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染色的一般原則：因檢測細胞的類型、凋亡誘導劑種類、使用的檢測儀器不同，因而流式檢測的熒光補償也不同，因此建議每次檢測均需使用凋亡誘導處理的細胞做單陽對照，進行熒光補償?shù)恼{節(jié)。標記抗體常用熒光素FITC，EGFP激發(fā)光：488nm發(fā)射光：525nm;使用面較廣，價格便宜。PE激發(fā)光488nm發(fā)射光575nm，此熒光的激發(fā)效率較佳，故此熒光得到的信號較強；檢測某些弱表達的抗原，推薦使用此熒光素。價格較FITC昂貴。APC激發(fā)光633nm，發(fā)射光660nm，在配有雙激光的流式細胞儀上，此熒光染料可與7-AAD或PI共同使用來避開自帶綠色熒光的樣本。流式細胞儀相關試劑盒。故PAS染色有助于三種急性白血病類型的鑒別。安徽哪家提供糖原染色試劑盒廠家供應

染色試劑盒：GUS基因就是β-葡萄糖苷酸酶基因(β-glucuronidase)，是從大腸桿菌K-12菌株分離出的一種酸性水解酶。該基因產(chǎn)物為β-葡萄糖苷酸酶，屬水解酶類，相當穩(wěn)定而不易降解，以β-葡萄糖苷酸酯類物質為底物，其反應產(chǎn)物可用多種方法檢測出來。由于絕大多數(shù)植物沒有檢測到葡萄糖苷酸酶的背景活性，因此這個基因被普遍應用于基因調控的研究中。根據(jù)GUS基因檢測所用的底物不同，可以選擇三種檢測方法：組織化學法、分光光度法和熒光法（靈感度為分光光度檢測法較高）。其中較為常用的是組織化學法。浙江品質好的糖原染色試劑盒進貨價動物材料取用時需對動物施以麻醉，常用的麻醉劑有氯仿和。

糖原染色試劑盒。含乙二醇基的多糖經(jīng)過碘酸氧化，產(chǎn)生醛基，與雪夫（Schiff）試劑中無色品紅結合，形成紫紅色沉淀物定位于含糖原的胞漿中。該反應稱為碘酸-雪夫（PAS）反應。（1）雪夫液配制：堿性品紅1g溶于200ml沸水中，冷卻60℃時過濾，加1mmol/L鹽酸20ml，再冷卻至25℃左右，加偏重亞硫酸鈉（Na2S2O5）2g，混合后放棕色瓶中，置暗處24h，無色即可放冰箱中保存，呈微紅色，則加活性炭1～2g，吸附過濾使成無色液體，放冰箱中保存。若溶液變紅，即不能再用。（2）10g/L過碘酸水溶液：過碘酸（HIO4·2H2O）1g,加蒸餾水至10ml。溶解后蓋緊放冰箱備用，一般可用3個月，變黃則失效

試劑盒：JC-1是一種陽離子脂質熒光染料，可作為檢測線粒體跨膜電位指示劑。JC-10染料是JC-1染料的升級，有著更很好的水溶性以及染料穩(wěn)定性。原理：JC-1染料在正常細胞內聚集在線粒體內，形成多聚體，發(fā)紅色熒光；而在凋亡細胞內，由于線粒體膜電位的破壞，不能聚集到線粒體內，以單體的形式存在于胞質內發(fā)綠色熒光。JC-1有單體和多聚體兩種存在狀態(tài)，在低濃度時以單體的形式存在，高濃度時以多聚體形式存在，兩者的發(fā)射光譜不同，但均可在流式細胞儀綠色（FL-1）通道檢測出綠色熒光，JC-1可透過正常細胞膜以單體狀態(tài)聚集胞內。多糖主要指糖原，它是一種膠樣液態(tài)存在于肝細胞、骨骼肌、心肌等處。

臨床意義：1.急性白血病類型的鑒別紅白血病的幼紅細胞PAS染色多呈陽性反應，陽性率高，反應強；成熟紅細胞有時亦可為陽性；急性淋巴細胞白血病的原、幼淋巴細胞PAS染色多為紅色顆粒或塊狀陽性反應；急性粒細胞白血病的原粒細胞呈陰性或胞質呈彌漫淡色陽性反應；急性早幼粒細胞白血病異常早幼粒細胞的PAS染色為陽性反應；急性單核細胞白血病原、幼單核細胞PAS染色陽性反應呈彌漫分布的紅色細顆粒，巨核細胞白血病原巨核細胞PAS染色呈陽性或強陽性反應，表現(xiàn)為紅色顆?；驂K狀。2.各類貧血的鑒別MDS、缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙性貧血（曾稱地中海貧血）的幼紅細胞PAS染色多為陰性反應，有時可出現(xiàn)陽性反應；巨幼紅細胞貧血、溶血性貧血、再障的幼紅細胞PAS染色為陰性。切出的石蠟切片要好，不能有皺褶或者刀痕，切片不能太厚。北京品質好的糖原染色試劑盒哪里買

無水酒精滲透較慢，而且容易產(chǎn)生極化。安徽哪家提供糖原染色試劑盒廠家供應

注意事項：染色前：①切出的石蠟切片要好，不能有皺褶或者刀痕，切片不能太厚。②撈片時，較好一張玻片撈一個組織，組織較好位于玻片的中間，美觀的同時也利于脫蠟（有時二甲苯的液面低于組織片的時候，達不到脫蠟的目的）。③石蠟切片脫蠟到水時，一定要注意組織切片脫蠟務必要徹底（脫蠟時間不能太少）以使脫蠟后的組織達到真正的“干凈”。否則剩余的未脫干凈的石蠟粘附在組織表面，在染色時染色液未能充分與組織接觸，較終導致染色效果不佳，甚至染不上顏色。④在染色過程中較好不要在玻片上貼標簽紙，以避免脫蠟時把標簽紙也浸沒，致使標簽紙上的膠黏到玻片上，造成染色不佳。安徽哪家提供糖原染色試劑盒廠家供應

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