PBS緩沖液,是生物化學(xué)研究中使用**為***的一種緩沖液,主要成分為Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl,一般作為溶劑,起溶解保護試劑的作用。由于Na2HPO4和KH2PO4有二級解離,緩沖的pH值范圍很廣,而NaCl和KCl主要作用為增加鹽離子濃度。如有需要PBS還可以補加1 mmol/L CaCl2和0.5 mmol/L MgCl2,以提供二價陽離子。
配制方法播報稱取8.0g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4、0.24g KH2PO4溶于800mL蒸餾水中,用HCl調(diào)節(jié)溶液至7.4,***加蒸餾水定容至1L即可得0.01M PBS緩沖液。作用播報PBS是磷酸緩沖鹽溶液的簡稱,不僅偽狂犬病毒要用它稀釋,一般的有活性的生物制劑都要用它來稀釋。原因就是它具有鹽平衡、可調(diào)整的適宜pH緩沖作用,蒸餾水不具有鹽平衡作用,可以破壞生物蛋白的結(jié)構(gòu)及生物特性;生理鹽水不具有調(diào)整pH的作用,對完整的、具有活性的物質(zhì)不能保證其在**適條件下參與生物反應(yīng),所以使用PBS是優(yōu)先。在細胞培養(yǎng)中,它通常用于洗滌傳代培養(yǎng)中的細胞,以及在計數(shù)細胞時作為稀釋溶液。 [2]PBS也不是***的,有的生物活性物質(zhì)需要的條件比PBS還要高,就需要在平衡緩沖液中加入更多的成分,維持比較好的條件保證生物活性物質(zhì)保持其**完整的特性 [1]。 常用作緩沖溶液的酸類由弱酸及其共軛酸鹽組合成的溶液具有緩沖作用。福建DPBS緩沖液一般多少錢
所有操作均應(yīng)在通風(fēng)櫥中進行,與苯酚接觸過的皮膚部位應(yīng)用大量水清洗,并用肥皂和水洗滌,忌用乙醇。3.苯酚平衡:因為在酸性pH條件下DNA分配于有機相,因此使用苯酚前必須對苯酚進行平衡使其pH值達到,苯酚平衡操作方法如下:①液化苯酚應(yīng)貯存于-20℃,此時的苯酚呈結(jié)晶狀態(tài)。從冰柜中取出的苯酚首先在室溫下放置使其達到室溫,然后在68℃水浴中使苯酚充分融解。②加入羥基喹啉(8-Quinolinol)至終濃度。該化合物是一種還原劑、RNA酶的不完全抑制劑及金屬離子的弱螯合劑,同時因其呈黃色,有助于方便識別有機相。③加入等體積的1MTris-HCl(),使用磁力攪拌器攪拌15分鐘,靜置使其充分分層后,除去上層水相。④重復(fù)操作步驟③。⑤加入等體積的MTris-HCl(),使用磁力攪拌器攪拌15分鐘,靜置使其充分分層后,除去上層水相。⑥重復(fù)操作步驟⑤,稍微殘留部分上層水相。⑦使用pH試紙確認有機相的pH值大于。⑧將苯酚置于棕色玻璃瓶中4℃避光保存。苯酚/氯仿/異戊醇(25:24:1)配制方法:1.說明:從核酸樣品中除去蛋白質(zhì)時常常使用苯酚/氯仿/異戊醇(25:24:1)。氯仿可使蛋白質(zhì)變性并有助于液相與有機相的分離,而異戊醇則有助于消除抽提過程中出現(xiàn)的氣泡。吉林PBS緩沖液價格查詢生物緩沖液是一種能夠保持pH值不受酸堿度影響的溶液。
在生化研究工作中,常常需要使用緩沖溶液來維持實驗體系的酸堿度。研究工作的溶液體系pH值的變化往往直接影響到研究工作的成效。如果“提取酶”實驗體系的pH值變動或大幅度變動,酶活性就會下降甚至完全喪失。所以配制緩沖溶液是一個不可或缺的關(guān)鍵步驟。緩沖溶液是無機化學(xué)及分析化學(xué)中的重要概念,緩沖溶液是指具有能夠維持PH相對穩(wěn)定性能的溶液。pH值在一定的范圍內(nèi)不因稀釋或外加少量的酸或堿而發(fā)生***的變化,緩沖溶液依據(jù)共軛酸堿對及其物質(zhì)的量不同而具有不同的pH值和緩沖容量。
磷酸鹽緩沖液取磷酸二氫鈉,與磷酸氫二鈉。磷酸鹽緩沖液()甲液:取磷酸,加水至1000ml,搖勻。乙液:取磷酸氫二鈉,加水使溶解成1000ml。取上述甲液,搖勻,即得。磷酸鹽緩沖液()取磷酸二氫鉀100g,加水800ml,用鹽酸調(diào)節(jié)pH至。磷酸鹽緩沖液()取,即得。磷酸鹽緩沖液()取磷酸二氫鉀,即得。磷酸鹽緩沖液()取磷酸二氫鉀,用水稀釋至100ml,即得。磷酸鹽緩沖液()取磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉,加水使溶解成400ml,即得。磷酸鹽緩沖液(含胰酶)()取磷酸二氫鉀;另取胰酶10g,加水適量使溶解,將兩液混合后,加水稀釋至1000ml,即得。磷酸鹽緩沖液()取,加,用水稀釋至1000ml,搖勻,即得。磷酸鹽緩沖液()取磷酸二氫鉀,加,用水稀釋至100ml,即得。磷酸鹽緩沖液()取,加新沸過的冷水稀釋至200ml,搖勻,即得。磷酸鹽緩沖液()取磷酸氫二鈉,調(diào)節(jié)pH值至,即得。磷酸鹽緩沖液()取磷酸二氫鉀,加,用水稀釋至200ml,即得。磷酸鹽緩沖液()取磷酸二氫鉀,加水使溶解成1000ml,取50ml,加,再加水稀釋至200ml,即得。磷酸鹽緩沖液()甲液:取磷酸氫二鈉,加水溶解,并稀釋至500ml。乙液:取磷酸二氫鈉,加水溶解,并稀釋至100ml。取上述甲液,搖勻,即得。磷酸鹽緩沖液(~)取磷酸氫二鉀。在生化實驗或研究工作中要慎重地選擇緩沖體系,因為有時影響實驗結(jié)果的因素并不是緩沖液的pH值。
假設(shè)緩沖溶液里含有弱酸HA以及它的共軛堿。在溶液里發(fā)生的質(zhì)子反應(yīng)為:水合氫離子的濃度取決于弱酸與其共軛堿的濃度比。當(dāng)加入少量強堿時,酸被中和,導(dǎo)致了氫氧根離子在溶液中很少累積,從而的濃度增加,的濃度減少??梢钥吹剑m然加入了強堿,但是溶液里的氫氧根離子變化很少,同時, 濃度較大,相對的變化小,兩者比值幾乎無變化,因此根據(jù)公式,水合氫離子的濃度變化很小。加入弱酸則是同樣的道理。由于在 大濃度基數(shù)上的微小變化不會改變比值,也因此維持了體系內(nèi)氫離子和氫氧根離子濃度的平衡。 [1]酸和鹽濃度等比例增減時,溶液的pH值不變。天津無酚紅緩沖液供應(yīng)商
在進行pH計校準(zhǔn)時,首先需要選擇合適的pH緩沖溶液。福建DPBS緩沖液一般多少錢
pH緩沖液的配制及其保存:1.pH標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)應(yīng)保存在干燥的地方,如混合磷酸鹽pH標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在空氣濕度較大時就會發(fā)生潮解,一旦出現(xiàn)潮解,pH標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)即不可使用。2.配制pH標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)使用二次蒸餾水或者是去離子水。如果是用于0.1級pH計測量,則可以用普通蒸餾水。3.配制pH標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)使用較小的燒杯來稀釋,以減少沾在燒杯壁上的pH標(biāo)準(zhǔn)液。存放pH標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的塑料袋或其它容器,除了應(yīng)倒干凈以外,還應(yīng)用蒸餾水多次沖洗,然后將其倒入配制的pH標(biāo)準(zhǔn)溶液中,以保證配制的pH標(biāo)準(zhǔn)溶液準(zhǔn)確無誤。4.配制好的標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液一般可保存2—3個月,如發(fā)現(xiàn)有渾濁、發(fā)霉或沉淀等現(xiàn)象時,不能繼續(xù)使用。5.堿性標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)裝在聚yi烯瓶中密閉保存。防止二氧化碳進入標(biāo)準(zhǔn)溶液后形成碳酸,降低其pH值。福建DPBS緩沖液一般多少錢