本發(fā)明屬于氨基酸生產(chǎn)技術(shù)領(lǐng)域:,具體涉及一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基。背景技術(shù)::谷氨酸,是一種酸性氨基酸。分子內(nèi)含兩個羧基,化學(xué)名稱為α-氨基戊二酸。谷氨酸是里索遜1856年發(fā)現(xiàn)的,為無色晶體,有鮮味,微溶于水,而溶于鹽酸溶液,等電點(diǎn)。大量存在于谷類蛋白質(zhì)中,動物腦中含量也較多。谷氨酸在生物體內(nèi)的蛋白質(zhì)代謝過程中占重要地位,參與動物、植物和微生物中的許多重要化學(xué)反應(yīng)。谷氨酸鈉俗稱味精,是重要的鮮味劑,對香味具有增強(qiáng)作用。谷氨酸鈉***用于食品調(diào)味劑,既可單獨(dú)使用,又能與其它氨基酸等并用。用于食品內(nèi),有增香作用。在食品中濃度為,每人每天允許攝入量為0-120微克/千克(以谷氨酸計(jì))。在食品加工中一般用量為-。谷氨酸主要以微生物發(fā)酵制備而得,通過優(yōu)化發(fā)酵培養(yǎng)基,使得菌體增殖速率提高,可以提高氨基酸的產(chǎn)量。現(xiàn)有技術(shù)對谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基優(yōu)化進(jìn)行了大量的研究,例如文獻(xiàn)1“基于pb試驗(yàn)和響應(yīng)面分析法對谷氨酸棒桿菌cnl021發(fā)酵培養(yǎng)基優(yōu)化,**釀造2014年”,通過**陡爬坡試驗(yàn)和響應(yīng)面分析法對發(fā)酵培養(yǎng)基組成進(jìn)行優(yōu)化,得到谷氨酸棒桿菌**適發(fā)酵培養(yǎng)基組,較未優(yōu)化培養(yǎng)基的發(fā)酵培養(yǎng)基產(chǎn)酸量提高了。MEM培養(yǎng)基在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)出高效的穩(wěn)定性。山東F12培養(yǎng)基產(chǎn)品介紹
文獻(xiàn)2“混合硝酸稀土對谷氨酸產(chǎn)生菌的影響,氨基酸雜志”發(fā)現(xiàn),在發(fā)酵培養(yǎng)基中添加一定量的稀土元素,能夠提高谷氨酸的產(chǎn)量。申請人之前的**技術(shù)“一種谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基制備方法”,在常規(guī)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上進(jìn)行了改進(jìn),通過添加菌體蛋白浸膏來替代酵母膏氮源,不但節(jié)約了成本,還能提高氨基酸發(fā)酵產(chǎn)率,一舉兩得。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:在已有發(fā)酵培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上,申請人針對微生物發(fā)酵的特點(diǎn),繼續(xù)進(jìn)行了改進(jìn),以提高發(fā)酵效率,據(jù)此,提出了一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基。本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的:一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基,其包括發(fā)酵培養(yǎng)基a和發(fā)酵培養(yǎng)基b;所述發(fā)酵培養(yǎng)基a首先添加,然后間隔12h以上添加發(fā)酵培養(yǎng)基b。進(jìn)一步地,所述發(fā)酵培養(yǎng)基a的制備方法為:取各原料:葡萄糖,酵母浸膏,k2hpo4,mgso4·7h2o,2-羥基乙胺,cecl3,mnso4·h2o,feso4·7h2o,vb1,生物素;將各原料攪拌均勻后,調(diào)節(jié)ph,**,制得發(fā)酵培養(yǎng)基a。進(jìn)一步地,所述發(fā)酵培養(yǎng)基b的制備方法為:取各原料:琥珀酸,尿素,殼聚糖;將各原料攪拌均勻后,調(diào)節(jié)ph,**,制得發(fā)酵培養(yǎng)基b。推薦地,所述發(fā)酵培養(yǎng)基a的制備方法為:取各原料:葡萄糖50-100g/l,酵母浸膏10-30g/l,k2hpo41-5g/l。天津F12培養(yǎng)基進(jìn)貨價(jià)無酚紅培養(yǎng)基在敏感細(xì)胞系的培養(yǎng)中表現(xiàn)優(yōu)越。
可通過在細(xì)胞培養(yǎng)基中添加一些保護(hù)劑,降低細(xì)胞-氣體和細(xì)胞-液體的表面張力,減少氣泡的形成。4.細(xì)胞培養(yǎng)基的**及儲存**方式及注意事項(xiàng)細(xì)胞培養(yǎng)基**的方式分為高壓**和膜過濾**,不同的培養(yǎng)基由于其營養(yǎng)成份不同,**方式也可能不同。①高壓**某些培養(yǎng)基(如MEM)可進(jìn)行高壓**,這類培養(yǎng)基一般不含有L-谷氨酰胺和碳酸氫鈉,一般是在培養(yǎng)基高壓**后才加入。另外可用耐高壓的谷氨酸鹽(如L-丙氨酰-L-谷氨酰胺)代替L-谷氨酰胺??筛邏?*的培養(yǎng)基在121℃、15psi,15分鐘的條件下完全可達(dá)到**效果及營養(yǎng)成分的**小損失,不需將**時(shí)間延長。絕大多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)基不適宜高壓**。因培養(yǎng)液中常含有維生素、蛋白質(zhì)、多肽、生長因子等物質(zhì),這些物質(zhì)在高溫或射線照射下易發(fā)生變性或失去功能,因而上述液體多采用過濾消毒以除去**??晒┻^濾**使用的濾膜很多,其材料多為polyethersulphone(PES)、尼龍、多聚碳酸鹽、醋酸纖維素、硝酸纖維素、PTFE、陶瓷等。膜過濾**是當(dāng)前較為常用及便捷的一種方法,常采用μm孔徑的濾膜,部份采用μm孔徑。與高壓過濾方式相比,濾膜具有使用期限且價(jià)格較高,但對細(xì)胞培養(yǎng)基的營養(yǎng)成份破壞性較小。通常液體細(xì)胞培養(yǎng)基避免-20℃凍存。
1)、初代培養(yǎng):繡球外植體,將葉片剪去,自來水沖洗干凈。在超凈工作臺上把已經(jīng)沖洗干凈的外植體浸入75%酒精中消毒30s,用無菌水沖洗3~4次。使用白貓漂白水和無菌水按1:4的體積比配制消毒液,將外植體放入消毒液浸泡40min,其中白貓漂白水為上海白貓(集團(tuán))有限公司生產(chǎn)的“白貓”牌家用漂白水。消毒完成,將外植體接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng),建立無菌再生系統(tǒng),誘導(dǎo)培養(yǎng)環(huán)境為光照強(qiáng)度1500lx條件下,溫度25℃,光照時(shí)間16h;黑暗條件下,溫度23℃,光照時(shí)間8h,培養(yǎng)6~8周。其中誘導(dǎo)培養(yǎng)基為ms+~~,誘導(dǎo)培養(yǎng)基的ph值為。(2)、繼代培養(yǎng):以建立的無菌再生系統(tǒng)為對象,將無菌外植體轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基,其中增殖培養(yǎng)基為ms+~~,培養(yǎng)環(huán)境為光照強(qiáng)度1500lx條件下,溫度25℃,光照時(shí)間16h;黑暗條件下,溫度23℃,光照時(shí)間8h,培養(yǎng)8~12周。每隔8~12周轉(zhuǎn)接入新的增殖培養(yǎng)基,增殖培養(yǎng)基的ph值為。(3)、生根培養(yǎng):經(jīng)過繼代培養(yǎng)的繡球組培苗,取2~3cm的頂芽,放入生根培養(yǎng)基,其中生根培養(yǎng)基為1/2ms+~~,生根培養(yǎng)基的ph值為。誘導(dǎo)培養(yǎng)環(huán)境為光照強(qiáng)度1500lx條件下,溫度25℃,光照時(shí)間16h;黑暗條件下,溫度23℃,光照時(shí)間8h,培養(yǎng)8~12周。。無血清培養(yǎng)基提供了純凈的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境。
公司活動友康生物不是一棟樓,也不是一堆自動化設(shè)備。他是一群不浮躁、快樂工作,幸福生活的人。首頁/友康產(chǎn)品無血清細(xì)胞培養(yǎng)基間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基(脂肪—原代細(xì)胞分離及傳代培養(yǎng))特別適用于*物申報(bào)企業(yè)。無血清、無動物源;化學(xué)組分明確,不含任何未知組分脂肪干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基(原代細(xì)胞分間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基(臍帶-凍存細(xì)胞及高代數(shù)細(xì)胞傳代)**于臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞傳代培養(yǎng)和復(fù)蘇細(xì)胞的傳代培養(yǎng),可穩(wěn)定傳代至20代間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基(臍帶—凍間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基(臍帶—原代細(xì)胞分離及種子庫構(gòu)建)既用于臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的原代分離,也可以用于種子庫構(gòu)建??煞€(wěn)定傳至10間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基(臍帶—原干細(xì)胞溫和消化酶專門用于干細(xì)胞的消化,包括臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞,脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞,胚胎干細(xì)胞(ES)等。消化作用溫和,對細(xì)胞的損干細(xì)胞溫和消化酶(100mL/瓶)脂肪**消化酶主要用于脂肪干細(xì)胞的分離,作用溫和,對細(xì)胞損傷?。辉摦a(chǎn)品無人源及動物源組分,適合臨床*物申報(bào)與生產(chǎn)。脂肪**消化酶友康NK細(xì)胞無血清培養(yǎng)基用于單個核細(xì)胞在體外向NK細(xì)胞的誘導(dǎo)及增值。細(xì)胞數(shù)50-80億/2L。MEM培養(yǎng)基含有多種必需的營養(yǎng)成分和礦物質(zhì)。山東F12培養(yǎng)基產(chǎn)品介紹
無酚紅培養(yǎng)基在實(shí)驗(yàn)中減少了潛在毒性。山東F12培養(yǎng)基產(chǎn)品介紹
生產(chǎn)上一般采用冷水噴淋冷卻,冷卻到40-50℃后,輸送到預(yù)先已經(jīng)**過的罐內(nèi)。(四)、間歇**與連續(xù)**的比較1、歇**的***和缺點(diǎn)***是設(shè)備要求低,不需另外設(shè)置加熱、冷卻裝置;操作要求低,適于手動操作,適合于小批量生產(chǎn)規(guī)模;適合于含有大量固體物質(zhì)的培養(yǎng)基的**。缺點(diǎn)是培養(yǎng)基的營養(yǎng)物質(zhì)損失較多,**后培養(yǎng)基的質(zhì)量下降;需進(jìn)行反復(fù)的加熱和冷卻,能耗較高;不適合于大規(guī)模生產(chǎn)過程的**;發(fā)酵罐的利用率較低。2、連續(xù)**的***和缺點(diǎn)***是**溫度高,可減少培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的損失;操作條件恒定,**質(zhì)量穩(wěn)定;易于實(shí)現(xiàn)管道化和自控操作;避免了復(fù)的加熱和冷卻,提高了熱的利用率;發(fā)酵設(shè)備利用率高。缺點(diǎn)是對設(shè)備的要求高,需另外設(shè)置加熱、冷卻裝置;操作較麻煩;染菌的機(jī)會較多;不適合于含大量固體物料的**;對蒸汽的要求高。由此可見,無論在理論上或者在實(shí)踐上,與間歇**過程相比,連續(xù)**的***十分明顯。因此,連續(xù)**越來越多地被用培養(yǎng)基的**。山東F12培養(yǎng)基產(chǎn)品介紹