在253nm的波長處測定吸光度,必要時可用上述底物原液或磷酸鹽緩沖液調節(jié),使吸光度在~,作為底物溶液。制成后應在2小時內使用。供試品溶液的制備精密稱取本品適量,加~60胰蛋白酶單位的溶液。測定法取底物溶液,加μl,混勻,作為空白。另取供試品溶液200μl,加底物溶液(恒溫于℃±℃),立即計時,混勻,使比色池內的溫度保持在25℃±℃,照紫外-可見分光光度法(2010年版*典二部附錄ⅣA),在253nm的波長處,每隔30秒鐘讀取吸光度,共5分鐘。以吸光度為縱坐標,時間為橫坐標,作圖;每30秒鐘吸光度的改變應恒定在~,呈線性關系的時間不得少于3分鐘。若不符合上述要求,應調整供試品溶液的濃度,再作測定。在上述吸光度對時間的關系圖中,取成直線部分的吸光度,按下式計算:式中P為每1mg供試品中含胰蛋白酶的量,單位;A1為直線上終止的吸光度;A2為直線上開始的吸光度;T為A1至A2讀數的時間,分;W為測定液中含供試品的量,mg;,吸光度每分鐘改變,即相當于1個胰蛋白酶單位。胰蛋白酶制劑注射用胰蛋白酶[3]胰蛋白酶胰蛋白酶的醫(yī)學檢查胰蛋白酶檢查名稱胰蛋白酶胰蛋白酶分類血液生化檢查>酶類測定胰蛋白酶胰蛋白酶的測定原理同酶速率法測定。胰酶使用的時候要注意什么?新疆國產胰酶是什么
胰蛋白酶(Trypsin)簡稱胰酶,是一種絲氨酸水解酶,能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基端切斷。在組織細胞的提取、培養(yǎng),以及體外細胞培養(yǎng)過程中,均會使用到胰蛋白酶消化液,用于水解細胞間蛋白質,使組織或細胞離散成單個細胞。胰酶在37℃pH8.0條件下消化能力**強。常用胰酶工作濃度為0.25%。EDTA可以螯合鈣鎂離子,胰酶溶液中搭配EDTA使用可以加速細胞間連接蛋白的水解,起到增強消化的效果。酚紅是一種pH指示劑,溶液偏堿性時呈紫紅色,偏酸性時呈橘紅色,近中性時呈粉紅色。本產品為0.25%胰蛋白酶消化液,含0.25%胰蛋白酶,溶于Hank’s緩沖液,不含EDTA,無酚紅指示劑,經0.22μm過濾除菌。山西EDTA胰酶哪個好消化同種細胞時含EDTA的胰酶消化時間會比不含EDTA時間短。
細胞培養(yǎng)胰蛋白酶生物制品簡介中文名稱:胰蛋白酶中文同義詞:胰蛋白酶;胰蛋白酶1:250(豬胰臟);胰蛋白酶1:300(豬胰臟);胰淀粉酶;胰液酵素;胰酶-EDTA溶液;胰蛋白酶1:250;蛋白酶類英文名稱:Trypsin英文同義詞:TRYPSIN;TRYPSIN,1-250;TRYPSIN,1-300;TRYPSIN-EDTA;TRYPSIN,HUMANPANCREAS;TRYPSINPORCINE;TRYPSIN,PORCINEPANCREAS;CAS號:9002-07-7分子式:C6H15O12P3分子量:≈24000EINECS號:232-650-8胰蛋白酶物化性質胰蛋白酶是從牛、豬、羊的胰臟提取,純化獲得的結晶,再制成的凍干制劑。易溶于水,不溶于三氯甲烷、乙醇、**等有機溶劑。在,短時間煮沸幾乎不失活;在堿溶液中加熱則變性沉淀,Ca2+有保護和***作用,胰蛋白酶的等電點為。牛胰蛋白酶原有229個氨基酸組成,含6對二硫鍵,其氨基酸排列順序和晶體結構已被闡明。在腸激酶活自身催化下,酶原的N末端賴氨酸與異亮氨酸殘基之間的肽鍵被水解,釋放出來纈-天-天-天-天-賴6肽,生成有活性的胰蛋白酶。牛的胰蛋白酶氨基酸殘基223個,分子量23800[2],活性部位的絲氨酸殘基是不可缺少的絲氨酸蛋白酶。豬胰蛋白酶的化學結構與牛胰蛋白酶十分相似,在氨基酸殘基排列順序中,只有41個氨基酸殘基不同。
在組織細胞的體外培養(yǎng)和原代細胞培養(yǎng)中的組織細胞分散(將組織塊制備成單個細胞懸液)以及傳代細胞培養(yǎng)中,貼壁生長細胞的消化分散均要使用組織細胞消化液。常用的消化液為胰蛋白酶 (Trypsin) ,EDTA 等。胰蛋白酶是一種絲氨酸水解酶,它能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基側切段,水解細胞間的蛋白質,破壞細胞間的連接,從而使組織或貼壁細胞離散成單個細胞。胰酶分散細胞的活性與組織或細胞的特性、胰酶濃度、溫度和作用時間有關,在PH 8.0和37℃時,胰酶的作用能力**強,因此使用胰酶時,應把握好濃度、溫度和時間,以免消化過度造成細胞損傷。一般常用胰酶的工作濃度為0.25%,而半貼壁細胞或對胰酶敏感的細胞常采用低濃度(0.05%)的胰酶進行細胞消化。由于EDTA能夠螯合Ca2+和Mg2+,從而破壞細胞連接促進細胞的解離,因此在胰酶溶液中常常會加入一定量的EDTA混合使用,以增強解離效果。胰酶細胞消化液(Trypsin-EDTA Solution)含0.25%胰酶和0.02%EDTA。
淡黃色的胰酶溶液能放心使用嗎?能,對于胰酶呈黃色的問題,不同品牌也都對此現象進行了測試實驗。變色的胰酶同樣能很好的用于細胞的解離,請放心使用。細胞消化時,胰酶不去除對細胞的影響?細胞消化時,如果消化液中只有胰酶,不含EDTA,不去除是沒有問題的。如果消化液中含有胰酶和EDTA,比較好去除。EDTA是一種化學螯合劑,主要作用在于能螯合Ca、Mg離子,使細胞分離。但EDTA不能被血清中和,消化后要徹底清洗去除,否則細胞易脫壁。胰酶胰酶和EDTA聯合使用可提高消化效率,所以常二者合用。胰酶的保存胰酶PH的變化是肉眼可觀察到的。青海EDTA胰酶市場報價
在消化酶中,胰酶主要用于促進消化。新疆國產胰酶是什么
胰酶消化貼璧細胞原理胰酶是一種重要的消化酶,它在人體消化過程中起到了關鍵作用。胰酶主要由胰腺分泌,它能夠幫助人體消化食物中的蛋白質、脂肪和碳水化合物等營養(yǎng)物質。而胰酶消化貼壁細胞則是指胰酶在消化過程中與腸道內的貼壁細胞發(fā)生作用的機制。胰酶消化貼壁細胞的原理主要包括胰酶的合成、分泌和作用三個過程首先是胰酶的合成。胰酶是由胰腺內的特殊細胞合成的。這些細胞受到胃內食物的刺激后,通過胰腺神經末梢的刺激而開始合成和分泌胰酶。合成的胰酶經過胰管進入小腸。接下來是胰酶的分泌。胰酶的分泌主要通過胰腺分泌液的產生和排泄來實現。當胃內食物通過幽門進入小腸后,小腸壁上的細胞會分泌一種叫做胃腺素的物質,這種物質能夠刺激胰腺分泌液的分泌。胰腺分泌液中含有胰酶和其他消化酶,它們經過胰管進入小腸,與食物中的營養(yǎng)物質發(fā)生作用。***是胰酶的作用。胰酶主要通過兩種方式作用于貼壁細胞。一種方式是直接作用,胰酶直接與貼壁細胞接觸并發(fā)揮作用。另一種方式是間接作用,胰酶作用于食物中的營養(yǎng)物質,將其分解為小分子物質后再與貼壁細胞發(fā)生作用。 新疆國產胰酶是什么