培養(yǎng)基的滅菌:一般培養(yǎng)基可采用121℃高壓蒸汽滅菌15分鐘的方法。在各種培養(yǎng)基制備方法中,如無特殊規(guī)定,即可用此法滅菌。某些畏熱成分,如糖類,應(yīng)另行配成20%如或更高的濃液,以過濾或間歇滅菌法消毒,以后再用無菌操作技術(shù)、定量加于培養(yǎng)基。明膠培養(yǎng)基亦應(yīng)用較低溫度滅菌。血液、體液和物品等則應(yīng)從無菌操作技術(shù)抽取和加入于經(jīng)冷卻約50℃左右的培養(yǎng)基中。瓊脂斜面培養(yǎng)基應(yīng)在滅菌后立即取出、待冷至55-60℃時,擺置成適當(dāng)斜面、待其自然凝固。制備培養(yǎng)基的操作要點(diǎn):成分基本上溶于水,沒有明顯的固形物,。貴州大容量 培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基配置原則:滅菌處理,要獲得微生物純培養(yǎng),必須避免雜菌污染,因此對所用器材及工作場所進(jìn)行消毒與滅菌。對培養(yǎng)基而言,更是要進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌。對培養(yǎng)基一般采取高壓蒸汽滅菌,一般培養(yǎng)基用1.05kg/cm2,121.3℃條件下維持15-30min可達(dá)到滅菌目的。在高壓蒸汽滅菌過程中,長時間高溫會使某些不耐熱物質(zhì)遭到破壞,如使糖類物質(zhì)形成氨基糖、焦糖,因此含糖培養(yǎng)基常在0.56kg/cm2,112.6℃15-30分鐘進(jìn)行滅菌,某些對糖類要求較高的培養(yǎng)基,可先將糖進(jìn)行過濾除菌或間歇滅菌,再與其他已滅菌的成分混合;長時間高溫還會引起磷酸鹽、碳酸鹽與某些陽離子(特別是鈣、鎂、鐵離子)結(jié)合形成難溶性復(fù)合物而產(chǎn)生沉淀。云南瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器為了避免雜菌污染,獲得微生物純培養(yǎng)物,培養(yǎng)基必須及時嚴(yán)格滅菌。
培養(yǎng)基配制后一般都有沉渣或混濁出現(xiàn)醫(yī)學(xué),需過濾成清晰透明后方可使用,常用的過濾方法如下:1.液體培養(yǎng)基:液體培養(yǎng)基必須清晰,以便觀察細(xì)菌的生長情況,常用濾紙過濾,亦可在加熱前加入用水稀釋的雞蛋白(1000ml培養(yǎng)基用1個雞蛋白)在100℃加熱后保持60~70℃,40~60分鐘,使其不溶性物質(zhì)附于凝固的蛋白上而沉淀,然后再用虹吸法吸出上清液或以濾紙過濾。2.固體培養(yǎng)基:如系瓊脂培養(yǎng)基,于加熱融化后需趁熱以絨布或兩層紗布中夾脫脂棉過濾;亦可用自然沉淀法,即將瓊脂培養(yǎng)基盛人鋁鍋或廣口搪瓷容器內(nèi),以高壓(103.43kPa)蒸汽融化15分鐘后,靜置高壓鍋內(nèi)過夜,次日將瓊脂傾出,用刀將底部沉渣切去,再融化即可收清晰的瓊脂培養(yǎng)基。
全自動培養(yǎng)基制備分裝系統(tǒng):1.一鍵選擇培養(yǎng)皿類型;整合數(shù)據(jù)庫,預(yù)設(shè)培養(yǎng)皿尺寸選擇程序。2.全自動程序,無人值守;分裝過程無需人工干預(yù)。3.運(yùn)行過程順滑無聲;大程度的削減了噪音。4.鋁制表面光滑平坦;易于清潔,無孔隙和裂縫,以防培養(yǎng)基流進(jìn)去。5.兩個存儲器;存儲器高度可選;220或440個培養(yǎng)皿(高為16.5mm的培養(yǎng)皿)預(yù)裝培養(yǎng)皿方便;旋轉(zhuǎn)存儲器,可整個從Mediafill上取走,方便預(yù)裝培養(yǎng)皿。6.整合蠕動泵(主泵);*確分裝培養(yǎng)基。7.整合蠕動泵(附加劑泵);*確添加附加劑(可選)。8.一體化控制;主機(jī)和選配件(附加劑泵)可通過Mediafill觸摸屏一起控制。培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯亂,較好一次完成,不要中斷。
培養(yǎng)基的分裝:培養(yǎng)基的分裝,應(yīng)按使用的目的和要求,分裝于試管、燒瓶等適當(dāng)容器內(nèi)。分裝量不得超容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵,其外還須用防水紙包扎(現(xiàn)試管一般多有用螺旋蓋者)。分裝時好好能使用半自動或電動的定量分裝器。分裝瓊脂斜面培養(yǎng)基時,分裝量應(yīng)以能形成2/3底層和1/3斜面的量為洽當(dāng)。分裝容器應(yīng)預(yù)先清洗干凈并經(jīng)干烤消毒,以利于培養(yǎng)基的徹底滅菌。每批培養(yǎng)基應(yīng)另外分裝20ml培養(yǎng)基于一小玻璃瓶中,隨該批培養(yǎng)基同時滅菌,以為測定該批培養(yǎng)基好終pH之用。培養(yǎng)基制備器負(fù)載的壓力,有效地避免了培養(yǎng)基過溫失效和培養(yǎng)基中氣泡的產(chǎn)生??諝鈮嚎s機(jī)是內(nèi)置的。培養(yǎng)基制備器定制
低滲溶液則使細(xì)胞吸水膨脹易破裂,因此,配制培養(yǎng)基時要掌握營養(yǎng)物質(zhì)的濃度。貴州大容量 培養(yǎng)基制備器
含瓊脂的培養(yǎng)基有時在平板上不凝固或凝固不好問題:在此種情況下,建議對于需要高壓滅菌的培養(yǎng)基,倒入平板前先搖一搖。主要是瓊脂培養(yǎng)基的分子量比較大,在冷卻過程中容易沉淀到底,造成瓊脂不能均勻分布。對于無需高壓滅菌的培養(yǎng)基,不能直接煮沸溶解后倒入平板、需要重復(fù)三至五次煮沸溶解過程,因一次無法保證瓊脂完全溶解。微生物培養(yǎng)基成分中含有染料或指示劑;不同批次的粉狀培養(yǎng)基含水量不同。一般要求≤6。含水量越高,顏色越深;研磨時間越長,顏色越深等三個原因。貴州大容量 培養(yǎng)基制備器