BETA-SSA瓊脂基礎

動物細胞培養(yǎng)必需的溶液，平衡鹽水（BSS）：Hanks 液和Earle液是常用的BSS基礎溶液。PH調整液：3.7%、5.6%、7.4%的NaHCO3溶液、HEPES溶液（二羥乙基哌嗪乙烷磺酸）細胞消化液:胰蛋白酶溶液、EDTA溶液、膠原酶溶液。1)青、鏈霉素，每毫升培養(yǎng)液含100U青霉素和100ug鏈霉素。2)卡那霉素：終濃度為50ug/ml培養(yǎng)液。3）制霉菌素：濃度25U/ml，小瓶分裝，每瓶一次用完。常用的動物血清主要有牛血清和馬血清。牛血清分為胎牛血清和犢牛血清，前者來源少，價格高；后者要求剛產下尚未哺乳的小牛，因為哺乳后的小牛血清中可能含有更復雜的成分。血清中已知的成分主要有蛋白質、氨基酸、葡萄糖等。蛋白質主要是白蛋白和球蛋白。在有些情況下，培養(yǎng)基還需要進行一些化學處理。BETA-SSA瓊脂基礎

培養(yǎng)基分類有哪些？營養(yǎng)缺陷型：野生型菌株經過人工誘變或者自然突變失去合成某種營養(yǎng)（氨基酸，維生素，核酸等）的能力，只有在基本培養(yǎng)基中補充所缺乏的營養(yǎng)因子才能生長，稱為營養(yǎng)缺陷型（auxotroph）。營養(yǎng)缺陷型是一種生化突變株，它的出現(xiàn)是由基因突變引起的。遺傳信息的載體是一系列為酶蛋白編碼的核酸系列，如果核酸系列中某堿基發(fā)生突變，由該基因所控制的酶合成受阻，該菌株也因此不能合成某種營養(yǎng)因子，使正常代謝失去平衡。改良MSRV培養(yǎng)基培養(yǎng)基可以分為有機培養(yǎng)基和無機培養(yǎng)基兩類。

培養(yǎng)基，是指供給微生物、植物或動物（或組織）生長繁殖的，由不同營養(yǎng)物質組合配制而成的營養(yǎng)基質。一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽（包括微量元素）、維生素和水等幾大類物質。培養(yǎng)基既是提供細胞營養(yǎng)和促使細胞增殖的基礎物質，也是細胞生長和繁殖的生存環(huán)境。培養(yǎng)基種類很多，根據配制原料的來源可分為自然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基；根據物理狀態(tài)可分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基；根據培養(yǎng)功能可分為基礎培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、加富培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基等；根據使用范圍可分為細菌培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基、酵母菌培養(yǎng)基等。培養(yǎng)基配成后一般需測試并調節(jié)pH，還須進行滅菌，通常有高溫滅菌和過濾滅菌。培養(yǎng)基由于富含營養(yǎng)物質，易被污染或變質。配好后不宜久置，現(xiàn)配現(xiàn)用。

培養(yǎng)細胞時應使用5%還是10%CO2，或者根本沒有影響？一般培養(yǎng)基中大都使用 HCO3-/CO32-/H+ 作為pH的緩沖系統(tǒng)，而培養(yǎng)基中NaHCO3的含量將決定細胞培養(yǎng)時應使用的CO2濃度。當培養(yǎng)基中 NaHCO3含量為每公升3.7g時，細胞培養(yǎng)時應使用10% CO2；當培養(yǎng)基中NaHCO3 為每公升1.5g時，則應使用5%CO2培養(yǎng)細胞。NaHCO3的作用：培養(yǎng)基中使用了 NaHCO3-CO2 緩沖系統(tǒng)，并采用開放培養(yǎng)，使細胞代謝產生的CO2及時溢出培養(yǎng)瓶，再通過穩(wěn)定調節(jié)溫箱中CO2濃度（5%） ，與培養(yǎng)基中的NaHCO3處于平衡狀態(tài)，從而調節(jié)培養(yǎng)基的PH值。NEAA：非必須氨基酸，NEAA（非必需氨基酸） 是含幾種非必需氨基酸的合劑，添加到的原培養(yǎng)基不同，NEAA 也有不同的種類，比如添加至MEM的NEAA，含L-Alanine、L-Asparagine、L-Aspartic Acid、 L-Glutamic Acid、L-Glycine、L-Proline、L-Serine。人工合成基因可以在特定的培養(yǎng)基中得到表達，需要選擇含有適當營養(yǎng)物質的培養(yǎng)基。

天然培養(yǎng)基是指來自動物體液或利用組織分離提取的一類培養(yǎng)基，如血漿、血清、、雞胚浸出液等。組織培養(yǎng)技術建立早期，體外培養(yǎng)細胞都是利用天然培養(yǎng)基。但是由于天然培養(yǎng)基制作過程復雜、批間差異大，因此逐漸為合成培養(yǎng)基所替代。普遍使用的天然培養(yǎng)基是血清，另外各種組織提取液、促進細胞貼壁的膠原類物質在培養(yǎng)某些特殊細胞也是必不可少。血清質量高低取決于兩方面因素：一是取材對象，二是取材過程。用于取材的動物應健康無病并且在指定的出生天數之內，取材過程應嚴格按照操作規(guī)程執(zhí)行，制備出的血清要經過嚴格的質量鑒定。培養(yǎng)基是一種含有必需營養(yǎng)物質的生長介質，用于細胞、細菌的培養(yǎng)和繁殖。麥康凱瓊脂培養(yǎng)基(MacC) ChP

半固態(tài)培養(yǎng)基是一種介于液態(tài)培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基之間的混合形式，常用于篩選微生物菌株。BETA-SSA瓊脂基礎

鑒別培養(yǎng)基(differential media) 在培養(yǎng)基中加入某一反應底物和指示劑，以區(qū)別某些微生物的特性從而鑒別之。又分一般鑒別培養(yǎng)基和選擇性鑒別培養(yǎng)基。只用于區(qū)別不同微生物種類的培養(yǎng)基稱為-般鑒別培養(yǎng)基，此類培養(yǎng)基中一般不加抑菌劑而只含指示劑，如克氏雙糖鐵培養(yǎng)基，含有葡萄糖及乳糖，以酚紅作為指示劑，觀察培養(yǎng)基底層與斜面的顏色變化判定細菌對葡萄糖和乳糖的發(fā)酵能力，加人檸檬酸鐵銨，培養(yǎng)后觀察是否產生黑色沉著以判定細菌是否分解蛋白胨中的含硫氨基酸而產生硫化氫；又如伊紅-美藍瓊脂，含有乳糖(反應底物)、伊紅-美藍(指示劑)用以鑒別大腸埃希菌、腸道病原菌和其他雜菌。一般鑒別培養(yǎng)基的特點是在配方中都含有指示劑，并可用于區(qū)別不同種類的微生物，有些鑒別培養(yǎng)基也可同時作為細菌的特殊需要用來分離培養(yǎng)某些細菌，如胰酪胨大豆瓊脂和巧克力色血瓊脂。BETA-SSA瓊脂基礎

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