常用培養(yǎng)基的制備及注意事項(xiàng)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私馀囵B(yǎng)基的配制原理;掌握配制培養(yǎng)基的一般方法和步驟;了解常見(jiàn)滅菌、清毒基本原理及方法;掌握干熱天菌、高壓蒸汽滅菌及過(guò)濾除菌的操作方法。二、實(shí)驗(yàn)原理培養(yǎng)基是人工按一定比例配制的供微生物生長(zhǎng)繁殖和合成代謝產(chǎn)物所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的混合物。培養(yǎng)基的原材料可分為碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因素和水。根據(jù)微生物的種類(lèi)和實(shí)驗(yàn)?zāi)康牟煌囵B(yǎng)基也有不同的種類(lèi)和配制方法。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是一種應(yīng)用較普遍和較普通的細(xì)菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基,有時(shí)又稱(chēng)為普通培養(yǎng)基。由于這種培養(yǎng)基中含有一般細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖所需要的較基本的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),所以可供微生物生長(zhǎng)繁殖之用。干熱天菌、高壓蒸汽滅菌方法主要是通過(guò)升溫使蛋白質(zhì)變性從而達(dá)到殺死微生物的效果。制備培養(yǎng)基的操作要點(diǎn):體培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分分布均勻。河北培養(yǎng)基制備器廠家
自動(dòng)培養(yǎng)基制備分裝器是一種用于農(nóng)學(xué)領(lǐng)域的分析儀器:可制備從1升到10升的培養(yǎng)基。高效電加熱器,方便腔體的清洗。自帶磁力攪拌裝置,每分鐘50-200轉(zhuǎn)可調(diào)。溫度控制范圍:70℃到122℃。微處理器控制溫度精度為0.1度,顯示溫度精度0.1度。機(jī)器有培養(yǎng)基滅菌模式、巧克力平板模式、水浴鍋模式及高壓鍋模式。具有壓力維持系統(tǒng)。分裝機(jī)很大一次性載裝量為540個(gè)皿,分裝體積1-99ml可選,分裝精度1%,分裝速度不低于900塊/小時(shí),分裝量不低于500毫升/分鐘。能自動(dòng)調(diào)整適應(yīng)公差范圍內(nèi)的平皿。分裝主機(jī)具有變徑功能。通過(guò)選配件可快速轉(zhuǎn)換為全自動(dòng)試管分裝系統(tǒng)。可以自動(dòng)識(shí)別并跳過(guò)不符合分裝的平皿,不影響整機(jī)分裝過(guò)程的連續(xù)性。低速,普通,震動(dòng)平鋪三種分裝模式。自帶2個(gè)RS232接口。具有自帶清洗程序。分裝系統(tǒng)可編程操作16個(gè)程序。分裝流速0.6mL/min-5L/min,分裝誤差小于1%。可設(shè)置多種工作方式,單次分裝量0.1mL-9999mL??稍O(shè)置為間隔分裝,暫停時(shí)間0.1-10秒可選,并可設(shè)定分裝次數(shù)。吉林全自動(dòng)培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基制備器內(nèi)部的管道和容器可以更換,方便移除和清洗。
配制培養(yǎng)基需要哪些制備:(1)稱(chēng)出規(guī)定數(shù)量的瓊脂和蔗糖,加水直到培養(yǎng)基較終容積的34,加熱溶解,完全融解后的溶液是透明的。在配制液體培養(yǎng)基(不加瓊脂)時(shí)無(wú)需加熱。(2)按需要加入一定量的各種貯存母液,包括生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)和其他特殊附加物。吸取母液要使用專(zhuān)一的移液管。如有必要,培養(yǎng)基中所需的維生素,可在高壓滅菌之后通過(guò)減壓過(guò)濾裝置或微孔過(guò)濾器滅菌后再加入。(3)蒸餾水定容。充分混合后調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH,一般以5.66.0為好。(4)培養(yǎng)基分裝,分裝量一般以占培養(yǎng)容器的1514為宜。之后在24h內(nèi)完成高壓滅菌,也可以高壓滅菌后再進(jìn)行培養(yǎng)基的無(wú)菌分裝,室溫下存放備用。暫時(shí)不用的培養(yǎng)基應(yīng)放置于10攝氏度下保存,而含有生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)的培養(yǎng)基在45攝氏度保存更佳。
培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)室制備:―般要求:正確制備培養(yǎng)基是微生物檢驗(yàn)的好基礎(chǔ)步驟之一,使用脫水培養(yǎng)基和其他成分,尤其是含有有毒物質(zhì)(如膽鹽或其他選擇劑)的成分時(shí),應(yīng)遵守良好實(shí)驗(yàn)室規(guī)范和生產(chǎn)廠商提供的使用說(shuō)明。培養(yǎng)基的不正確制備會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基出現(xiàn)質(zhì)量問(wèn)題。使用商品化脫水合成培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)嚴(yán)格按照廠商提供的使用說(shuō)明配制。如重量(體積)、pH制備日期、滅菌條件和操作步驟等。實(shí)驗(yàn)室使用各種基礎(chǔ)成分制備培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)按照配方準(zhǔn)確配制,并記錄相關(guān)信息,如:培養(yǎng)基名稱(chēng)和類(lèi)型及試劑級(jí)別、每個(gè)成分物質(zhì)含量、制造商、批號(hào)、pH、培養(yǎng)基體積(分裝體積)、無(wú)菌措施(包括實(shí)施的方式、溫度及時(shí)間)、配置日期、人員等,以便溯源。培養(yǎng)基的分裝:培養(yǎng)基的分裝,應(yīng)按使用的目的和要求,分裝于試管、燒瓶等適當(dāng)容器內(nèi)。
培養(yǎng)基制備基本方法:培養(yǎng)基各成份的混合和溶化,培養(yǎng)基所用化學(xué)藥品均應(yīng)是化學(xué)純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中,使細(xì)菌不易生長(zhǎng)。很好使用不銹鋼鍋加熱溶化,也可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動(dòng)蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時(shí)、可先用溫水加熱并隨時(shí)擾動(dòng),以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用,應(yīng)重新制備。待大部分固體成分溶化后,再用較小火力使所有成分完全溶化。迄至煮沸。如為瓊脂培養(yǎng)基,應(yīng)先用一部分水將瓊脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過(guò)程中,因蒸發(fā)而丟失的水分,必須加以補(bǔ)足。全自動(dòng)培養(yǎng)基制備分裝系統(tǒng):鋁制表面光滑平坦;易于清潔,無(wú)孔隙和裂縫,以防培養(yǎng)基流進(jìn)去。江西培養(yǎng)基制備器售后服務(wù)
培養(yǎng)基,是指供給微生物、植物或動(dòng)物(或組織)生長(zhǎng)繁殖的,由不同營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。河北培養(yǎng)基制備器廠家
配制培養(yǎng)基的原則:根據(jù)培養(yǎng)目的需要選擇適宜的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。由于微生物營(yíng)養(yǎng)類(lèi)型復(fù)雜,不同微生物有不同的營(yíng)養(yǎng)要求。因此,要根據(jù)不同微生物的營(yíng)養(yǎng)需求選擇適宜的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),配制針對(duì)性強(qiáng)的培養(yǎng)基。自養(yǎng)微生物有較強(qiáng)的合成能力,能以簡(jiǎn)單的無(wú)機(jī)物如co2和無(wú)機(jī)鹽合成復(fù)雜的細(xì)胞物質(zhì)。因此,培養(yǎng)自養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基應(yīng)由簡(jiǎn)單的無(wú)機(jī)物組成。異養(yǎng)微生物的合成能力較弱,不能以CO2作為碳源或主要碳源,故應(yīng)在培養(yǎng)基中至少添加一種有機(jī)物。注意營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度與配比要合適:微生物只有在營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度及其比例合適時(shí)才能良好生長(zhǎng)。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度過(guò)低不能滿(mǎn)足現(xiàn)生長(zhǎng)需要,過(guò)高又抑制其生長(zhǎng)。例如,適量的蔗糖是異養(yǎng)微生物的良好碳源和能源,但高濃度蔗糖則抑制菌體生長(zhǎng)。金屬離子是微生物生長(zhǎng)所不可缺少的礦質(zhì)養(yǎng)分,但濃度擴(kuò)大,尤其是重金屬離子,反而抑制其生長(zhǎng),甚至產(chǎn)生殺菌作用。河北培養(yǎng)基制備器廠家