廣州細(xì)胞支原體去除

來源: 發(fā)布時間:2024-07-16

細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染會對實驗結(jié)果產(chǎn)生多方面的影響,具體包括:
1. 細(xì)胞生長受影響:支原體污染可能導(dǎo)致細(xì)胞生長速度減慢,甚至停滯。
2. 細(xì)胞形態(tài)改變:支原體感*的細(xì)胞可能會出現(xiàn)形態(tài)的改變,如細(xì)胞體積增大、形態(tài)不規(guī)則等。
3. 細(xì)胞功能改變:支原體污染會影響細(xì)胞的代謝、增殖、分化等生理功能。
4. 細(xì)胞產(chǎn)物改變:支原體感*可能影響細(xì)胞產(chǎn)生的蛋白質(zhì)、細(xì)胞因子等生物活性物質(zhì)的表達(dá)和分泌。
5. 實驗結(jié)果不準(zhǔn)確:支原體污染會干擾實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,導(dǎo)致實驗數(shù)據(jù)不可靠。
6. 實驗重復(fù)性差:支原體污染的細(xì)胞培養(yǎng)批次間差異大,影響實驗的重復(fù)性。
7. 影響后續(xù)實驗:支原體污染的細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)物用于后續(xù)實驗,如轉(zhuǎn)染、基因編輯等,可能會影響實驗效果。
8. 影響細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)物的質(zhì)量:支原體污染會影響細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)物的質(zhì)量,如疫苗、生物制品等。
9. 增加研究成本:支原體污染需要花費額外的時間和成本進行檢測、處理和重復(fù)實驗。
支原體檢測方法qPCR法的應(yīng)用。廣州細(xì)胞支原體去除

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支原體去除的原理通常涉及以下幾個方面:
1. 抗*素作用:使用特定的抗*素制劑來抑制支原體的生長和繁殖。例如,含有喹諾酮類、四環(huán)素衍生物類和大環(huán)內(nèi)酯類抗*素的混合制劑,這些抗*素能夠抑制支原體的DNA和蛋白合成。
2. 破壞細(xì)胞膜:支原體去除劑中的抑菌肽(AMPs)成分通過破壞支原體細(xì)胞膜的完整性,導(dǎo)致支原體細(xì)胞死亡。
3. 抑制DNA復(fù)制:支原體去除劑通過抑制支原體DNA回旋酶活性,有效抑制支原體DNA的復(fù)制,從遺傳物質(zhì)著手徹底殺滅支原體。
4. 協(xié)同作用:某些支原體去除劑利用抑菌肽(AMPs)和穿膜肽(CPPs)的協(xié)同作用來除去支原體,穿膜肽能夠幫助抑菌肽更有效地穿透細(xì)胞膜,增強其殺滅支原體的能力。

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支原體預(yù)防的主要成分通常是指用于預(yù)防支原體污染的抗*素或化學(xué)試劑。在細(xì)胞培養(yǎng)中,預(yù)防支原體污染的措施包括在培養(yǎng)基中添加抗*素,以及采取其他預(yù)防措施來保持實驗室環(huán)境的清潔和無菌操作。以下是一些用于預(yù)防支原體污染的主要成分:
1. 四環(huán)素類抗*素:這類抗*素對支原體具有抑制作用,常用于治*和預(yù)防支原體感*。
2. 大環(huán)內(nèi)酯類抗*素:例如羅紅霉素、克拉霉素、阿奇霉素等,用于治*肺炎支原體感*。
3. 喹諾酮類藥物:如氧氟沙星、司帕沙星等,也用于治*肺炎支原體感*。
4. 其他抗*素:例如氨基糖苷類、氯霉素等,對支原體有較小的抑制作用。

支原體污染一旦發(fā)生,不僅對細(xì)胞培養(yǎng)造成嚴(yán)重影響,甚至可能導(dǎo)致實驗結(jié)果失真。而且支原體污染在細(xì)胞培養(yǎng)實驗中相當(dāng)常見。因此,預(yù)防措施是確保細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境和實驗結(jié)果可靠性的重要手段。
01/ 良好的無菌技術(shù)及實驗操作,保證操作不會引入新的污染
02/ 保持實驗空間的清潔
03/ 確保從可靠的來源獲取細(xì)胞,減少不同細(xì)胞之間的交叉?zhèn)魅?/span>
04/ 防止交叉污染
05/ 減少氣溶膠生成
06/ 謹(jǐn)慎使用抗*素
07/ 定期支原體篩查
08/ 丟棄或處理受到支原體污染的細(xì)胞
09/ 保持良好的記錄
支原體檢測有哪些方法?

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細(xì)胞庫支原體檢測的必要性主要體現(xiàn)在以下幾個方面:
1. 確保細(xì)胞庫的質(zhì)量與安全性:細(xì)胞庫的建立需要為生物制品的生產(chǎn)提供檢定合格、質(zhì)量相同、能持續(xù)穩(wěn)定傳代的細(xì)胞。支原體檢測是確保細(xì)胞庫中細(xì)胞質(zhì)量的重要環(huán)節(jié)。
2. 符合監(jiān)管要求:支原體檢測是生物制品安全性監(jiān)管的一部分,全球范圍內(nèi)的藥典、法規(guī)和指導(dǎo)文件中都有支原體檢測的相關(guān)說明。
3. 避免對生物制品的影響:支原體污染可能會影響生物制品的安全性和有效性,因此需要通過檢測來避免這種風(fēng)險。
4. 維護細(xì)胞培養(yǎng)的穩(wěn)定性:支原體是真核細(xì)胞和干細(xì)胞培養(yǎng)中最常見的問題之一,它們可以改變細(xì)胞的代謝、減緩增殖速度,甚至引起染色體畸變。
5. 預(yù)防交叉污染:由于支原體可以通過氣溶膠和微粒污染實驗室其他區(qū)域,支原體檢測有助于預(yù)防交叉污染的發(fā)生。
6. 保障數(shù)據(jù)的可靠性:支原體污染可能會影響實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,因此定期進行支原體檢測有助于保障研究數(shù)據(jù)的可靠性。
7. 常規(guī)監(jiān)測的重要性:支原體應(yīng)成為細(xì)胞培養(yǎng)實驗室的常規(guī)監(jiān)測項目,以確保細(xì)胞培養(yǎng)的質(zhì)量和安全。
8. 遵守藥典規(guī)定:根據(jù)中國藥典的規(guī)定,每8~12代細(xì)胞培養(yǎng)物應(yīng)進行支原體檢查,以符合規(guī)定。
支原體去除的實驗步驟?蘇州細(xì)胞支原體預(yù)防多少錢

支原體去除的原理是什么?廣州細(xì)胞支原體去除

支原體污染是細(xì)胞培養(yǎng)中普遍的問題之一,細(xì)胞庫中或正在使用的細(xì)胞中,支原體的污染率約為15%-35%。并對培養(yǎng)細(xì)胞的生理和代謝造成諸多影響:
01/ 爭奪營養(yǎng):支原體的污染會阻礙細(xì)胞生長和增殖 
02/ 改變蛋白質(zhì)、RNA 或 DNA 合成的水平 
03/ 改變基因表達(dá)、細(xì)胞信號傳導(dǎo)和形態(tài) 
04/ 損害膜和細(xì)胞器 
05/ 導(dǎo)致突變和染色體變化 
06/ 時間、金錢和有價值的細(xì)胞丟失:支原體的污染會導(dǎo)致嚴(yán)重的經(jīng)濟損失以及研究時間損失
07/ 實驗結(jié)果的不可靠性 
08/ 生物安全問題
廣州細(xì)胞支原體去除

標(biāo)簽: 免疫沉淀 支原體