☆☆

ü 便捷

ü 迅速

ü 具有特異性

ü 結(jié)果可靠

ü 高通量

ü 可能假陽性可能性

ü 檢測特異性依賴引物特異性

ü 需要提取DNA

LAMP

☆☆

ü 便捷

ü 無需DNA提取

ü *需10min左右的實驗操作時間

ü 具有特異性

ü 高通量

ü 可能假陽性可能性

ü 檢測特異性依賴引物特異性

細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染會對實驗結(jié)果產(chǎn)生多方面的影響,具體包括:
1. 細(xì)胞生長受影響:支原體污染可能導(dǎo)致細(xì)胞生長速度減慢,甚至停滯。
2. 細(xì)胞形態(tài)改變:支原體感*的細(xì)胞可能會出現(xiàn)形態(tài)的改變,如細(xì)胞體積增大、形態(tài)不規(guī)則等。
3. 細(xì)胞功能改變:支原體污染會影響細(xì)胞的代謝、增殖、分化等生理功能。
4. 細(xì)胞產(chǎn)物改變:支原體感*可能影響細(xì)胞產(chǎn)生的蛋白質(zhì)、細(xì)胞因子等生物活性物質(zhì)的表達(dá)和分泌。
5. 實驗結(jié)果不準(zhǔn)確:支原體污染會干擾實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,導(dǎo)致實驗數(shù)據(jù)不可靠。
6. 實驗重復(fù)性差:支原體污染的細(xì)胞培養(yǎng)批次間差異大,影響實驗的重復(fù)性。
7. 影響后續(xù)實驗:支原體污染的細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)物用于后續(xù)實驗,如轉(zhuǎn)染、基因編輯等,可能會影響實驗效果。
8. 影響細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)物的質(zhì)量:支原體污染會影響細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)物的質(zhì)量,如疫苗、生物制品等。
9. 增加研究成本:支原體污染需要花費(fèi)額外的時間和成本進(jìn)行檢測、處理和重復(fù)實驗。
支原體去除試劑會影響細(xì)胞的生長狀態(tài)嘛?

細(xì)胞支原體預(yù)防價格,支原體

qPCR法,即定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Quantitative Polymerase Chain Reaction)法,是一種高度靈敏和特異的分子生物學(xué)技術(shù),用于檢測和定量DNA序列。在支原體檢測中,qPCR法的原理主要包括以下幾個步驟:
1. DNA提取:首先從待測樣本中提取DNA,這可能包括細(xì)胞培養(yǎng)上清液或組織樣本中的支原體DNA。
2. 設(shè)計特異性引物:針對支原體的保守DNA序列,如16S rRNA基因,設(shè)計特異性的DNA引物。
3. 熒光標(biāo)記探針:使用熒光標(biāo)記的探針,該探針與目標(biāo)DNA序列互補(bǔ),能夠在PCR擴(kuò)增過程中與擴(kuò)增的DNA結(jié)合。
4. Ct值確定:Ct值(閾值循環(huán)數(shù))是指在PCR反應(yīng)中,熒光信號強(qiáng)度超過預(yù)定閾值的循環(huán)次數(shù)。Ct值越低,表示樣本中支原體DNA的量越多。
5. 定量分析:通過標(biāo)準(zhǔn)曲線法或相對定量法,將Ct值轉(zhuǎn)換為支原體DNA的定量結(jié)果。
qPCR法的優(yōu)勢在于其高靈敏度和特異性,能夠檢測到非常低水平的支原體污染,并且可以在短時間內(nèi)提供結(jié)果,這對于需要快速檢測的生物制品生產(chǎn)和細(xì)胞培養(yǎng)質(zhì)量控制非常重要
支原體去除之后對細(xì)胞檢測有無影響?南京支原體檢測要多久

細(xì)胞培養(yǎng)支原體污染怎么去除?細(xì)胞支原體預(yù)防價格

細(xì)胞培養(yǎng)中如果污染了支原體,會有以下幾種影響:

1. 細(xì)胞生長受影響:支原體污染會導(dǎo)致細(xì)胞生長速度減慢,甚至停止生長。細(xì)胞可能會變圓,從培養(yǎng)瓶壁脫落。
2. 細(xì)胞形態(tài)變化:雖然某些細(xì)胞在支原體污染后形態(tài)變化不明顯,但有些細(xì)胞會出現(xiàn)體積增大,細(xì)胞碎片增多,培養(yǎng)瓶中細(xì)胞間隙出現(xiàn)膜狀沉積等現(xiàn)象。
3. 代謝和功能改變:支原體污染會影響細(xì)胞的代謝和功能,例如培養(yǎng)液中的精氨酸被大量消耗,引起細(xì)胞蛋白質(zhì)、DNA、rRNA、mRNA的合成障礙。支原體活動還可能引起培養(yǎng)液成分和pH值的變化。
4. 實驗結(jié)果受影響:使用被支原體污染的細(xì)胞進(jìn)行實驗會嚴(yán)重影響實驗結(jié)果,因為支原體會抑制細(xì)胞生長,導(dǎo)致染色體畸變,細(xì)胞膜抗原性改變,細(xì)胞復(fù)蘇后存活率降低等。
5. 細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境的污染:一株污染的細(xì)胞可能成為實驗室的污染源,對工作區(qū)域以及培養(yǎng)箱和液氮罐造成污染,進(jìn)而污染其他細(xì)胞,導(dǎo)致其他細(xì)胞繼發(fā)性污染。
6. 科研結(jié)果的重復(fù)性問題:由于支原體污染,某些實驗結(jié)果可能能在支原體陽性的細(xì)胞中得到,導(dǎo)致科研結(jié)果的重復(fù)性受到影響
細(xì)胞支原體預(yù)防價格

標(biāo)簽: 支原體 免疫沉淀