制備PBS緩沖液的方法制備PBS緩沖液非常簡(jiǎn)單,以下是制備1升10×PBS緩沖液的方法:13.將800ml的去離子水加入大容量燒杯中。14.將8g的氯化鈉(NaCl)和0.2g的磷酸二氫鉀(KH2PO4)加入燒杯中,用玻璃棒攪拌均勻。15.用去離子水將溶液補(bǔ)足至1升,繼續(xù)攪拌至完全溶解。16.用蓋子或保鮮膜覆蓋燒杯,將燒杯放入冰箱中冷藏保存。注:若需要使用1×PBS緩沖液,只需取10×PBS緩沖液適量稀釋即可。
制備PBS緩沖液的方法制備PBS緩沖液非常簡(jiǎn)單,以下是制備1升10×PBS緩沖液的方法:13.將800ml的去離子水加入大容量燒杯中。14.將8g的氯化鈉(NaCl)和0.2g的磷酸二氫鉀(KH2PO4)加入燒杯中,用玻璃棒攪拌均勻。15.用去離子水將溶液補(bǔ)足至1升,繼續(xù)攪拌至完全溶解。16.用蓋子或保鮮膜覆蓋燒杯,將燒杯放入冰箱中冷藏保存。注:若需要使用1×PBS緩沖液,只需取10×PBS緩沖液適量稀釋即可。 緩沖液是一種能在加入少量酸或堿時(shí)抵抗pH改變的溶液。河南PBS緩沖液產(chǎn)品介紹
所有操作均應(yīng)在通風(fēng)櫥中進(jìn)行,與苯酚接觸過(guò)的皮膚部位應(yīng)用大量水清洗,并用肥皂和水洗滌,忌用乙醇。3.苯酚平衡:因?yàn)樵谒嵝詐H條件下DNA分配于有機(jī)相,因此使用苯酚前必須對(duì)苯酚進(jìn)行平衡使其pH值達(dá)到,苯酚平衡操作方法如下:①液化苯酚應(yīng)貯存于-20℃,此時(shí)的苯酚呈結(jié)晶狀態(tài)。從冰柜中取出的苯酚首先在室溫下放置使其達(dá)到室溫,然后在68℃水浴中使苯酚充分融解。②加入羥基喹啉(8-Quinolinol)至終濃度。該化合物是一種還原劑、RNA酶的不完全抑制劑及金屬離子的弱螯合劑,同時(shí)因其呈黃色,有助于方便識(shí)別有機(jī)相。③加入等體積的1MTris-HCl(),使用磁力攪拌器攪拌15分鐘,靜置使其充分分層后,除去上層水相。④重復(fù)操作步驟③。⑤加入等體積的MTris-HCl(),使用磁力攪拌器攪拌15分鐘,靜置使其充分分層后,除去上層水相。⑥重復(fù)操作步驟⑤,稍微殘留部分上層水相。⑦使用pH試紙確認(rèn)有機(jī)相的pH值大于。⑧將苯酚置于棕色玻璃瓶中4℃避光保存。苯酚/氯仿/異戊醇(25:24:1)配制方法:1.說(shuō)明:從核酸樣品中除去蛋白質(zhì)時(shí)常常使用苯酚/氯仿/異戊醇(25:24:1)。氯仿可使蛋白質(zhì)變性并有助于液相與有機(jī)相的分離,而異戊醇則有助于消除抽提過(guò)程中出現(xiàn)的氣泡。江西HBSS緩沖液哪家便宜PBS溶液一般指磷酸緩沖鹽溶液,不可以喝。
Buffer組份濃度:137mMNaCl,mMKCl,10mMNa2HPO4,2mMKH2PO4配制量:1L配制方法:1.稱量下列試劑,置于1L燒杯中。2.向燒杯中加入約800ml的去離子水,充分?jǐn)嚢枞芙狻?.滴加濃鹽酸將pH值調(diào)節(jié)至,然后加入去離子水將溶液定容至1L。4.高溫高壓**后,室溫保存。注意:上述Buffer中無(wú)二價(jià)陽(yáng)離子,如需要,可在配方中補(bǔ)充1mMCaCl2和mMMgCl2。10M醋酸銨組份濃度:10M醋酸銨配制量:100ml配制方法:1.稱量g醋酸銨置于100~200ml燒杯中,加入約30ml的去離子水?dāng)嚢枞芙狻?.加去離子水將溶液定容至100ml。3.使用mm濾膜過(guò)濾**。4.密封瓶口于室溫保存。注意:醋酸銨受熱易分解,所以不能高溫高壓**。Tris-HCl平衡苯酚配制方法:1.使用原料:大多數(shù)市售液化苯酚是清亮無(wú)色的,無(wú)需重蒸餾便可用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。但有些液化苯酚呈粉紅色或黃色,應(yīng)避免使用。同時(shí)也應(yīng)避免使用結(jié)晶苯酚,結(jié)晶苯酚必須在160℃對(duì)其進(jìn)行重蒸餾除去諸如醌等氧化產(chǎn)物,這些氧化產(chǎn)物可引起磷酸二酯鍵的斷裂或?qū)е翿NA和DNA的交聯(lián)等。因此,苯酚的質(zhì)量對(duì)DNA、RNA的提取極為重要,我們推薦使用高質(zhì)量的苯酚進(jìn)行分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。2.操作注意:苯酚腐蝕性極強(qiáng),并可引起嚴(yán)重灼傷,操作時(shí)應(yīng)戴手套及防護(hù)鏡等。
淀粉酶活力的測(cè)定中緩沖液有什么作用
緩沖液1)緩沖溶液作用原理和pH值當(dāng)往某些溶液中加入一定量的酸和堿時(shí),有阻礙溶液pH變化的作用,稱為緩沖作用,這樣的溶液叫做緩沖溶液.弱酸及其鹽的混合溶液(如HAc與NaAc),弱堿及其鹽的混合溶液(如NH3·H2O與NH4Cl)等都是緩沖溶液.由弱酸HA及其鹽NaA所組成的緩沖溶液對(duì)酸的緩沖作用,是由于溶液中存在足夠量的堿A-的緣故.當(dāng)向這種溶液中加入一定量的強(qiáng)酸時(shí),H離子基本上被A-離子消耗:所以溶液的pH值幾乎不變;當(dāng)加入一定量強(qiáng)堿時(shí),溶液中存在的弱酸HA消耗OH-離子而阻礙pH的變化.2)緩沖溶液的緩沖能力在緩沖溶液中加入少量強(qiáng)酸或強(qiáng)堿,其溶液pH值變化不大,但若加入酸,堿的量多時(shí),緩沖溶液就失去了它的緩沖作用.這說(shuō)明它的緩沖能力是有一定限度的. PB緩沖液:是普通的緩沖溶液,在化學(xué)反應(yīng)、合成反應(yīng)等化學(xué)領(lǐng)域廣泛應(yīng)用。
緩沖液的作用和使用注意事項(xiàng)
一、緩沖液的概念緩沖液(Buffersolution)通常是由弱酸及其共軛堿或弱堿及其共軛酸緩沖對(duì)所組成的溶液,能夠在加入一定量其他物質(zhì)時(shí)減緩pH的改變。以生物實(shí)驗(yàn)中**常用的一種緩沖液PBS為例,是由Na2HPO4、KH2PO4組成的緩沖對(duì),在PH5.8-8.0范圍內(nèi)有較強(qiáng)的緩沖能力。二、緩沖液的作用緩沖溶液的作用是在有限的范圍內(nèi)調(diào)整溶液的pH值,使待測(cè)溶液的酸度符合分析方法所規(guī)定的范圍。例如,苯酚在堿性介質(zhì)及鐵**鉀存在下,可與4-氨基安替比林反應(yīng)生成橙紅色的安替比林染料,為了防止芳香胺類的干擾以pH在10士0.2時(shí)**為適宜。為此,就需要在待測(cè)溶液中加入氨一氯化錢緩沖溶液調(diào)整和控制待測(cè)溶液的pH為10.0士0.2。 此外,PBS緩沖液也可能會(huì)對(duì)皮膚產(chǎn)生一定的刺激性,長(zhǎng)期使用可能會(huì)導(dǎo)致皮膚老化和干燥。廣西DPBS緩沖液牌子
生物緩沖液是一種能夠保持pH值不受酸堿度影響的溶液。河南PBS緩沖液產(chǎn)品介紹
3.高溫高壓**后,4℃保存。SolutionI(質(zhì)粒提取用)組份濃度:25mMTris-HCl(),10mMEDTA,50mMGlucose配制量:1L配制方法:1.量取下列溶液,置于1L燒杯中。2.高溫高壓**后,4℃保存。3.使用前每50ml的SolutionI中加入2ml的RNaseA(20mg/ml)。SolutionII(質(zhì)粒提取用)組份濃度:200mMNaOH,1%(W/V)SDS配制量:500ml配制方法:1.量取下列溶液,置于500ml燒杯中10%SD50ml2NNaOH50ml2.加**水定容至500ml,充分混勻3.室溫保存,此溶液保存時(shí)間比較好不要超過(guò)一個(gè)月注意:SDS易產(chǎn)生氣泡,不要?jiǎng)×覕嚢鑃olutionIII(質(zhì)粒提取用)組份濃度:3MKOAc,5MCH3COOH配制量:500ml配制方法:1.稱量下列試劑,置于500ml燒杯中。2.加入300ml去離子水后攪拌溶解。3.加去離子水將溶液定容至500ml。4.高溫高壓**后,4℃保存。MEDTA()組份濃度:MEDTA配制量:1L配制方法:1.稱取gNa2EDTA·2H2O,置于1L燒杯中。2.加入約800ml的去離子水,充分?jǐn)嚢琛?.用NaOH調(diào)節(jié)pH值至(約20gNaOH)。注意:pH值至,EDTA才能完全溶解。4.加去離子水將溶液定容至1L。5.適量分成小份后,高溫高壓**。6.室溫保存。1MDTT組份濃度:1MDTT配制量:20ml配制方法:1.稱取gDTT,加入到50ml塑料離心管內(nèi)。2.加20ml的MNaOAc()。河南PBS緩沖液產(chǎn)品介紹