分接觸和利用培養(yǎng)基中的養(yǎng)料,適于作生理等研究,由于發(fā)酵率高,操作、方便,也常用于發(fā)酵工業(yè)。(3)半固體培養(yǎng)基。是在液體培養(yǎng)基中加入少量凝固劑而呈半固體狀態(tài)。固體培養(yǎng)基的制作步驟:1、首先我們要準(zhǔn)備好一個(gè)裝有1000ml的燒杯,然后在準(zhǔn)備好的杯中在放入500ml的蒸餾水,在將牛肉膏和蛋白胨、氯化鈉這些都溶解在水中。2、其次我們?cè)谡{(diào)節(jié)PH值,調(diào)節(jié)時(shí)需要百分之10的氫氧化鈉溶液,將PH值調(diào)到7.2,在此也要定容到1000ml,較后在將這些液體都分別放入10個(gè)錐形瓶內(nèi),每一瓶都裝100ml。固體培養(yǎng)基,一類配制成的固體狀態(tài)的基質(zhì)。黑龍江培養(yǎng)基制備儀哪家好
培養(yǎng)基滅菌方法有哪五種類型:1、輻射滅菌原理方法:輻射滅菌原理:是用高能電磁輻射和細(xì)菌核酸的光化學(xué)反應(yīng)引起細(xì)菌死亡。常用的是紫外線,X射線和伽馬射線。主要用于室內(nèi)空氣和器皿的表面消毒。2、干熱滅菌原理方法:干熱滅菌原理:是采用高溫氧化微生物,使蛋白質(zhì)變性并濃縮電解質(zhì)以殺死微生物。3、化藥滅菌原理方法,化藥滅菌原理:使用化藥與微生物細(xì)胞中的成分發(fā)生反應(yīng),從而使蛋白質(zhì)變性酶失活。4、過濾滅菌原理方法:過濾滅菌原理:是使用不能滲透的微生物濾膜進(jìn)行滅菌。使用方法是使用0.01-0.45毫米的細(xì)孔濾膜對(duì)壓縮空氣,酶溶液和其他對(duì)熱不穩(wěn)定的復(fù)合溶液進(jìn)行滅菌。5、濕熱滅菌原理方法:在工業(yè)生產(chǎn)中,用于滅菌對(duì)于培養(yǎng)基,管道和設(shè)備,通常將蒸汽加熱到一定溫度并保持一段時(shí)間,這稱為濕熱滅菌。濕熱滅菌原理:是直接用蒸汽進(jìn)行滅菌。蒸汽冷凝后會(huì)釋放出大量潛熱。蒸汽具有強(qiáng)大的穿透力,破壞細(xì)菌蛋白質(zhì)和核酸的化學(xué)鍵,使酶失活并殺死由于代謝紊亂引起的微生物。河南培養(yǎng)基制備儀品牌牛肉浸液中加入適量的蛋白胨、氯化鈉、磷酸鹽,調(diào)節(jié)pH7.2~7.6,經(jīng)滅菌處理后,即為基礎(chǔ)液體培養(yǎng)基。
消毒與滅菌的區(qū)別:消毒指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法單殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。消毒方法常用煮沸消毒法,巴氏消毒法(對(duì)于一些不耐高溫的液體)還有化學(xué)藥劑(如酒精、氯氣、石炭酸等)消毒、紫外線消毒。滅菌則是指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽孢和孢子。滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。滅菌方法:①接種環(huán)、接種針、試管口等使用灼燒滅菌法;②玻璃器皿、金屬用具等使用干熱滅菌法,所用器械是干熱滅菌箱;③培養(yǎng)基、無菌水等使用高壓蒸汽滅菌法,所用器械是高壓蒸汽滅菌鍋。④表面滅菌和空氣滅菌等使用紫外線滅菌法,所用器械是紫外燈。
微生物發(fā)酵培養(yǎng)基配制注意事項(xiàng):①養(yǎng)分濃度和配比合適:微生物只有在培養(yǎng)基中養(yǎng)分濃度合適的情況下才能生長良好是合適的。當(dāng)養(yǎng)分濃度過低時(shí),不能滿足微生物正常生長的需要。②微生物培養(yǎng)基pH條件控制:培養(yǎng)基的pH必須控制在一定范圍內(nèi),以滿足不同種類微生物的生長繁殖或產(chǎn)生代謝物。各種微生物生長繁殖或代謝產(chǎn)物產(chǎn)生的較佳pH條件不同。通常細(xì)菌和放線菌適合在7~7.5pH范圍內(nèi)生長,酵母菌和霉菌一般在4.5~6pH范圍內(nèi)生長。③微生物培養(yǎng)基原料來源選擇:培養(yǎng)基配制時(shí),應(yīng)盡可能使用低廉易得的原料作為培養(yǎng)基成分。尤其在發(fā)酵行業(yè),培養(yǎng)基用量大,使用成本較低原料實(shí)現(xiàn)產(chǎn)品附加價(jià)值。例如在微生物單細(xì)胞蛋白的工業(yè)化生產(chǎn)過程中,制糖業(yè)含蔗糖廢液、乳業(yè)含乳糖廢液、大豆廢液工業(yè)和黑色廢物、造紙工業(yè)中含有戊糖和己糖的亞硫酸鹽紙漿等經(jīng)常被作為培養(yǎng)基原料使用。④成品培養(yǎng)基滅菌處理、為了獲得微生物的純培養(yǎng)物,必須避免被細(xì)菌污染,所以對(duì)使用的設(shè)備和工作場所進(jìn)行消毒和消毒。對(duì)于微生物培養(yǎng)基要進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌處理。在發(fā)酵工業(yè)中,培養(yǎng)基用量很大,利用低成本的原料更體現(xiàn)出其經(jīng)濟(jì)價(jià)值。
培養(yǎng)基防止污染應(yīng)該注意以下事項(xiàng):確認(rèn)工作細(xì)胞庫是否被污染,確認(rèn)毒種工作種子批是否被污染,確認(rèn)所用培養(yǎng)基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染,均可用細(xì)菌、病菌及支原體無菌試驗(yàn)來確認(rèn)并排除。同時(shí)要對(duì)無菌試驗(yàn)培養(yǎng)基的靈敏度進(jìn)行驗(yàn)證。實(shí)際生產(chǎn)中,可以從配制好的培養(yǎng)液中取少量加入營養(yǎng)瓊脂于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),48小時(shí)即可觀察有無污染。其它:高壓滅菌設(shè)備、過濾除菌設(shè)備均應(yīng)進(jìn)行驗(yàn)證,確保滅菌和除菌效果;前者應(yīng)在投產(chǎn)前及其后的每6個(gè)月進(jìn)行驗(yàn)證,后者應(yīng)在每次除菌前、后進(jìn)行驗(yàn)證工作(至少應(yīng)在除菌后進(jìn)行一次)。另外,應(yīng)將有毒區(qū)與無毒區(qū)嚴(yán)格分開,并有各自自立的空氣凈化系統(tǒng)及孵室,有毒區(qū)對(duì)無毒區(qū)應(yīng)保持相對(duì)負(fù)壓,防止病毒對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞(尤其是細(xì)胞庫)的污染。微生物只有在營養(yǎng)物質(zhì)濃度及其比例合適時(shí)才能良好生長。黑龍江培養(yǎng)基制備儀哪家好
培養(yǎng)基由于配制的原料不同,使用要求不同,而貯存保管方面也稍有不同。黑龍江培養(yǎng)基制備儀哪家好
配制好的培養(yǎng)基保存:滅菌以后培養(yǎng)基應(yīng)該迅速冷卻至所需溫度,避免長時(shí)間保存在滅菌鍋內(nèi),造成過度滅菌,影響培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分或選擇性效果。所配制的培養(yǎng)基的量,應(yīng)該是在較長保存期限內(nèi)正好使用完。含染料的培養(yǎng)基應(yīng)閉光保存;倒好的瓊脂平板如果配制的當(dāng)天未使用完,應(yīng)于冷藏保存,如果保存時(shí)間超過2天,應(yīng)將其放入密封的塑料袋中保存;配好的肉湯類培養(yǎng)基如果保存時(shí)間超過2個(gè)星期,應(yīng)將其放在帶有螺旋蓋的試管或其它密閉的試管或容器中防止蒸發(fā)。黑龍江培養(yǎng)基制備儀哪家好
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