微生物發(fā)酵培養(yǎng)基配制注意事項:①養(yǎng)分濃度和配比合適:微生物只有在培養(yǎng)基中養(yǎng)分濃度合適的情況下才能生長良好是合適的。當養(yǎng)分濃度過低時,不能滿足微生物正常生長的需要。②微生物培養(yǎng)基pH條件控制:培養(yǎng)基的pH必須控制在一定范圍內,以滿足不同種類微生物的生長繁殖或產生代謝物。各種微生物生長繁殖或代謝產物產生的較佳pH條件不同。通常細菌和放線菌適合在7~7.5pH范圍內生長,酵母菌和霉菌一般在4.5~6pH范圍內生長。③微生物培養(yǎng)基原料來源選擇:培養(yǎng)基配制時,應盡可能使用低廉易得的原料作為培養(yǎng)基成分。尤其在發(fā)酵行業(yè),培養(yǎng)基用量大,使用成本較低原料實現產品附加價值。例如在微生物單細胞蛋白的工業(yè)化生產過程中,制糖業(yè)含蔗糖廢液、乳業(yè)含乳糖廢液、大豆廢液工業(yè)和黑色廢物、造紙工業(yè)中含有戊糖和己糖的亞硫酸鹽紙漿等經常被作為培養(yǎng)基原料使用。④成品培養(yǎng)基滅菌處理、為了獲得微生物的純培養(yǎng)物,必須避免被細菌污染,所以對使用的設備和工作場所進行消毒和消毒。對于微生物培養(yǎng)基要進行嚴格的滅菌處理。固體培養(yǎng)基根據性質又分為固化培養(yǎng)基、非可逆性固化培養(yǎng)基、天然固態(tài)培養(yǎng)基、濾膜。黑龍江觸摸屏培養(yǎng)基制備儀
培養(yǎng)基的分裝:大批量配制時使用的自動分配器須經校準和確認。每次使用前后,均要對分配器的管道系統進行沖洗,在分裝無菌培養(yǎng)基前,則要采用無菌硅膠管。固體培養(yǎng)基一般分裝在250ml、500ml錐形瓶中,高壓滅菌后根據需要分裝平皿或試管。平皿:傾注平皿,應在無菌室中放置3—4h,如用塑料平皿須在35℃培養(yǎng)箱中倒置30—60min。讓水蒸汽自然蒸發(fā)。斜面:制備低層斜面分裝于試管,約占容積1/5,滅菌后趁熱斜放在細玻璃棒和木桿上,使成斜度,分裝使注意管口和瓶塞上勿沾有培養(yǎng)基,如沾有培養(yǎng)基應用布抹去,以避免污染。新疆瓊脂培養(yǎng)基制備儀培養(yǎng)基一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽(包括微量元素)以及維生素和水等。
培養(yǎng)基制備的基本方法:1.培養(yǎng)基配方的選定:同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此,除所用的是標準方法,應嚴格按其規(guī)定進行配制外.一般均應盡量收集有關資料.加以比較核對。2、培養(yǎng)基的制備記錄,每次制備培養(yǎng)基均應有記錄,包括培養(yǎng)推各稱,配方及其來源.和各種成份的牌號。較終pH值、消毒的溫度和時間制各的日期和制備者等,記錄應復制一份。3.培養(yǎng)基成分的稱取。培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯亂.較好一次完成,不要中斷。可將配方置于傍側,每稱完一種成分即在配方上做出記號,并將所需稱取的藥品一次取齊,置于左側,每種稱取完畢后,即移放于右側。5、培養(yǎng)塞pH的初步調整培養(yǎng)基各成分完全溶解后,應進行pH的初步調正。
干粉顆粒微生物培養(yǎng)基儲存條件:通常情況下,干粉培養(yǎng)基和顆粒培養(yǎng)基產品,在室溫干燥避光的儲存環(huán)境中,并注意密封存放,避免產品陽光直射,室內濕度與溫度太高,如不注意密封情況,顆粒粉末在會有結塊和受潮的現象,所以使用后一定要擰緊蓋子,注意防潮。關于儲存時長,只要嚴格按照培養(yǎng)基廠家的標簽要求存放,未開封的培養(yǎng)基可保存兩至三年。我們平常使用時,干粉沒必要放在冰箱里,但如果在制備當天打開培養(yǎng)基后沒有用完,建議將其存放在冰箱中,減少受潮問題但不要放置太多天??傊疀]有開封的干粉、顆粒培養(yǎng)基存放在陰涼干燥處即可。培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質的濃度過大,會使?jié)B透壓過高,使細胞發(fā)生質壁分離而抑制微生物生長。
培養(yǎng)基pH值不在標準范圍內的問題:出現此類情況有很多原因,生物大致分為①廠家質量:出廠時pH不穩(wěn)定。②滅菌問題:是蒸壓過高或殺菌時間過長,導致葡萄糖焦化,因此,pH值降低。③存放周期:保存時間超過保質期或結塊水的質量有問題。④水質問題:采用去離子水/蒸餾水/純凈水等,不要采用礦泉水和自來水。⑤存儲溫度:儲存溫度過高。⑥光線直射等六種原因,可逐一檢查排除解決問題。這樣的培養(yǎng)基稱之為鑒別培養(yǎng)基。例如用以檢查飲水和乳品中是否含有腸道致病菌的伊紅美藍培養(yǎng)基就是一種常用的鑒別性培養(yǎng)基。牛肉浸液中加入適量的蛋白胨、氯化鈉、磷酸鹽,調節(jié)pH7.2~7.6,經滅菌處理后,即為基礎液體培養(yǎng)基。重慶培養(yǎng)基制備儀售后
培養(yǎng)基由于配制的原料不同,使用要求不同,而貯存保管方面也稍有不同。黑龍江觸摸屏培養(yǎng)基制備儀
培養(yǎng)基的脫氣:必要時,在使用前將養(yǎng)基放到沸水浴或蒸汽浴中加熱15min,加熱時松開容器蓋子;加熱后蓋緊蓋子,并迅速冷卻至使用溫度。3.添加成分的加入:對熱不穩(wěn)定的添加成分應在培養(yǎng)基冷卻至47℃~50℃時加入,滅菌的添加成分加入前應冷卻至室溫,避免冷的液體會造成瓊脂凝膠或形成片狀物。4.培養(yǎng)基的棄置:所有污染和未使用的培養(yǎng)基的棄置應采用安全的方式,并符合相關法律法規(guī)的規(guī)定。每批培養(yǎng)基應另外分裝20ml培養(yǎng)基于一小玻璃瓶中,隨該批培養(yǎng)基同時滅菌,以為測定該批培養(yǎng)基較終pH之用。黑龍江觸摸屏培養(yǎng)基制備儀
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