中國香港重組胰酶常用知識

    但分子構(gòu)型有很大區(qū)別。沉降系數(shù)S20W為，pI=，熱穩(wěn)定性較牛胰蛋白酶穩(wěn)定，Ca2+對酶的保護作用不及牛羊的明顯，無螯合Ca2+的中心部位。有6對二硫鍵，斷裂1~2個鍵，均不至于破壞酶分子的完整結(jié)構(gòu)而保護了酶的活性。酶的活力分別相當(dāng)于牛的72%及羊的61%。羊胰蛋白酶與牛、豬的相似，但其活力略高于牛和豬的。胰蛋白酶專一作用有堿性氨基酸精氨酸及賴氨酸羧基所組成的肽鍵。酶本身很容易自溶，由原先的β-胰蛋白酶酶轉(zhuǎn)化為α-胰蛋白酶，再進一步降解為擬胰蛋白酶，乃至碎片，活力也逐步下降而喪失。除存在于脊椎動物外，還存在于蠶、海盤車、蝲姑、放線菌等范圍***的生物體中。另外與高等動物的血液凝固和癥等有關(guān)的凝血酶、纖溶酶、舒血管素等蛋白酶在化學(xué)結(jié)構(gòu)和特異性等方面與胰蛋白酶具有密切的關(guān)系，可以認為這些酶是從共同的祖先酶在進化過程中分化而來的。胰糜蛋白酶與彈性蛋白酶在結(jié)構(gòu)和催化機制方面也具有密切關(guān)系，但其特異性則完全不同。胰蛋白酶系自牛、羊或豬胰中提取的一種蛋白水解酶。***品標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定按干燥品計算，每1mg的效價不得少于2500單位。由牛、羊、豬胰臟提取而得的一種肽鏈內(nèi)切酶。如果消化液中含有胰酶和EDTA，好去除。中國香港重組胰酶常用知識

    胰蛋白酶試劑同酶速率法測定。胰蛋白酶操作方法同酶速率法測定。胰蛋白酶正常值（1）RIA法：陰性。（2）酶速率法（37℃）：十二指腸液：150～600μg/ml胰蛋白酶化驗結(jié)果臨床意義（1）升高：急性胰腺、慢性胰腺（復(fù)發(fā)期）、胰腺*、腎功能不全等。（2）降低：胰腺外分泌功能不全（慢性胰腺后期）。胰蛋白酶附注急性胰腺時血清胰蛋白酶可上升至正常人的2～400倍，一般在10～15天**正常。胰蛋白酶相關(guān)疾病急性胰腺、慢性胰腺、胰腺*[4]胰蛋白酶生物*品說明胰蛋白酶*理作用胰蛋白酶為肽鏈內(nèi)切酶，對精氨酸和賴氨酸肽鏈具有選擇性水解作用，可使天然蛋白、變性蛋白、纖維蛋白和黏蛋白等水解為多肽或氨基酸。由于血清中含有非特異性抑肽酶，故胰蛋白酶不會消化正常**，而能分解黏痰、膿性痰等黏性分泌物，能促進***、化療*物向病灶滲透。胰蛋白酶適應(yīng)證1.用于膿胸、血胸、外科癥、潰瘍、創(chuàng)傷性損傷、婁管等所產(chǎn)生的局部水腫、血腫、膿腫。2.用于呼吸道疾患溶解黏痰和膿性痰。3.用于***毒蛇咬傷，曾試用于竹葉青、銀環(huán)蛇、眼鏡蛇、蝮蛇等毒蛇咬傷的各型病人800余例，均獲***。胰蛋白酶禁忌證1.肝腎出血、出血傾向及結(jié)核性膿腫患者禁用。2.不可用于急性癥及出血空腔中。內(nèi)蒙古重組胰酶常用知識有些胰酶溶液里含有酚紅作為PH值指示劑。

    只斷裂賴氨酸或精氨酸胰蛋白酶原的***過程的羧基參胰蛋白酶降解物分析與形成的肽鍵。白色或米黃色結(jié)晶性粉末。溶于水，不溶于乙醇、甘油、氯仿和**。分子量24000，pI，**適pH值～。pH>。Ca2+對酶活性有穩(wěn)定作用；重金屬離子、有機磷化合物、DFP、天然胰蛋白酶**劑對其活性有強烈**。臨床用于抗消腫，工業(yè)上用于皮革制造、生絲處理、食品加工等。胰蛋白酶*典標(biāo)準(zhǔn)胰蛋白酶來源含量本品系自豬、羊或牛胰中提取的蛋白分解酶。按干燥品計算，每1mg中胰蛋白酶的活力不得少于2500單位。胰蛋白酶制法要求本品應(yīng)從檢*合格的牛、羊或豬胰中提取，生產(chǎn)過程應(yīng)符合現(xiàn)行版《*品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》的要求。胰蛋白酶性狀本品為白色或類白色結(jié)晶性粉末。胰蛋白酶鑒別取本品約2mg，置白色點滴板上，加對甲苯磺酰-L-精氨酸甲酯鹽酸鹽試液，即顯紫色。胰蛋白酶檢查酸度取本品，加水溶解并制成每1ml中含2mg的溶液，依法測定（2010年版*典二部附錄ⅥH），pH值應(yīng)為～。溶液的澄清度取本品，加，依法檢查（2010年版*典二部附錄ⅨB），溶液應(yīng)澄清。糜蛋白酶-底物溶液的制備取N-乙酰-L-酪氨酸乙酯，置100ml量瓶中，加磷酸鹽緩沖液（取，混合，pH值為）50ml，溫?zé)崾谷芙?，冷卻后再稀釋至刻度，搖勻。

    使**或細胞片分散成單個細胞，制成細胞懸液用于進一步的實驗。影響消化速度的因素較多，主要有胰酶溶液的活性（配制條件、凍存或4℃保存時間長短、是否反復(fù)凍融、化凍后存放時間及溫度等）、消化時的溫度（氣溫、細胞培養(yǎng)瓶及胰酶溶液的溫度）以及所加胰酶溶液的多少等。加入胰蛋白酶-EDTA溶液，視細胞瓶的大小加入體積為2ml或更多（依培養(yǎng)器皿的大小而定），以使充分浸潤；一般消化時間約為1至3分鐘，肉眼觀察瓶底由半透明（細胞單層連接成片）轉(zhuǎn)為透明、點狀（出現(xiàn)細小空隙）時，棄去細胞消化液，或看見培養(yǎng)瓶壁呈白茫狀即可。并加入適量的完全培養(yǎng)液終止消化，吹打分散；如見大量細胞片狀脫落，已消化過頭，則不能頃倒消化液而直接進行下一步操作。（消化過頭，可造成大量細胞從瓶壁上脫下，甚至造成細胞破碎。由于血清含有非特異性胰蛋白酶抑制劑，所以加入完全培養(yǎng)基可以終止反應(yīng)。胰酶配置方法：1、培養(yǎng)液配制，方便好用，對細胞影響小，并且培養(yǎng)液的ph值正好適合胰蛋白酶的溶解2、生理鹽水配制，要先調(diào)ph值（①胰酶（1：250）克②EDTA-Na③NaCl④KCl⑤Glucose⑥PhenolRed⑦Water1000mL磁力攪拌2-3小時，調(diào)pH，過濾**。）3、pbs（：稱取胰酶粉末。胰酶用0.05%還是0.25%的？需不需要含酚紅的？

    細胞培養(yǎng)胰蛋白酶生物制品簡介中文名稱:胰蛋白酶中文同義詞:胰蛋白酶;胰蛋白酶1：250（豬胰臟）;胰蛋白酶1：300（豬胰臟）;胰淀粉酶;胰液酵素;胰酶-EDTA溶液;胰蛋白酶1:250;蛋白酶類英文名稱:Trypsin英文同義詞:TRYPSIN;TRYPSIN,1-250;TRYPSIN,1-300;TRYPSIN-EDTA;TRYPSIN,HUMANPANCREAS;TRYPSINPORCINE;TRYPSIN,PORCINEPANCREAS;CAS號:9002-07-7分子式:C6H15O12P3分子量:≈24000EINECS號:232-650-8胰蛋白酶物化性質(zhì)胰蛋白酶是從牛、豬、羊的胰臟提取，純化獲得的結(jié)晶，再制成的凍干制劑。易溶于水，不溶于三氯甲烷、乙醇、**等有機溶劑。在，短時間煮沸幾乎不失活；在堿溶液中加熱則變性沉淀，Ca2+有保護和***作用，胰蛋白酶的等電點為。牛胰蛋白酶原有229個氨基酸組成，含6對二硫鍵，其氨基酸排列順序和晶體結(jié)構(gòu)已被闡明。在腸激酶活自身催化下，酶原的N末端賴氨酸與異亮氨酸殘基之間的肽鍵被水解，釋放出來纈-天-天-天-天-賴6肽，生成有活性的胰蛋白酶。牛的胰蛋白酶氨基酸殘基223個，分子量23800[2]，活性部位的絲氨酸殘基是不可缺少的絲氨酸蛋白酶。豬胰蛋白酶的化學(xué)結(jié)構(gòu)與牛胰蛋白酶十分相似，在氨基酸殘基排列順序中，只有41個氨基酸殘基不同。胰酶的使用濃度是多少？中國香港重組胰酶常用知識

消化液經(jīng)過過濾除菌,可以直接用于培養(yǎng)細胞的消化,或者一些組織的消化。中國香港重組胰酶常用知識

品名：0.25%胰蛋白酶溶液，1X分類：細胞消化試劑規(guī)格：100ML用途：消化試劑，如胰蛋白酶，被用于將粘附細胞從其附著的表面或底物上分離和降解，以及將組織進行游離，以開展原代細胞培養(yǎng)。產(chǎn)品包括2種常用濃度的γ照射豬胰蛋白酶（1：250）以及一種新型非哺乳動物豬胰蛋白酶替代品，稱為ThermoScientificHyQTaseTM.HyQTase是一種蛋白水解酶和膠原水解酶的混合超濾溶液，可以快速消化，同時不損傷細胞。其非哺乳動物配方使它適用于無血清應(yīng)用，不需要失效或?qū)γ敢种苿?。此試劑可使細胞被快速分離，形成單細胞懸浮物，保持高細胞活力，并使傳代時的變異減至**小。中國香港重組胰酶常用知識