但酚紅在無血清細(xì)胞培養(yǎng)基中可能帶來胞內(nèi)鈉/鉀失衡,影響細(xì)胞生長。碳酸氫鈉在細(xì)胞培養(yǎng)基中主要是作為緩沖系統(tǒng),此外還具有調(diào)節(jié)滲透壓的作用。通常產(chǎn)品使用說明中的碳酸氫鈉推薦量是一個標(biāo)準(zhǔn)、安全量,是在科學(xué)的基礎(chǔ)上根據(jù)實踐經(jīng)驗所得。但是由于不同的細(xì)胞系(株)不同,同一株細(xì)胞適應(yīng)環(huán)境也可能不同(細(xì)胞耐受性不同等),且存在的地域性水質(zhì)差異等,在實際生產(chǎn)過程中也可稍作改動,但使用者需做相應(yīng)的檢測(理化及細(xì)胞生產(chǎn)試驗等)。HEPES是一種非離子緩沖液,在pH~,在高濃度時對一些細(xì)胞可能**。HEPES緩沖液可與低水平的碳酸鈉(g/L)共用,以抵消因額外加入HEPES引起的滲透壓增加。其安全濃度范圍是10~25mmol/L。**酸鈉可以作為細(xì)胞培養(yǎng)中的替代碳源,盡管細(xì)胞更傾向于以葡萄糖作為碳源,但是在沒有葡萄糖的條件下,細(xì)胞也可以代謝**酸鈉。谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,4℃下放置1周可分解50%,使用中**好單獨配制,置-20℃冰箱中保存,使用前加入細(xì)胞培養(yǎng)液中。MEM培養(yǎng)基在細(xì)胞培養(yǎng)中表現(xiàn)出高效的穩(wěn)定性。貴州減血清培養(yǎng)基進(jìn)貨價
無芽孢:E=209—250*103J/mol。顯然,(5)式的比值〉1,說明提高溫度對于第二個平行反應(yīng),即菌體死亡的反應(yīng)是有利的。提高溫度,雖然兩個平行性反應(yīng)的反應(yīng)速度常數(shù)都提高了,但是,達(dá)到同樣的**效果,所需要的時間卻縮短了,由于***個反應(yīng)也就是營養(yǎng)成分破壞的反應(yīng)速度常速增加的少,因此,有利于減少培養(yǎng)基在**過程中營養(yǎng)成分的破壞。換言之,高溫短時**對于培養(yǎng)基營養(yǎng)成分是有利的。通常所說的高溫短時**可以提高生產(chǎn)效益,其理論根據(jù)就在于此。結(jié)論1:當(dāng)**溫度上升時,微生物殺死速率的提高要超過培養(yǎng)基成分的破壞速率的增加。要減少營養(yǎng)成分的破壞,可升高溫度**。結(jié)論2:在**時選擇較高的溫度、較短的時間,這樣便既可達(dá)到需要的**程度,同時又可減少營養(yǎng)物質(zhì)的損失。(二)、影響**效果的因素(1)微生物種類:不同的微生物k值不同。(2)初始菌量:在保持N值不變的前提下,t與初始菌量N0的對數(shù)成正比。(3)培養(yǎng)基成份:油脂、蛋白質(zhì)增加微生物的耐熱性。(4)傳熱與混合狀況:影響受熱均勻度。(5)培養(yǎng)基中固體顆粒的存在影響熱穿透。(6)蒸汽中空氣的存在降低蒸汽分壓和**溫度。(7)pH:酸性pH下可加快微生物熱死速率三、培養(yǎng)基的工業(yè)**。廣東基礎(chǔ)培養(yǎng)基價格對比MEM培養(yǎng)基含有必要的氨基酸和維生素。
生產(chǎn)上一般采用冷水噴淋冷卻,冷卻到40-50℃后,輸送到預(yù)先已經(jīng)**過的罐內(nèi)。(四)、間歇**與連續(xù)**的比較1、歇**的***和缺點***是設(shè)備要求低,不需另外設(shè)置加熱、冷卻裝置;操作要求低,適于手動操作,適合于小批量生產(chǎn)規(guī)模;適合于含有大量固體物質(zhì)的培養(yǎng)基的**。缺點是培養(yǎng)基的營養(yǎng)物質(zhì)損失較多,**后培養(yǎng)基的質(zhì)量下降;需進(jìn)行反復(fù)的加熱和冷卻,能耗較高;不適合于大規(guī)模生產(chǎn)過程的**;發(fā)酵罐的利用率較低。2、連續(xù)**的***和缺點***是**溫度高,可減少培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的損失;操作條件恒定,**質(zhì)量穩(wěn)定;易于實現(xiàn)管道化和自控操作;避免了復(fù)的加熱和冷卻,提高了熱的利用率;發(fā)酵設(shè)備利用率高。缺點是對設(shè)備的要求高,需另外設(shè)置加熱、冷卻裝置;操作較麻煩;染菌的機(jī)會較多;不適合于含大量固體物料的**;對蒸汽的要求高。由此可見,無論在理論上或者在實踐上,與間歇**過程相比,連續(xù)**的***十分明顯。因此,連續(xù)**越來越多地被用培養(yǎng)基的**。
三)、試驗結(jié)果:初代培養(yǎng):使用本發(fā)明的消毒方法,消毒成功率能達(dá)到80%,誘導(dǎo)培養(yǎng)基萌芽率能達(dá)到90%,可以成功建立無菌再生體系。繼代培養(yǎng):使用本發(fā)明的增殖培養(yǎng)基,繡球組培苗增殖倍率能夠達(dá)到8~10倍,組培苗高度一致,生長健壯。生根培養(yǎng):使用本發(fā)明的生根培養(yǎng)基,繡球組培苗生根率能夠達(dá)到95%,根系發(fā)達(dá),健壯,可以成功用于移栽大棚。本發(fā)明所指ms培養(yǎng)基是murashige和skoog研制的培養(yǎng)基,其成分配方表見表1。1/2ms培養(yǎng)基是指大量元素含量為ms培養(yǎng)基的一半,其他成分用量相同。表1、ms培養(yǎng)基成分表本發(fā)明涉及的植物生長調(diào)節(jié)劑有:6-ba—6-芐氨基嘌呤;ga3—赤霉素;iba—吲哚丁酸,naa—萘乙酸。本發(fā)明中的誘導(dǎo)培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基均為液體培養(yǎng)基。本具體實施方式的實施例均為本發(fā)明的較佳實施例,并非依此限制本發(fā)明的保護(hù)范圍,故:凡依本發(fā)明的結(jié)構(gòu)、形狀、原理所做的等效變化,均應(yīng)涵蓋于本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。MEM培養(yǎng)基適用于多種哺乳動物細(xì)胞。
本發(fā)明屬于氨基酸生產(chǎn)技術(shù)領(lǐng)域:,具體涉及一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基。背景技術(shù)::谷氨酸,是一種酸性氨基酸。分子內(nèi)含兩個羧基,化學(xué)名稱為α-氨基戊二酸。谷氨酸是里索遜1856年發(fā)現(xiàn)的,為無色晶體,有鮮味,微溶于水,而溶于鹽酸溶液,等電點。大量存在于谷類蛋白質(zhì)中,動物腦中含量也較多。谷氨酸在生物體內(nèi)的蛋白質(zhì)代謝過程中占重要地位,參與動物、植物和微生物中的許多重要化學(xué)反應(yīng)。谷氨酸鈉俗稱味精,是重要的鮮味劑,對香味具有增強(qiáng)作用。谷氨酸鈉***用于食品調(diào)味劑,既可單獨使用,又能與其它氨基酸等并用。用于食品內(nèi),有增香作用。在食品中濃度為,每人每天允許攝入量為0-120微克/千克(以谷氨酸計)。在食品加工中一般用量為-。谷氨酸主要以微生物發(fā)酵制備而得,通過優(yōu)化發(fā)酵培養(yǎng)基,使得菌體增殖速率提高,可以提高氨基酸的產(chǎn)量?,F(xiàn)有技術(shù)對谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基優(yōu)化進(jìn)行了大量的研究,例如文獻(xiàn)1“基于pb試驗和響應(yīng)面分析法對谷氨酸棒桿菌cnl021發(fā)酵培養(yǎng)基優(yōu)化,**釀造2014年”,通過**陡爬坡試驗和響應(yīng)面分析法對發(fā)酵培養(yǎng)基組成進(jìn)行優(yōu)化,得到谷氨酸棒桿菌**適發(fā)酵培養(yǎng)基組,較未優(yōu)化培養(yǎng)基的發(fā)酵培養(yǎng)基產(chǎn)酸量提高了。F12培養(yǎng)基提供了豐富的營養(yǎng)成分,支持細(xì)胞的快速增殖。甘肅無血清培養(yǎng)基包括什么
減血清培養(yǎng)基提高了細(xì)胞培養(yǎng)的重復(fù)性和可靠性。貴州減血清培養(yǎng)基進(jìn)貨價
文獻(xiàn)2“混合硝酸稀土對谷氨酸產(chǎn)生菌的影響,氨基酸雜志”發(fā)現(xiàn),在發(fā)酵培養(yǎng)基中添加一定量的稀土元素,能夠提高谷氨酸的產(chǎn)量。申請人之前的**技術(shù)“一種谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基制備方法”,在常規(guī)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上進(jìn)行了改進(jìn),通過添加菌體蛋白浸膏來替代酵母膏氮源,不但節(jié)約了成本,還能提高氨基酸發(fā)酵產(chǎn)率,一舉兩得。技術(shù)實現(xiàn)要素:在已有發(fā)酵培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上,申請人針對微生物發(fā)酵的特點,繼續(xù)進(jìn)行了改進(jìn),以提高發(fā)酵效率,據(jù)此,提出了一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基。本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案來實現(xiàn)的:一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基,其包括發(fā)酵培養(yǎng)基a和發(fā)酵培養(yǎng)基b;所述發(fā)酵培養(yǎng)基a首先添加,然后間隔12h以上添加發(fā)酵培養(yǎng)基b。進(jìn)一步地,所述發(fā)酵培養(yǎng)基a的制備方法為:取各原料:葡萄糖,酵母浸膏,k2hpo4,mgso4·7h2o,2-羥基乙胺,cecl3,mnso4·h2o,feso4·7h2o,vb1,生物素;將各原料攪拌均勻后,調(diào)節(jié)ph,**,制得發(fā)酵培養(yǎng)基a。進(jìn)一步地,所述發(fā)酵培養(yǎng)基b的制備方法為:取各原料:琥珀酸,尿素,殼聚糖;將各原料攪拌均勻后,調(diào)節(jié)ph,**,制得發(fā)酵培養(yǎng)基b。推薦地,所述發(fā)酵培養(yǎng)基a的制備方法為:取各原料:葡萄糖50-100g/l,酵母浸膏10-30g/l,k2hpo41-5g/l。貴州減血清培養(yǎng)基進(jìn)貨價