培養(yǎng)基制備基本方法:培養(yǎng)基各成份的混合和溶化,培養(yǎng)基所用化學(xué)藥品均應(yīng)是化學(xué)純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中,使細(xì)菌不易生長(zhǎng)。很好使用不銹鋼鍋加熱溶化,也可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動(dòng)蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時(shí)、可先用溫水加熱并隨時(shí)擾動(dòng),以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用,應(yīng)重新制備。待大部分固體成分溶化后,再用較小火力使所有成分完全溶化。迄至煮沸。如為瓊脂培養(yǎng)基,應(yīng)先用一部分水將瓊脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過(guò)程中,因蒸發(fā)而丟失的水分,必須加以補(bǔ)足。培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度過(guò)大,會(huì)使?jié)B透壓過(guò)高,使細(xì)胞發(fā)生質(zhì)壁分離而抑制微生物生長(zhǎng)。湖南培養(yǎng)基制備器價(jià)格
培養(yǎng)基(Medium)是供微生物、植物和動(dòng)物組織生長(zhǎng)和維持用的人工配制的養(yǎng)料,一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽(包括微量元素)以及維生素和水等,有點(diǎn)還添加克菌素、色素、和血清。為方便長(zhǎng)期保管,培養(yǎng)基的成分均制成粉末狀。使用時(shí)再配制成可用的培養(yǎng)基,整個(gè)制備過(guò)程培養(yǎng)基需要嚴(yán)格的滅菌。目前對(duì)培養(yǎng)基滅菌通常使用高壓蒸汽法,因?yàn)檎羝哂泻軓?qiáng)的穿透能力,能夠殺死各種微生物,微生物受熱死亡的原因,主要是因高溫使微生物體內(nèi)的一些重要蛋白質(zhì),如酶等,發(fā)生凝固、變性,從而導(dǎo)致微生物無(wú)法生存而死。滅菌中加熱溫度和受熱時(shí)間與滅菌程度和營(yíng)養(yǎng)成分的破壞都有關(guān)系。河南觸摸屏培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基的不正確制備會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基出現(xiàn)質(zhì)量問(wèn)題。
制備培養(yǎng)基有什么要求:1、培養(yǎng)基需保持澄清,便于觀察細(xì)菌的生長(zhǎng)情況,培養(yǎng)基加熱煮沸后,可用脫脂棉花或絨布過(guò)濾,以除去沉淀物,必要時(shí)可用雞蛋白澄清處理,所用瓊脂條要預(yù)先洗凈晾干后使用,避免因瓊脂含雜質(zhì)而影響透明度。2、盛裝培養(yǎng)基不宜用鐵、銅等容器,使用洗凈的中性硬質(zhì)玻璃容器為好。3、培養(yǎng)基的滅菌既要達(dá)到完全滅菌目的,又要注意不因加熱而降低其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,121℃15min即可,如為含有不耐高熱物質(zhì)的培養(yǎng)基如糖類(lèi)、血清、明膠等,則應(yīng)采用低溫滅菌或間歇法滅菌,一些不能加熱的試劑如亞碲酸鉀、卵黃、TTC、克菌素等,待基礎(chǔ)瓊脂高壓滅菌后涼至50℃左右再加入。
天然培養(yǎng)基的血清種類(lèi):牛血清分為小牛血清、新牛血清、胎牛血清。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。顯然,胎牛血清是品質(zhì)很高的,因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分很少。血清的主要成分血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、、無(wú)機(jī)物等,這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。培養(yǎng)基制備器滅菌之后保持的溫度是可以預(yù)設(shè)的。殺菌劑裝入口寬大,并附有保險(xiǎn)鎖。
培養(yǎng)基的配制:1、配料:在容器中加入少量水,按照配方稱(chēng)取各種藥品,加足所需水量(一藥一勺,取藥后立即蓋上瓶蓋)。2、溶解:淀粉溶解:少量冷水調(diào)成糊狀,加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養(yǎng)基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95-97℃,且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。3、調(diào)PH:用1N的鹽酸或1N的NaOH把培養(yǎng)基調(diào)節(jié)到所要求的值。4、過(guò)濾:濾紙或棉花進(jìn)行過(guò)濾。5、分裝:一般培養(yǎng)基放在三角瓶或試管中滅菌使用。(1)三角瓶:若作靜置培養(yǎng),則100ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,較多不能超過(guò)150ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,否則滅菌時(shí)培養(yǎng)基沸騰容易污染棉塞,造成染菌;若作搖瓶培養(yǎng),則15-20ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,保證通氣良好。(2)試管分裝:液體培養(yǎng)基一般裝4-5ml,約試管的1/4高度。固體斜面培養(yǎng)基一般裝3-4ml,約試管的1/5高度。6、包扎:分裝好后,塞上棉塞,在用牛皮紙將棉塞包裹好,防止滅菌時(shí)水份進(jìn)入把棉塞弄濕。7、滅菌:按配方上要求的溫度、壓力進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高,營(yíng)養(yǎng)成分會(huì)被破壞,培養(yǎng)基中的糖、氨基酸會(huì)使培養(yǎng)基的顏色變深。培養(yǎng)基制備器放入燒杯或瓷缸中,慢慢加入少量所需水,邊加入邊用玻璃棒攪拌。安徽培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基制備器可以將配置、滅菌合二為一,較后恒溫保持等待分裝。極大地提高了效率。湖南培養(yǎng)基制備器價(jià)格
配制培養(yǎng)基的原則:調(diào)節(jié)氧化還原電位(Eh)各種微生物對(duì)培養(yǎng)基的Eh要求不同。適宜好氧微生物生長(zhǎng)的Eh值一般為+0.3~+0.4V,厭氧微生物只能在+0.1V以下生長(zhǎng),因此,培養(yǎng)好氧微生物必須保證氧的供應(yīng),可在培養(yǎng)基中加入氧化劑提高Eh值。調(diào)節(jié)滲透壓多數(shù)微生物能耐受較大范圍滲透壓的變化。培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度過(guò)大,會(huì)使?jié)B透壓過(guò)高,使細(xì)胞發(fā)生質(zhì)壁分離而抑制微生物生長(zhǎng)。低滲溶液則使細(xì)胞吸水膨脹易破裂,因此,配制培養(yǎng)基時(shí)要掌握營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度。常在培養(yǎng)基中加人適量的Nacl以提高滲透壓。原料來(lái)源的選擇力求節(jié)約:配制培養(yǎng)基還應(yīng)遵循力求節(jié)約的原則,盡量選用價(jià)格便宜、來(lái)源方便的原料。特別是在工業(yè)發(fā)酵中,培養(yǎng)基用量大,更應(yīng)注意利用低成本的原料,降低產(chǎn)品成本。湖南培養(yǎng)基制備器價(jià)格