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粘液染色法:粘液一般有以下幾點(diǎn)特性:(1)對鹽基性染料有親合力,因此在HE染色中、切片上的粘液呈污穢藍(lán)色。(2)對某種鹽基性人工合成染料如硫堇或甲苯胺藍(lán)有異染性。(3)遇醋酸發(fā)生沉淀,胃粘蛋白則除外。(4)溶于弱堿溶液。常用的粘液染色有以下幾種:1、P.A.S染色法:操作方法同前,結(jié)果;中性粘液性物質(zhì),某些酸性粘液物質(zhì)呈紅色,核呈藍(lán)色。2、AB/P.A.S染色法:該種方法的特點(diǎn)是能同時(shí)顯示出酸性和中性粘液物質(zhì)。操作方法:(1)切片常規(guī)脫蠟入水。(2)3%醋酸液洗2分鐘,入1%阿利新蘭醋酸液(PH2.5)10-20分鐘。(3)蒸餾水洗。(4)按P.A.S染色程序。(5)蘇木素淡染2-3分鐘,水洗。(6)常規(guī)脫水、封片。通過顯微鏡對組織內(nèi)的生物化學(xué)成分進(jìn)行定性、定位、定量研究。提供糖原染色試劑盒直銷價(jià)
特殊染色方法選擇應(yīng)遵循:1、特異性高、傳統(tǒng)或經(jīng)典的染色方法;特異、傳統(tǒng)/經(jīng)典的一些染色法在特殊染色方法的選擇中往往作為選擇。如顯示淀粉樣物質(zhì)。剛果紅染色作為經(jīng)典的方法,比天狼星紅、甲基紫等其他方法都要實(shí)用。淀粉樣物質(zhì)(剛果紅及天狼星紅染色)。2、染色流程相對簡便、染液易配制的染色方法;選擇染色流程簡便的方法,無論對于量較多的整批次染色,還是較少量的染色均能夠節(jié)省時(shí)間、更為便捷。選擇染液易配制的方法,對自配染液(尤其是保存較短的染液)是較為重要的選擇,不容易造成因染液配制問題而影響染色結(jié)果。如顯示彈性纖維。醛品紅染色法無論是從染色流程,還是染液配制都要比鐵蘇木精、間苯二酚堿性品紅等染色方法要簡單方便、省時(shí),同時(shí)陽性著染對比度也很明顯。提供糖原染色試劑盒直銷價(jià)操作簡單方便,1h內(nèi)即可完成反應(yīng)。
糖原染色是病理學(xué)中常規(guī)的染色方法之一,McManus在1946年較先使用高碘酸-雪夫技術(shù)顯示黏蛋白,該法常用來顯示糖原和其他多糖,該染色試劑盒不僅能夠顯示糖原,還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì)以及軟骨、垂體、霉菌、色素、淀粉樣物質(zhì)、基底膜等。過碘酸(又稱高碘酸)是一種強(qiáng)氧化劑,它能氧化糖類及有關(guān)物質(zhì)中的1,2-乙二醇基,使之變?yōu)槎┎籗chiff試劑能結(jié)合成一種品紅化合物,產(chǎn)生紫紅色。由于高碘酸還可氧化細(xì)胞內(nèi)其他物質(zhì),使用時(shí)應(yīng)注意選擇好高碘酸濃度和氧化時(shí)間,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于過氧化,這是很關(guān)鍵的步驟。PAS技術(shù)是很少可檢測不同種類的黏液物質(zhì)(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法,但PAS技術(shù)卻不能區(qū)別黏蛋白和糖原。
糖原染色的參考值及臨床意義:1.慢性淋巴細(xì)胞白血病、淋巴肉瘤等惡性淋巴細(xì)胞增生性疾病,其淋巴細(xì)胞的PSA染色積分值增高;等淋巴細(xì)胞良性增生時(shí),淋巴細(xì)胞積分值正常。醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理故該試驗(yàn)可用于鑒別良性與惡性淋巴細(xì)胞增生性疾病。2.紅白血病時(shí)幼紅細(xì)胞的PAS染色呈強(qiáng)陽性反應(yīng),積分值增高;溶血性貧血及巨幼細(xì)胞性貧血時(shí),幼紅細(xì)胞的PAS染色積分值在正常范圍內(nèi),故該試驗(yàn)也可用于紅白血病的診斷及鑒別幼紅細(xì)胞增多的性質(zhì)。3.急性粒細(xì)胞白血病時(shí),原始及幼稚粒細(xì)胞PAS染色常呈陰性反應(yīng);急性淋巴細(xì)胞白血病時(shí),原始及幼稚淋巴細(xì)胞常呈陽性反應(yīng);急性單核細(xì)胞白血病時(shí),原始及幼稚單核細(xì)胞多呈強(qiáng)陽性反應(yīng)。故PAS染色有助于三種急性白血病類型的鑒別。如用無水酒精作糖原的固定劑,有它的弊病。
糖原染色試劑盒。含乙二醇基的多糖經(jīng)過碘酸氧化,產(chǎn)生醛基,與雪夫(Schiff)試劑中無色品紅結(jié)合,形成紫紅色沉淀物定位于含糖原的胞漿中。該反應(yīng)稱為碘酸-雪夫(PAS)反應(yīng)。(1)雪夫液配制:堿性品紅1g溶于200ml沸水中,冷卻60℃時(shí)過濾,加1mmol/L鹽酸20ml,再冷卻至25℃左右,加偏重亞硫酸鈉(Na2S2O5)2g,混合后放棕色瓶中,置暗處24h,無色即可放冰箱中保存,呈微紅色,則加活性炭1~2g,吸附過濾使成無色液體,放冰箱中保存。若溶液變紅,即不能再用。(2)10g/L過碘酸水溶液:過碘酸(HIO4·2H2O)1g,加蒸餾水至10ml。巨幼紅細(xì)胞貧血、溶血性貧血、再障的幼紅細(xì)胞PAS染色為陰性。提供糖原染色試劑盒直銷價(jià)
可以選用真空滲入法來幫助底物和酶滲入細(xì)胞。提供糖原染色試劑盒直銷價(jià)
注意事項(xiàng):染色時(shí):①染色時(shí)必須嚴(yán)格按照染色操作說明書進(jìn)行染色。②在染色過程中,前一個(gè)染液浸染完成后,在進(jìn)行下一個(gè)染液的步驟之前,必須徹底充分水洗,使前一個(gè)染液沖洗干凈后再進(jìn)行下一步驟。③每次滴加染液前,務(wù)必吸干組織上多余的水分,避免多余的水把染液稀釋了,造成染色不佳。④在滴加染液時(shí),務(wù)必使染液完全覆蓋組織,但不能溢出圈外,避免浪費(fèi)試劑。在染色時(shí),用有色鉛筆在組織周圍劃一個(gè)圈,這樣在滴加染液時(shí)就不會(huì)使染液溢出。提供糖原染色試劑盒直銷價(jià)