培養(yǎng)基制備方法與注意事項:1、培養(yǎng)基配方選擇同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此,除所用的是標準方法,應嚴格按其規(guī)定進行配制外,一般均應盡量收集有關資料,加以比較核對,再依據(jù)自己的使用目的,加以選用,記錄其來源。2、培養(yǎng)基制備記錄每次制備培養(yǎng)基均應有記錄,包括培養(yǎng)基名稱,配方及其來源,和各種成份的牌號,好終pH值、消毒的溫度和時間制備的日期和制備者等,記錄應復制一份,原記錄保存?zhèn)洳?,復制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。3、培養(yǎng)基成份稱量培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯亂,好好一次完成,不要中斷。可將配方置于傍側(cè),每稱完一種成分即在配方上做出記號,并將所需稱取的藥品一次取齊,置于左側(cè),每種稱取完畢后,即移放于右側(cè)。完全稱取完畢后,還應進行一次檢查。全自動培養(yǎng)基制備儀主要特點:數(shù)據(jù)追溯性好,。湖北大容量 培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基配置原則:滅菌處理,要獲得微生物純培養(yǎng),必須避免雜菌污染,因此對所用器材及工作場所進行消毒與滅菌。對培養(yǎng)基而言,更是要進行嚴格的滅菌。對培養(yǎng)基一般采取高壓蒸汽滅菌,一般培養(yǎng)基用1.05kg/cm2,121.3℃條件下維持15-30min可達到滅菌目的。在高壓蒸汽滅菌過程中,長時間高溫會使某些不耐熱物質(zhì)遭到破壞,如使糖類物質(zhì)形成氨基糖、焦糖,因此含糖培養(yǎng)基常在0.56kg/cm2,112.6℃15-30分鐘進行滅菌,某些對糖類要求較高的培養(yǎng)基,可先將糖進行過濾除菌或間歇滅菌,再與其他已滅菌的成分混合;長時間高溫還會引起磷酸鹽、碳酸鹽與某些陽離子(特別是鈣、鎂、鐵離子)結(jié)合形成難溶性復合物而產(chǎn)生沉淀。西藏自動培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯亂,較好一次完成,不要中斷。
在制備培養(yǎng)基時,通常要考慮以下因素:(1)pH值多數(shù)細胞系在pH=7.4下生長得很好。盡管各細胞株之間細胞生長*pH值變化很小,但一些正常的成纖維細胞系以pH=7.4~7.7,轉(zhuǎn)化細胞以pH=7.0~7.4更合適。據(jù)報道,上皮細胞以pH=5.5合適。為確定*佳pH值,做一個簡單的生長實驗或特殊功能分析酚紅常用作指示劑,pH=7.4呈紅色,pH=7.0變橙色,pH=6.5變黃色,而pH=7.6呈紅色中略帶藍色,pH=7.8呈紫色。由于對顏色的觀察有很大的主觀性,因而必須用無菌平衡鹽溶液和同樣濃度的酚紅配一套標準樣,放在與制備培養(yǎng)基相同的瓶子中。(2)緩沖能力碳算鹽緩沖系統(tǒng)由于毒性小、成本低、對培養(yǎng)物有營養(yǎng)作用,因此比其他緩沖系統(tǒng)用得多。在pH值條件下的緩沖能力差。(3)滲透壓多數(shù)培養(yǎng)細胞對滲透壓有很寬的耐受范圍,一般常用冰點降低或蒸汽壓升高測定。如果自己配培養(yǎng)基,可通過測定滲透壓防止稱量和稀釋等造成的誤差。
微生物檢驗培養(yǎng)基制備的要點:培養(yǎng)基擺斜面,滅菌完成后,將試管中的中海瓊脂培養(yǎng)基放在木棒或玻璃棒上,同時它很熱,并且有適當?shù)钠露?。冷卻后使瓊脂凝固并變成斜面。斜面長度不超過試管的二分之一。微生物培養(yǎng)基質(zhì)檢,檢驗培養(yǎng)基滅菌后,發(fā)現(xiàn)有破損,浸水,顏色異常,棉塞被培養(yǎng)基污染。所有這些都必須丟棄,不能重復使用,并確定其很終pH值。無菌檢查和效果檢查也是必需的。無菌檢查是取1~2瓶無菌培養(yǎng)基,37℃孵育一兩天,確認無細菌生長;效果檢查是將標準菌株接種到相關培養(yǎng)基上進行細菌檢查。動物的生長、形態(tài)和生化條件與已知條件一致。兩個條件都合格,準備好的培養(yǎng)基就可以使用了。一般液體培養(yǎng)基可用濾紙過濾法,濾紙應拆疊成折扇成漏斗形,以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。
培養(yǎng)基的實驗室制備:正確制備培養(yǎng)基時微生物檢驗的較基礎步驟之一。使用脫水培養(yǎng)基和其他成分,尤其是含有有毒物質(zhì)(如膽鹽或其他選擇劑)的成分時,應遵守良好實驗室規(guī)范和生產(chǎn)廠商提供的使用說明。培養(yǎng)基的不正確制備會導致培養(yǎng)基出現(xiàn)質(zhì)量問題。使用商品化脫水合成培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基時,應嚴格按照廠商提供的使用說明配置。記錄所有相關數(shù)據(jù),如質(zhì)量/體積、pH、制備日期、滅菌條件和制備人員等。使用各別成分制備培養(yǎng)基時,應按照配方準確配制,記錄所有細節(jié)信息,如;培養(yǎng)基名稱和類型及試劑級別、每個成分物質(zhì)含量、制造商、批號、pH、培養(yǎng)基體積(分裝體積)、無菌措施(包括實施的方式、溫度及時間)、配置日期、人員等,以便潮源。半合成培養(yǎng)基在合成培養(yǎng)基中,加入某種或幾種天然成分。湖南培養(yǎng)基制備器品牌
培養(yǎng)基制備器蓋子和分裝孔是采用溫度和壓力控制的,不能隨意打開。湖北大容量 培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基配制--稱量:培養(yǎng)基的制備環(huán)節(jié),應當嚴格按照培養(yǎng)基配方制備,在培養(yǎng)基的稱量過程中,建議在干爽、無風的區(qū)域或者通風柜中進行,這樣能夠避免培養(yǎng)基吸潮使稱量結(jié)果不準。應當選擇靈敏度較高的稱重天平,這樣能夠保證稱量的準確性,同時稱量過程中要選擇的稱量匙,避免其他雜質(zhì)混入培養(yǎng)基中。操作人員應當對稱量過程進行詳細的記錄,記錄中應該體現(xiàn)培養(yǎng)基名稱、批號、稱量數(shù)量、具體配制方法、制備人姓名日期、復核人姓名日期等信息,方便后期的溯源調(diào)查。湖北大容量 培養(yǎng)基制備器