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糖類染色:糖類從組織化學(xué)技術(shù)角度來(lái)分,可分為多糖、中性粘液物質(zhì)、酸性粘液物質(zhì)、粘蛋白及粘脂質(zhì)。多糖主要指糖原,它是一種膠樣液態(tài)存在于肝細(xì)胞、骨骼肌、心肌等處。因糖原在肝臟及心肌疾患及某些的病變中分布和量都有一定改變,故糖原的染色在臨床病理診斷上具有重要意義。(1)肝及心肌糖原沉著癥的診斷:糖原染色顯示在肝或心肌細(xì)胞內(nèi)有大量糖原存在即可確診。(2)糖尿病性腎小球硬化癥或血管病的診斷。(3)高雪氏病與尼曼——匹克氏病的鑒別:前者為陽(yáng)性、后者為陰性,做此染色較易鑒別。(4)骨內(nèi)骨外尤文氏肉瘤的診斷:此瘤80%細(xì)胞內(nèi)有較多糖原,糖原染色為陽(yáng)性,所以糖原染色為陽(yáng)性(大多數(shù)細(xì)胞)可以協(xié)助診斷。(5)腺泡狀軟組織肉瘤與化感瘤:前者棒狀小體糖原染色為陽(yáng)性。冷凍切片染色時(shí)間盡量要短。上海口碑好的糖原染色試劑盒平均價(jià)格
糖原及粘液染色法注意事項(xiàng):1、糖原的固定要及時(shí),而且標(biāo)本要新鮮。2、如用無(wú)水酒精作糖原的固定劑,有它的弊病,因無(wú)水酒精滲透較慢,而且容易產(chǎn)生極化,(極化是糖原顆粒趨向于細(xì)胞的一端)。故用Gendre氏固定液效果較佳,其配法如下:苦味酸飽和于95%酒精85ml40%甲醛10ml冰醋酸5ml3、各種試劑必須化學(xué)純,亞硫酸鈉須有濃厚氣味,器皿必須潔凈而干燥,染色缸亦是。4、如果Schiff氏試劑,在經(jīng)過(guò)活性碳吸附漂白后不顯無(wú)色,首先應(yīng)考慮試劑中的偏重亞硫酸鈉是否失效。如果偏重亞硫酸鈉氣味不濃,使用時(shí)可考慮適當(dāng)?shù)脑黾佑昧?。其次考慮堿性品紅本身,常常雖屬同一生產(chǎn)廠家,但不同批號(hào),其效果就可能不同,應(yīng)特別引起注意。江蘇咨詢糖原染色試劑盒推薦廠家操作簡(jiǎn)單方便,1h內(nèi)即可完成反應(yīng)。
染色試劑盒:GUS基因就是β-葡萄糖苷酸酶基因(β-glucuronidase),是從大腸桿菌K-12菌株分離出的一種酸性水解酶。該基因產(chǎn)物為β-葡萄糖苷酸酶,屬水解酶類,相當(dāng)穩(wěn)定而不易降解,以β-葡萄糖苷酸酯類物質(zhì)為底物,其反應(yīng)產(chǎn)物可用多種方法檢測(cè)出來(lái)。由于絕大多數(shù)植物沒(méi)有檢測(cè)到葡萄糖苷酸酶的背景活性,因此這個(gè)基因被普遍應(yīng)用于基因調(diào)控的研究中。根據(jù)GUS基因檢測(cè)所用的底物不同,可以選擇三種檢測(cè)方法:組織化學(xué)法、分光光度法和熒光法(靈感度為分光光度檢測(cè)法較高)。其中較為常用的是組織化學(xué)法。
臨床意義:1.急性白血病類型的鑒別紅白血病的幼紅細(xì)胞PAS染色多呈陽(yáng)性反應(yīng),陽(yáng)性率高,反應(yīng)強(qiáng);成熟紅細(xì)胞有時(shí)亦可為陽(yáng)性;急性淋巴細(xì)胞白血病的原、幼淋巴細(xì)胞PAS染色多為紅色顆?;驂K狀陽(yáng)性反應(yīng);急性粒細(xì)胞白血病的原粒細(xì)胞呈陰性或胞質(zhì)呈彌漫淡色陽(yáng)性反應(yīng);急性早幼粒細(xì)胞白血病異常早幼粒細(xì)胞的PAS染色為陽(yáng)性反應(yīng);急性單核細(xì)胞白血病原、幼單核細(xì)胞PAS染色陽(yáng)性反應(yīng)呈彌漫分布的紅色細(xì)顆粒,巨核細(xì)胞白血病原巨核細(xì)胞PAS染色呈陽(yáng)性或強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng),表現(xiàn)為紅色顆?;驂K狀。2.各類貧血的鑒別MDS、缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙性貧血(曾稱地中海貧血)的幼紅細(xì)胞PAS染色多為陰性反應(yīng),有時(shí)可出現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng);巨幼紅細(xì)胞貧血、溶血性貧血、再障的幼紅細(xì)胞PAS染色為陰性。利用化學(xué)試劑與細(xì)胞內(nèi)的某些物質(zhì)進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)。
特染的應(yīng)用價(jià)值:現(xiàn)代病理學(xué)中免疫組織化學(xué)技術(shù)、電子顯微鏡技術(shù)以及其它細(xì)胞及分子生物學(xué)技術(shù)應(yīng)用日益普遍,但由于這些技術(shù)要求一定的實(shí)驗(yàn)條件以及所需的試劑價(jià)格較為昂貴,對(duì)于一部分病人以及某一些基層醫(yī)院是比較難以接受的。而組織化學(xué)技術(shù)則具有無(wú)需復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)條件以及較為昂貴的試劑操作又比較簡(jiǎn)單的優(yōu)勢(shì),在臨床病理學(xué)診斷中具有重要的應(yīng)用價(jià)值。比如,當(dāng)細(xì)胞中出現(xiàn)色素,是黑色素還是含鐵血黃素以及當(dāng)組織中出現(xiàn)均一化學(xué)物質(zhì)是否為淀粉樣變性等,用組織化學(xué)技術(shù)區(qū)別起來(lái)很簡(jiǎn)單,所以組織化學(xué)技術(shù),雖然已有幾十年到幾百年的歷史,仍是一個(gè)很有實(shí)用價(jià)值的技術(shù)。過(guò)碘酸氧化時(shí)間不宜過(guò)久,氧化時(shí)的溫度以18~22℃佳。上海品牌糖原染色試劑盒服務(wù)電話
自早幼粒階段以后的粒細(xì)胞和幼單核細(xì)胞可呈弱陽(yáng)性反應(yīng)。上海口碑好的糖原染色試劑盒平均價(jià)格
糖原染色的原理與操作方法是什么:(1)原理:過(guò)碘酸將血細(xì)胞內(nèi)的糖原氧化,生成醛基。醛基與雪夫液中的無(wú)色品紅結(jié)合,形成紫色化合物,定位于細(xì)胞質(zhì)中。(2)操作方法:干燥涂片,滴加甲醛固定液固定10分鐘,流水沖洗,晾干。滴加過(guò)碘酸溶液作用20分鐘,流水沖洗,晾干。滴加雪夫液作用60分鐘,流水沖洗,晾干。滴加甲基綠溶液復(fù)染10分鐘,流水沖洗,晾干鏡檢。細(xì)胞的組織化學(xué)方法,是研究細(xì)胞成分常用的方法之一。它是利用化學(xué)試劑與細(xì)胞內(nèi)的某些物質(zhì)進(jìn)行化學(xué)反應(yīng),從而在細(xì)胞局部形成有色沉淀物,再通過(guò)顯微鏡對(duì)組織內(nèi)的生物化學(xué)成分進(jìn)行定性、定位、定量研究。上??诒玫奶窃旧噭┖衅骄鶅r(jià)格
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