簡單制作培養(yǎng)基,需要完成以下幾個主要步驟:需要對其進行消毒處理,普通介質(zhì)使用121℃高壓蒸汽滅菌15分鐘。本發(fā)明適用于各種介質(zhì)的制備,如無特殊要求,可用于滅菌。一些熱成分,如碳水化合物,應該單獨制備20%或更多的濃縮液,過濾或間斷殺菌,然后通過無菌操作技術(shù)加入到培養(yǎng)液中。在低溫下,明膠培養(yǎng)基也能殺菌。血、體液及素應經(jīng)無菌處理后,加至約50℃冷卻培養(yǎng)基中。需要對培養(yǎng)基的質(zhì)量進行檢測。每次處理完培養(yǎng)基,都要仔細檢查,如破損、浸漬、顏色異常、棉塞污染等,要進行篩選和棄置,才能確定pH值。培養(yǎng)基培養(yǎng)一晚,若有細菌生長,培養(yǎng)基將被丟棄。常規(guī)菌株接種1×2管或瓶培養(yǎng)基,24h培養(yǎng),對生長不良或無菌的菌株進行培養(yǎng),追蹤其產(chǎn)生原因,并反復接種。如不發(fā)生變化,應丟棄培養(yǎng)基,禁止使用。一般液體培養(yǎng)基可用濾紙過濾法,濾紙應拆疊成折扇成漏斗形。陜西實驗室培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基的類型-根據(jù)培養(yǎng)基的用途來區(qū)分,可分為選擇培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基等。1)選擇培養(yǎng)基在培養(yǎng)基中加入某種物質(zhì)以殺死或抑制不需要的菌種生長的培養(yǎng)基,稱之為選擇培養(yǎng)基。如鏈霉素、氯霉素等抑制原核微生物的生長;而制霉菌素、灰黃霉素等能抑制真核微生物的生長;結(jié)晶紫能抑制革蘭氏陽性細菌的生長等。2)增殖培養(yǎng)基在自然界中,不同種的微生物常生活在一起,為了分離我們所需要的微生物,在普通培養(yǎng)基中加入一些某種微生物特別喜歡的營養(yǎng)物質(zhì),以增加這種微生物的繁殖速度,逐漸淘汰其它微生物,這種培養(yǎng)基稱為增殖培養(yǎng)基,這種培養(yǎng)基常用于菌種篩選和選擇增菌中。在某種程度上講,增殖培養(yǎng)基也是一種選擇培養(yǎng)基。3)鑒別培養(yǎng)基在培養(yǎng)基中加入某種試劑或化學藥品,使難以區(qū)分的微生物經(jīng)培養(yǎng)后呈現(xiàn)出明顯差別,因而有助開快速鑒別某種微生物。吉林瓊脂培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基既是提供細胞營養(yǎng)和促使細胞增殖的基礎物質(zhì),也是細胞生長和繁殖的生存環(huán)境。
一種斜面培養(yǎng)基制備器,包括底板,所述底板左右兩側(cè)分別固定一塊側(cè)板,底板前側(cè)設置一塊擋板,兩塊所述側(cè)板上對應著開設一條豎直縫并分別在豎直縫前后側(cè)開設若干條水平縫,還包括一根靠桿,靠桿兩端分別穿過兩側(cè)板上對應水平縫并以可拆卸連接方式固定。作為選擇,所述擋板內(nèi)側(cè)從左到右等間隔設置若干隔板,所述靠桿上從左到右等間隔設置與隔板數(shù)量對應的固定凸塊。靠桿與側(cè)板之間的連接方式有兩種選擇方式。第一種為:所述靠桿一端卡在水平縫外,另一端設置螺紋段并用螺母實現(xiàn)與側(cè)板之間的固定。
—種培養(yǎng)基制備分裝一體機,其包括培養(yǎng)基制備器和自動分裝系統(tǒng),以及分別與該培養(yǎng)基制備器和自動分裝系統(tǒng)連接的控制系統(tǒng),其中所述培養(yǎng)基制備器包括外裝殼體,該外裝殼體設有容腔,所述容腔內(nèi)設有攪拌罐,所述攪拌罐與所述容腔內(nèi)壁呈間隔設置,其內(nèi)設有夾腔,所述攪拌罐的底部與所述容腔內(nèi)壁之間設有磁力攪拌器,所述磁力攪拌器的攪拌子向上延伸穿過所述攪拌罐的底部伸入至攪拌罐中;所述容腔的頂部設有外裝箱蓋,所述外裝箱蓋上設有箱蓋保險鎖;所述外裝箱蓋上分別設有分裝連接孔和傳感器安裝孔,所述分裝連接孔上設有帶流量栗的出料管,所述出料管一端向外延伸穿過所述外裝箱蓋與所述自動分裝系統(tǒng)連接,其另一端向內(nèi)延伸伸入至培養(yǎng)基底部,所述傳感器安裝孔上連接有溫度傳感器,所述溫度傳感器也向下延伸伸入至培養(yǎng)基內(nèi);所述外裝殼體上端設有多個進水管,所述進水管向內(nèi)延伸穿過所述夾腔與所述攪拌罐內(nèi)壁觸接,所述外裝殼體底部設有至少一個出水管,所述容腔底部設有加熱元件;所述流量栗、磁力攪拌器、溫度傳感器、進水管和出水管、加熱元件均與所述控制系統(tǒng)連接。培養(yǎng)基制備器開始運行樣品量配器并根據(jù)培養(yǎng)基的黏度調(diào)整樣品劑量。
培養(yǎng)基配制:配制用水,培養(yǎng)基的大部分是水,所以水的質(zhì)量直接影響培養(yǎng)基的質(zhì)量。按Waymouth標準,水的電阻應為200萬歐姆,一般實驗室里以玻璃蒸餾器制備的雙蒸水或三蒸水可以符合使用條件。培養(yǎng)基:培養(yǎng)基有天然、人工兩種。一般實驗室使用的是RPMI-1640粉末培養(yǎng)基,以雙蒸或三蒸水配制。NaHCO3(或HCl)調(diào)pH至7.2-7.4,若pH值超過7.6或遠低于6.8,則大多數(shù)細胞不能生長。RPMI-1640不耐高壓滅菌,使用前需經(jīng)滅菌0.22μm孔徑濾膜濾過處理。血清:培養(yǎng)中常使用小牛血清(或胎牛血清)。血清亦不能高壓滅菌,無菌的小牛血清需在56℃水浴30分鐘滅活補體,置4℃冰箱存放待用。配制時含量視培養(yǎng)細胞種類、時間而定,一般用10—15%。由于血清成分復雜、條件不易控制,可選用無血清培養(yǎng)基。全自動培養(yǎng)基制備分裝系統(tǒng):兩個存儲器;存儲器高度可選。陜西實驗室培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基制備器解凍血清時,請按照的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫)。陜西實驗室培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基的分裝:大批量配制時使用的自動分配器須經(jīng)校準和確認。每次使用前后,均要對分配器的管道系統(tǒng)進行沖洗,在分裝無菌培養(yǎng)基前,則要采用無菌硅膠管。固體培養(yǎng)基一般分裝在250ml、500ml錐形瓶中,高壓滅菌后根據(jù)需要分裝平皿或試管。平皿:傾注平皿,應在無菌室中放置3—4h,如用塑料平皿須在35℃培養(yǎng)箱中倒置30—60min。讓水蒸汽自然蒸發(fā)。斜面:制備低層斜面分裝于試管,約占容積1/5,滅菌后趁熱斜放在細玻璃棒和木桿上,使成斜度,分裝使注意管口和瓶塞上勿沾有培養(yǎng)基,如沾有培養(yǎng)基應用布抹去,以避免污染。陜西實驗室培養(yǎng)基制備器