河北Ham's F12培養(yǎng)基技術(shù)指導(dǎo)

    所描述的實(shí)施例**是本申請(qǐng)一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例?；诒旧暾?qǐng)中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒(méi)有作出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都應(yīng)當(dāng)屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。實(shí)施例1一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基，其包括發(fā)酵培養(yǎng)基a和發(fā)酵培養(yǎng)基b；所述發(fā)酵培養(yǎng)基a首先添加，然后間隔24h添加發(fā)酵培養(yǎng)基b。所述發(fā)酵培養(yǎng)基a的制備方法為：取各原料：葡萄糖80g/l，酵母浸膏20g/l，k2hpo42g/l，mgso4·7h2o50mg/l，2-羥基乙胺40mg/l，cecl310mg/l，mnso4·h2o3mg/l，feso4·7h2o3mg/l，vb110mg/l，生物素7μg/l；將各原料攪拌均勻后，調(diào)節(jié)ph為，121℃**15min，自然冷卻，制得發(fā)酵培養(yǎng)基a；所述發(fā)酵培養(yǎng)基b的制備方法為：取各原料：琥珀酸5g/l，尿素2g/l，殼聚糖80mg/l；將各原料攪拌均勻后，調(diào)節(jié)ph為，121℃**15min，自然冷卻，制得發(fā)酵培養(yǎng)基b；采用常規(guī)發(fā)酵工藝：將黃色短桿菌gdk-9按8％接種量將種子液（od600nm為）接入裝有60l發(fā)酵培養(yǎng)基a的100l發(fā)酵罐中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，發(fā)酵培養(yǎng)24h，然后添加10l發(fā)酵培養(yǎng)基b，繼續(xù)發(fā)酵培養(yǎng)24h，收集發(fā)酵液；整個(gè)發(fā)酵培養(yǎng)過(guò)程中，控制發(fā)酵溫度35℃，通風(fēng)比1∶，攪拌轉(zhuǎn)速300r/min，溶氧維持在20％。無(wú)血清培養(yǎng)基適合于無(wú)血清環(huán)境的細(xì)胞培養(yǎng)。河北Ham's F12培養(yǎng)基技術(shù)指導(dǎo)

    如何正確地使用培養(yǎng)基及**大程度地保持培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)以維持細(xì)胞的生長(zhǎng)，對(duì)每個(gè)培養(yǎng)者都很重要。培養(yǎng)基的使用依不同的培養(yǎng)基種類、培養(yǎng)方式、細(xì)胞種類的不同而存在差異。細(xì)胞培養(yǎng)液的構(gòu)成細(xì)胞培養(yǎng)液指細(xì)胞生長(zhǎng)的液體環(huán)境，一般指完全培養(yǎng)液，添加了血清、水解乳蛋白、各種添加劑等可以直接使用的培養(yǎng)液。細(xì)胞培養(yǎng)基&血清模式血清對(duì)于在傳統(tǒng)培養(yǎng)基配方中生長(zhǎng)和增殖的大多數(shù)細(xì)胞系來(lái)說(shuō)是需要的，因?yàn)榇蠖鄶?shù)單獨(dú)的培養(yǎng)基并不能提供細(xì)胞生長(zhǎng)所需要的全部營(yíng)養(yǎng)，如MEM培養(yǎng)基，較為常用的量為5％～10％的比例，而特殊的低血清培養(yǎng)基血清量可降至3％左右，細(xì)胞的形態(tài)和功能不受影響。細(xì)胞培養(yǎng)基&乳歐液模式化學(xué)合成培養(yǎng)基現(xiàn)雖已大規(guī)模使用，但在某些培養(yǎng)領(lǐng)域水解乳蛋白仍在使用，以補(bǔ)充培養(yǎng)液中缺乏的氨基酸、小肽物質(zhì)。較為常用的方式是用漢氏（Hanks’BSS）或歐式(Earle’sBSS)平衡液溶解水解乳蛋白（一般為5‰濃度），即成乳漢（歐）液，再與化學(xué)合成培養(yǎng)基（一般為MEM）按比例混合使用（如1：1）。細(xì)胞培養(yǎng)基&各類添加劑（生長(zhǎng)因子等）模式成分復(fù)雜的培養(yǎng)基還含有許多化合物，包括蛋白質(zhì)、多肽、核苷、檸檬酸循環(huán)的中間產(chǎn)物、**酸及脂類等。湖南無(wú)血清培養(yǎng)基一般多少錢(qián)減血清培養(yǎng)基減少了實(shí)驗(yàn)中血清帶來(lái)的變異性。

    培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基使用說(shuō)明中有加熱溶解后高壓**，有的加熱沸騰后高壓**，見(jiàn)過(guò)一些實(shí)驗(yàn)室，不經(jīng)加熱直接高壓**，也有的實(shí)驗(yàn)室一律加熱沸騰后高壓**。大家是怎們制備的，不加熱或全部沸騰對(duì)檢測(cè)結(jié)果有沒(méi)有影響？品牌：安捷倫型號(hào)：1260Lnifntiy參考報(bào)價(jià)：20萬(wàn)-50萬(wàn)培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基制備后應(yīng)保持一定的透明度，下面制備操作影響比較大的是(??)。A、原料稱量混合溶解B、加熱煮沸，調(diào)PH值C、過(guò)濾、分裝容器D、消毒或**品牌：安捷倫型號(hào)：1260Lnifntiy參考報(bào)價(jià)：20萬(wàn)-50萬(wàn)【求助】培養(yǎng)基制備請(qǐng)問(wèn)牛肉膏與牛肉膏粉的使用有何區(qū)別?可互相替代嗎？使用比例相同嗎？品牌：安捷倫型號(hào)：1260Lnifntiy參考報(bào)價(jià)：20萬(wàn)-50萬(wàn)培養(yǎng)基的制備方法培養(yǎng)基的制備方法以下為常規(guī)方法，如配方中有特殊規(guī)定或要求，以配方為***依據(jù)。1.根據(jù)配方，計(jì)算各種營(yíng)養(yǎng)成分用量。一般*品可用普通*物天平稱量，用量少的*品，可按比例配成高濃度溶液，再按所需量用移液管吸取。稱好的*品放入品牌：安捷倫型號(hào)：1260Lnifntiy參考報(bào)價(jià)：20萬(wàn)-50萬(wàn)【求助】培養(yǎng)基制備系統(tǒng)哪位大蝦有關(guān)于培養(yǎng)基制備系統(tǒng)相關(guān)的資料，原理、應(yīng)用、品牌、技術(shù)對(duì)比等越詳細(xì)越好。

    文獻(xiàn)2“混合硝酸稀土對(duì)谷氨酸產(chǎn)生菌的影響，氨基酸雜志”發(fā)現(xiàn)，在發(fā)酵培養(yǎng)基中添加一定量的稀土元素，能夠提高谷氨酸的產(chǎn)量。申請(qǐng)人之前的**技術(shù)“一種谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基制備方法”，在常規(guī)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上進(jìn)行了改進(jìn)，通過(guò)添加菌體蛋白浸膏來(lái)替代酵母膏氮源，不但節(jié)約了成本，還能提高氨基酸發(fā)酵產(chǎn)率，一舉兩得。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：在已有發(fā)酵培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上，申請(qǐng)人針對(duì)微生物發(fā)酵的特點(diǎn)，繼續(xù)進(jìn)行了改進(jìn)，以提高發(fā)酵效率，據(jù)此，提出了一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基。本發(fā)明是通過(guò)如下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的：一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基，其包括發(fā)酵培養(yǎng)基a和發(fā)酵培養(yǎng)基b；所述發(fā)酵培養(yǎng)基a首先添加，然后間隔12h以上添加發(fā)酵培養(yǎng)基b。進(jìn)一步地，所述發(fā)酵培養(yǎng)基a的制備方法為：取各原料：葡萄糖，酵母浸膏，k2hpo4，mgso4·7h2o，2-羥基乙胺，cecl3，mnso4·h2o，feso4·7h2o，vb1，生物素；將各原料攪拌均勻后，調(diào)節(jié)ph，**，制得發(fā)酵培養(yǎng)基a。進(jìn)一步地，所述發(fā)酵培養(yǎng)基b的制備方法為：取各原料：琥珀酸，尿素，殼聚糖；將各原料攪拌均勻后，調(diào)節(jié)ph，**，制得發(fā)酵培養(yǎng)基b。推薦地，所述發(fā)酵培養(yǎng)基a的制備方法為：取各原料：葡萄糖50-100g/l，酵母浸膏10-30g/l，k2hpo41-5g/l。減血清培養(yǎng)基提高了實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性。

    1/2cs生長(zhǎng)培養(yǎng)基的培養(yǎng)結(jié)果為：馬鈴薯莖端在1/2cs生長(zhǎng)培養(yǎng)基上的存活率為100％，培養(yǎng)16d的幼苗，表現(xiàn)為植株健壯、平均莖高、平均莖中粗為，葉色濃綠，根系發(fā)達(dá)、平均根數(shù)為8個(gè)。如圖4所示。對(duì)比培養(yǎng)例4：將1/2cs基本培養(yǎng)基替換為1/2ms基本培養(yǎng)基，其余完全同培養(yǎng)實(shí)例4，1/2ms基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。1/2ms生長(zhǎng)培養(yǎng)基的培養(yǎng)結(jié)果為：馬鈴薯莖端在1/2ms生長(zhǎng)培養(yǎng)基上的存活率為100％，培養(yǎng)16d的幼苗，表現(xiàn)為植株健壯、平均莖高、平均莖中粗為，葉色濃綠，根系發(fā)達(dá)、平均根數(shù)為6個(gè)。如圖4所示。培養(yǎng)實(shí)例4和對(duì)比培養(yǎng)例4的培養(yǎng)結(jié)果比較：馬鈴薯莖端在1/2cs生長(zhǎng)培養(yǎng)基和1/2ms生長(zhǎng)培養(yǎng)基上的存活率均為100％；在相同條件下培養(yǎng)16d時(shí)，與1/2ms生長(zhǎng)培養(yǎng)基相比，1/2cs生長(zhǎng)培養(yǎng)基中的幼苗長(zhǎng)勢(shì)更佳，其莖高、莖中粗、根的數(shù)量均優(yōu)于1/2ms生長(zhǎng)培養(yǎng)基。如圖4所示。培養(yǎng)實(shí)例5：哥倫比亞型擬南芥葉片及根愈傷**誘導(dǎo)(1)擬南芥葉片愈傷**誘導(dǎo)培養(yǎng)基：cs基本培養(yǎng)基+，用超純水溶解，。cs基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。(2)擬南芥根愈傷**誘導(dǎo)培養(yǎng)基：cs基本培養(yǎng)基+2,，用超純水溶解，。cs基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。。無(wú)酚紅培養(yǎng)基確保了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。湖南無(wú)血清培養(yǎng)基一般多少錢(qián)

使用減血清培養(yǎng)基可以減少細(xì)胞培養(yǎng)中的血清干擾因素。河北Ham's F12培養(yǎng)基技術(shù)指導(dǎo)

    本氏***葉片及根愈傷**誘導(dǎo)的對(duì)比效果圖，a：葉片愈傷**；b：葉片愈傷**誘導(dǎo)率；c：根愈傷**；d：根愈傷**誘導(dǎo)率；a和c中bar＝；圖7是cs和ms兩種培養(yǎng)基上，水稻成熟胚愈傷**誘導(dǎo)的對(duì)比效果圖，a：水稻成熟胚愈傷**；b：水稻成熟胚愈傷**誘導(dǎo)率；a中bar＝；圖8是用不同ph的超純水(ph為)配制的cs、ms、1/2cs和1/2ms液體培養(yǎng)基ph值穩(wěn)定性比較效果圖；圖9是在未調(diào)ph和將ph調(diào)至、ms、1/2cs和1/2ms液體培養(yǎng)基中馬鈴薯幼苗的生長(zhǎng)狀況的比較效果圖，a：不同液體培養(yǎng)基培養(yǎng)前的無(wú)菌苗生長(zhǎng)情況；b1、c1和d1：1/2ms未調(diào)ph液體培養(yǎng)基培養(yǎng)效果；b2、c2和d2：1/2cs未調(diào)ph液體培養(yǎng)基培養(yǎng)效果；b3、c3和d3：ms未調(diào)ph液體培養(yǎng)基培養(yǎng)效果；b4、c4和d4：cs未調(diào)ph液體培養(yǎng)基培養(yǎng)效果；b5、c5和d5：1/；b6、c6和d6：1/；b7、c7和d7：；b8、c8和d8：；a、b、c和d中bar＝；圖10是對(duì)在未調(diào)ph和將ph調(diào)至、ms、1/2cs和1/2ms液體培養(yǎng)基中馬鈴薯幼苗的莖高(a)、莖中粗(b)、根長(zhǎng)(c)、鮮重(d)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)的比較效果圖。具體實(shí)施方式下面結(jié)合附圖和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步描述。實(shí)施例一，本實(shí)施例廣適性植物**培養(yǎng)基，其每1000ml培養(yǎng)基中含有：kno32662mg、。河北Ham's F12培養(yǎng)基技術(shù)指導(dǎo)