蕪湖太原RNA提取試劑

核糖核酸（縮寫為RNA，即RibonucleicAcid），存在于生物細(xì)胞以及部分病菌、類病菌中的遺傳信息載體。RNA由核糖核苷酸經(jīng)磷酸二酯鍵縮合而成長(zhǎng)鏈狀分子。一個(gè)核糖核苷酸分子由磷酸，核糖和堿基構(gòu)成。RNA的堿基主要有4種，即A（腺嘌呤）、G（鳥嘌呤）、C（胞嘧啶)、U(尿嘧啶)，其中，U（尿嘧啶）取代了DNA中的T。核糖核酸在體內(nèi)的作用主要是引導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成。人體一個(gè)細(xì)胞含RNA約10pg（含DNA約7pg）。與DNA相比，RNA種類繁多，分子量較小，含量變化大。RNA可根據(jù)結(jié)構(gòu)和功能的不同分為信使RNA和非編碼RNA。非編碼RNA分為非編碼大RNA和非編碼小RNA。非編碼大RNA包括核糖體RNA、長(zhǎng)鏈非編碼RNA。非編碼小RNA包括轉(zhuǎn)移RNA、核酶、小分子RNA等。小分子RNA（20~300nt）包括miRNA、SiRNA、piRNA、scRNA、snRNA、snoRNA等，細(xì)菌也有小分子RNA（50~500nt）。主要取決于離心柱對(duì)核酸的吸附能力。蕪湖太原RNA提取試劑

動(dòng)物組織總RNA提?。?、盡量選取新鮮的組織，如果不是新鮮的（較好在三個(gè)月之內(nèi)-80℃冰箱或者在液氮中凍存的。在剪取組織時(shí)，不要拿到室溫直接剪取，一定要放到冰盒上，盡量避免反復(fù)凍融。2、用干凈的剪刀鑷子剪取一小塊組織，剪取樣本時(shí)盡量剪組織中心的部位，或者先將大塊的組織先從中間切開，然后再在新鮮切口的位置剪取樣本。取下的組織要充分的剪碎，將剪碎的組織放到無RNA酶的EP管中，加入裂解液，剪碎的組織要充分接觸裂解液，準(zhǔn)備勻漿。3、正常組織選取綠豆粒大?。?0~60mg）的組織進(jìn)行勻漿，如果組織中含有大量的蛋白、脂肪或者是緊密的纖維組織比如肝臟等，適當(dāng)增減剪取組織的量（可選10~20mg）。4、如果提取的是魚肌肉，蝦肉，海蜇等含水分較多的組織時(shí)則應(yīng)當(dāng)適當(dāng)提高樣本量用量（推薦100~200mg）。5、條件允許的情況下，動(dòng)物組織使用高通道組織勻漿機(jī)勻漿后即可直接進(jìn)行提取步驟，如沒有該設(shè)備。6、較后提取后得到的RNA一定要立即放到冰盒上，以減少RNA的降解。昆明RNA提取試劑哪里買與DNA不同，RNA一般為單鏈長(zhǎng)分子，不形成雙螺旋結(jié)構(gòu)。

RNA的提取：眾所周知，Trizol是一種RNA提取試劑，內(nèi)含異硫氰酸胍和酚等物質(zhì)，能迅速破碎細(xì)胞和溶解細(xì)胞中的其他成分，壓制細(xì)胞釋放出核酸酶，維持細(xì)胞中RNA的穩(wěn)定性，我們可以在反應(yīng)物中加入Trizol后搖勻，在加入氯仿離心，這樣的話我們的RNA就進(jìn)入了水相中，再用異丙醇沉淀水相中的RNA，即可達(dá)到提取總RNA的目的了。首先我們需要稱取一定量的預(yù)處理好的廢酵母配10%左右的酵母溶液,在一定溫度下,加入一定濃度的氯化鈉,之后加入NaOH溶液調(diào)節(jié)反應(yīng)的pH,攪拌抽提一定時(shí)間后,離心分離上清液,調(diào)節(jié)pH至等電點(diǎn),經(jīng)酒精沉淀獲得核糖核酸,用水定容至100mL取1m適當(dāng)稀釋,調(diào)pH7.0,這樣的話RNA就出現(xiàn)了，分別測(cè)定吸光值A(chǔ)260和A280并計(jì)算A260/A280，就可以測(cè)定RNA的提取率了。當(dāng)然啦，我們還可以進(jìn)行深入研究，如測(cè)定Nacl的濃度，PH的大小，以及抽提時(shí)間對(duì)RNA提取率的影響啦。

RNA穩(wěn)定方法：1.在裂解緩沖液中立即溶解，使RNase失活。然后樣品可以立即處理或冷凍保存。2.浸泡在穩(wěn)定試劑中(如DNA/RNAShield)，使核酸酶失活，并在環(huán)境溫度下長(zhǎng)時(shí)間保護(hù)核酸。這對(duì)正在實(shí)地收集樣本或處理珍貴的病人樣本(例如組織活檢、全血等)的研究人員特別有幫助。確保樣品完全溶解：在RNA提取過程中，較大限度地提高RNA產(chǎn)量和質(zhì)量的較佳方法是保證樣品的完全裂解。然而，并不是所有的樣本都對(duì)相同的裂解方案敏感。例如，血細(xì)胞(如淋巴細(xì)胞、PBMCs等)和微生物細(xì)胞往往更難以有效地溶解。光光添加基于洗滌劑的裂解緩沖液可能并不總是足夠的。為了提高裂解效果，可以將裂解緩沖液與機(jī)械裂解步驟(研磨珠破碎)匹配，或者在裂解液上游加入酶裂解步驟(如蛋白酶K、溶菌酶等)。總RNA提取試劑：自備新開封或?qū)ｉT氯仿，異丙醇，75%乙醇，DEPC處理水。

RNA充當(dāng)遺傳物質(zhì)：其實(shí)RNA并不是只能干這些臟活累活，實(shí)際上，它也是可以充當(dāng)遺傳物質(zhì)的。病菌的遺傳物質(zhì)大多都是RNA，比如，這次的病菌的遺傳物質(zhì)就是RNA。不過，如今具有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的生物，它們的遺傳物質(zhì)基本上都是DNA。而科學(xué)家認(rèn)為，其實(shí)較早的生物，其實(shí)都是以RNA作為遺傳物質(zhì)的。這個(gè)假說也被叫做RNA世界假說。其實(shí)這個(gè)也很好理解，我們都知道RNA和DNA都有堿基，而且就是利用的堿基互補(bǔ)原則來完成任務(wù)的。DNA要完成生命活動(dòng)就指導(dǎo)RNA。因此，只要RNA能夠完成類似于DNA的自我復(fù)制，那么就可以作為遺傳物質(zhì)。RNA提取試劑注意事項(xiàng)：所有離心管，泵頭及相關(guān)溶液都必須無RNA酶污染。唐山正規(guī)RNA提取試劑

總RNA的產(chǎn)量可達(dá)30μg。產(chǎn)量可能因樣品類型而異。蕪湖太原RNA提取試劑

RNA提取試劑TRIpure是基于世界上使用較普遍的異硫氰酸胍/酚法研制而成的總RNA抽提試劑。在破碎和溶解細(xì)胞時(shí)能保持RNA的完整性。無論是人、動(dòng)物、植物還是細(xì)菌組織，該方法對(duì)少量的組織(50-100mg)和細(xì)胞(5×106)以及大量的組織(≥1g)和細(xì)胞(>107)均有較好的分離效果。TRIpure試劑操作上的簡(jiǎn)單性允許同時(shí)處理多個(gè)樣品，所有的操作可以在一小時(shí)內(nèi)完成。TRIpure抽提的總RNA能夠避免DNA和蛋白的污染，故而能夠作RNA印跡分析、斑點(diǎn)雜交、poly(A)+選擇、體外翻譯、RNA酶保護(hù)分析和分子克隆等。和進(jìn)口品牌實(shí)驗(yàn)對(duì)照顯示，公司的產(chǎn)品質(zhì)量已經(jīng)達(dá)到甚至超過了進(jìn)口產(chǎn)品的質(zhì)量蕪湖太原RNA提取試劑

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