【試驗(yàn)計(jì)劃】咱們將受測(cè)試斑馬魚(yú)分成兩組,分別是正常對(duì)照和服用/打針供試品組(供試品經(jīng)過(guò)溶解到養(yǎng)魚(yú)用水中或打針的方法攝入到斑馬魚(yú)體內(nèi))。服用/打針?biāo)幬镆欢螘r(shí)間后,檢測(cè)尾長(zhǎng)、彗星長(zhǎng)、尾矩和Olive尾矩。能夠看到,服用/打針供試品組斑馬魚(yú)細(xì)胞核呈現(xiàn)拖尾。該供試品改變DNA鏈的負(fù)超螺旋結(jié)構(gòu)、空間構(gòu)象,使DNA鏈斷裂、形成類(lèi)核,終究導(dǎo)致細(xì)胞逝世(壞死、凋亡或自體吞噬)。【點(diǎn)評(píng)結(jié)論】1.經(jīng)過(guò)每組30尾斑馬魚(yú)的比照試驗(yàn),服用/打針供試品組的斑馬魚(yú)細(xì)胞核呈現(xiàn)顯著拖尾,與正常對(duì)照組存在顯著的差別。2.本試驗(yàn)證明了該供試品對(duì)斑馬魚(yú)有基因毒性。斑馬魚(yú)的轉(zhuǎn)化毒理學(xué)。功效評(píng)測(cè)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)方案
斑馬魚(yú)的皮膚結(jié)構(gòu)和功用與人類(lèi)高度類(lèi)似,含有基底層、棘層、顆粒層、通明層和表皮角質(zhì)細(xì)胞層。因而,業(yè)內(nèi)普遍認(rèn)為以斑馬魚(yú)胚胎為試驗(yàn)基礎(chǔ)的結(jié)果,在一般情況下適用于人體,可對(duì)化妝品功效宣稱(chēng)進(jìn)行檢測(cè)評(píng)價(jià),例如抗氧化、抗糖基化、抗老、淡斑亮膚等等。依據(jù)已存案成功的案例顯示,若不包含前期準(zhǔn)備的時(shí)間,只是上樣檢測(cè)到出具結(jié)果,斑馬魚(yú)檢測(cè)的周期要比其他檢測(cè)方式周期更短且本錢(qián)更低。另外,依據(jù)歐盟動(dòng)物保護(hù)法,出生5天以?xún)?nèi)的斑馬魚(yú)胚胎和幼魚(yú)不屬于動(dòng)物,能夠代替哺乳動(dòng)物測(cè)試,契合3R(代替、減少、優(yōu)化)原則。因而,斑馬魚(yú)檢測(cè)在動(dòng)物福利層面也契合了年代潮流。斑馬魚(yú)行為水質(zhì)檢測(cè)系統(tǒng)斑馬魚(yú)實(shí)驗(yàn)成效驗(yàn)證!
【試驗(yàn)計(jì)劃】咱們將受測(cè)試軟骨熒光斑馬魚(yú)分成三組,分別是正常對(duì)照組、模型對(duì)照組和軟骨修正產(chǎn)品組。其間正常對(duì)照組未攝入DXMS,模型對(duì)照組與服用軟骨修正產(chǎn)品組都攝入了等量的DXMS(DXMS經(jīng)過(guò)溶解到養(yǎng)魚(yú)用水中的方法攝入到斑馬魚(yú)體內(nèi))。服用軟骨修正產(chǎn)品組在攝入DXMS的一起攝入硫酸軟骨素之類(lèi)的軟骨修正產(chǎn)品。服用一段時(shí)間軟骨修正產(chǎn)品后,咱們觀察軟骨熒光的改變。能夠看到,服用軟骨修正產(chǎn)品組的軟骨情況與未攝入DXMS的正常對(duì)照組比較類(lèi)似,沒(méi)有明顯的軟骨損害。
在飼養(yǎng)體系里,科研人員們會(huì)準(zhǔn)確調(diào)控水的溫度、電導(dǎo)率等參數(shù),并設(shè)定固定的日常光照時(shí)刻,以保證斑馬魚(yú)能在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)大規(guī)模繁育,確保實(shí)驗(yàn)的有序進(jìn)行。儀器設(shè)備實(shí)驗(yàn)室除了先進(jìn)的飼養(yǎng)體系,還具有了先進(jìn)的正置熒光顯微鏡、熒光定量PCR儀、熒光酶標(biāo)儀、斑馬魚(yú)行為分析儀等檢測(cè)設(shè)備。斑馬魚(yú)成魚(yú)體長(zhǎng)5cm左右,其胚胎通明,在受精72h后完結(jié)孵化,并在孵出后3個(gè)月內(nèi)性成熟。成年斑馬魚(yú)的繁衍周期短(一般7d左右),若條件適宜,成年雌性斑馬魚(yú)可定期產(chǎn)卵(每次200~300個(gè))。在斑馬魚(yú)的前期胚胎及幼體的發(fā)育過(guò)程中,尚無(wú)性別分解,原始性腺都是相同的且具有雙向發(fā)育的潛能,易受環(huán)境(溫度、光照、pH值等)因素的影響而改變其遺傳性別。斑馬魚(yú)與人類(lèi)基因類(lèi)似度達(dá)87%,能再生的小魚(yú)!
模式生物斑馬魚(yú)的應(yīng)用斑馬魚(yú)在工業(yè)實(shí)驗(yàn)室中常被用作毒理學(xué)檢驗(yàn),是國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化組織推薦的五種實(shí)驗(yàn)魚(yú)種之一。但隨著對(duì)斑馬魚(yú)的進(jìn)一步了解,其作為模式生物在生命科學(xué)以及醫(yī)學(xué)研究中的作用正在崛起。以斑馬魚(yú)為模型研究目的基因在脊椎動(dòng)物中的表達(dá)和功能利用斑馬魚(yú)胚胎透明的特點(diǎn),構(gòu)建綠色熒光蛋白(GFP)與內(nèi)源性靶蛋白的融合蛋白,通過(guò)觀察融合蛋白的熒光分布情況,借以確定目的基因或目的蛋白的功能和表達(dá)特點(diǎn)。同時(shí),還可通過(guò)檢測(cè)綠色熒光的分布,監(jiān)測(cè)外源蛋白的表達(dá)在斑馬魚(yú)中的表達(dá)與分布情況。和其它動(dòng)物模型相比較斑馬魚(yú)優(yōu)勢(shì)。功效評(píng)測(cè)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)方案
斑馬魚(yú)可以在體外試驗(yàn)和哺乳動(dòng)物試驗(yàn)之間起到了很好的效果。功效評(píng)測(cè)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)方案
斑馬魚(yú)不僅小,算是一種壽數(shù)很短的魚(yú)種,當(dāng)然,它成長(zhǎng)起來(lái)比較快,只需要4個(gè)月就可以達(dá)到性成熟,成熟魚(yú)每隔幾天可產(chǎn)卵一次,卵子體外受精,體外發(fā)育,,三十六小時(shí)后出現(xiàn)一切首要組織的前體,胚胎發(fā)育同步且速度快,72小時(shí)就可以正常進(jìn)食了。讓人難以想象的是,小小的斑馬魚(yú)具有非常強(qiáng)的再生能力,不管身體哪一部分殘缺了,很快就會(huì)再長(zhǎng)出來(lái),就算是眼睛再生感光細(xì)胞和視網(wǎng)膜神經(jīng)元和心臟和線毛細(xì)胞壞了,也會(huì)恢復(fù)如初,尾鰭被切斷也能快速長(zhǎng)出,這就是非常引人注目的地方。功效評(píng)測(cè)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)方案