腦梗MCAO模型成功的評判方法 生物化學(xué)指標的檢測:在實驗過程中,檢測血清中C反應(yīng)蛋白(CRP)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)等生物化學(xué)指標的變化。這些指標可以反映炎癥反應(yīng)和缺血損傷的程度,有助于評估模型的成功。 病理學(xué)檢查:實驗結(jié)束后,對實驗動物的大腦進行病理學(xué)檢查。觀察大腦皮質(zhì)和海馬區(qū)的細胞形態(tài)、排列情況,評估神經(jīng)細胞的損傷程度。同時,通過免疫組化染色法檢測神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)的表達,以評估神經(jīng)元損傷的程度。 行為學(xué)評估:在實驗過程中,對實驗動物進行行為學(xué)評估,如Morris水迷宮實驗、步態(tài)分析等。通過比較不同處理組的行為學(xué)表現(xiàn),評估模型的成功。 綜上所述,評判腦梗MCAO模型成功的標準包括腦梗死面積、神經(jīng)功能缺損評分、梗死血管、生物化學(xué)指標、病理學(xué)檢查和行為學(xué)評估等方面。只有當(dāng)這些指標均符合預(yù)期結(jié)果時,才能認為模型制備成功。線栓法是*常用的腦局部缺血再灌注損傷模型制備方法,此方法不需要開顱且不需要呼吸機。北京動物實驗?zāi)X梗MCAO模型
迄今為止,缺血性腦卒中模型覆蓋各種小型動物(小鼠,大鼠等)和較大型動物(兔、犬、豬、猴等),并應(yīng)用于卒中治*藥物的臨床前藥理藥效研究。然而,自1970年代以來,大量在動物模型上得到驗證的受試藥物均未能在人體臨床試驗中獲得理想的治*效果,可能原因包括:1)以往相對簡單的動物模型不能準確模擬人類卒中的病理生理過程;2)臨床前動物實驗的藥效評價方法尚難以成功轉(zhuǎn)化到復(fù)雜的人體臨床試驗標準。2009年國際公認的“腦卒中治*學(xué)術(shù)工業(yè)圓桌會議”(Stroke Therapy Academic industry Roundtable,STAIR)發(fā)布了臨床前缺血性腦卒中藥物研發(fā)準則,提出提高臨床前藥理藥效研究質(zhì)量的具體要求。近年來隨著更深入的基礎(chǔ)研究發(fā)現(xiàn),更多符合人類發(fā)病機理和病理生理過程的缺血性腦卒中動物模型已被開發(fā)。北京定制腦梗MCAO模型市場價格在實驗過程中,應(yīng)建立嚴格的質(zhì)量控制體系,包括實驗操作規(guī)范、數(shù)據(jù)記錄和分析等環(huán)節(jié)。
缺血性腦卒中/腦梗對人類健康構(gòu)成嚴重威脅,是全國和全球范圍內(nèi)死亡和身體傷害的第三大原因。中風(fēng)的高發(fā)病率、殘疾率和死亡率給家庭和社會帶來了沉重的負擔(dān)。為了有效地選擇治*缺血性中風(fēng)的藥物,提高治*率和康復(fù)率,建立接近人類梗死的大腦中動脈閉塞(MCAO)再灌注模型一直是研究人員面臨的挑戰(zhàn),而使用穩(wěn)定的動物模型是研究此類疾病的*重要工具之一。本文從實驗動物的選擇、線栓材料的選擇、線栓的制作和加工、外部環(huán)境和手術(shù)的影響等方面介紹了研究SD大鼠大腦缺血再灌注實驗動物模型制作的全部過程,為科研工作者提供長期穩(wěn)定的SD大鼠大腦缺血再灌注模型,并*終提高實驗動物模型的成功率和可行性。
局灶性缺血模型/線栓法引起的大腦中動脈栓塞(Middle Cerebral Artery Occlusion,MCAO)由于大(?。┦竽X血管解剖結(jié)構(gòu)與人類相似,大腦中動脈也是臨床缺血性卒中的高發(fā)部位,同時,采用線栓法也便于觀察缺血和再灌注、永jiu(持續(xù))和短暫性損傷等多種狀態(tài),在評價藥物量效關(guān)系和確認治*時間窗等方面有一定優(yōu)勢,因此,MCAO是目前*廣為接受一種藥效模型。將尼龍線由大(小)鼠的頸外動脈(ECA)插入,經(jīng)頸內(nèi)動脈(ECA)阻斷一側(cè)MCA起始端,導(dǎo)致一側(cè)(局灶性)腦缺血。術(shù)后再使用激光散斑血流儀或多普勒血流儀對造模效果進行驗證和確認。手術(shù)有一定技術(shù)難度,血管結(jié)扎不緊或結(jié)扎線脫落,會出血導(dǎo)致病理生理狀態(tài)改變或增加死亡。
腦梗MCAO模型成功的評判方法主要包括以下幾個方面: 1.腦梗死面積的評估:通過TTC(2%,17分鐘)染色法對腦梗死面積進行分析和量化。在染色后,利用ImageJ圖像分析軟件對切片進行處理,從而得到腦梗死面積的數(shù)據(jù)。實驗過程中,通過比較不同處理組之間的腦梗死面積,可以評估模型的成功率。 2.神經(jīng)功能缺損評分:參照Zea-Longa評分標準,對實驗動物在再灌注期內(nèi)的神經(jīng)功能進行評估。評分越高,表示神經(jīng)功能缺損越嚴重。通過對不同處理組的神經(jīng)功能缺損評分進行比較,可以進一步驗證模型的成功。 3.梗死血管的觀察:通過激光多普勒血流儀檢測相對腦血流動脈減少情況,評估梗死血管的狹窄程度。同時,觀察血管造影劑在梗死區(qū)域的分布情況,以判斷血管阻塞的效果。采用Longa等的5級4分法標準對模型動物進行評價。上海國內(nèi)腦梗MCAO模型手術(shù)造模
實驗外包團隊他們可以幫助科研人員制定實驗方案、優(yōu)化實驗流程、提高實驗效率等。北京動物實驗?zāi)X梗MCAO模型
局灶性缺血模型/線栓法引起的大腦中動脈栓塞(Middle Cerebral Artery Occlusion,MCAO)由于大(?。┦竽X血管解剖結(jié)構(gòu)與人類相似,大腦中動脈也是臨床缺血性卒中的高發(fā)部位,同時,采用線栓法也便于觀察缺血和再灌注、永jiu(持續(xù))和短暫性損傷等多種狀態(tài),在評價藥物量效關(guān)系和確認治*時間窗等方面有一定優(yōu)勢,因此,MCAO是目前*廣為接受一種藥效模型。神經(jīng)元尼氏體與細胞核呈藍紫色,背景呈淺藍色。結(jié)果顯示:假手術(shù)組海馬 CA1 區(qū)神經(jīng)元排列規(guī)整,神經(jīng)元胞體及樹突內(nèi)尼氏體豐富;實驗組神經(jīng)元排列紊亂,并伴有細胞水腫和壞死發(fā)生,尼氏體染色較淺,模糊不清;陽性*組神經(jīng)元尼氏體排列較為規(guī)整,偶見神經(jīng)細胞水腫,和溶解。北京動物實驗?zāi)X梗MCAO模型