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細(xì)胞培養(yǎng)常用水和平衡鹽溶液的配制方法:水是細(xì)胞賴(lài)以生存的主要環(huán)境,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和代謝產(chǎn)物都必須溶解在水中,才能為細(xì)胞吸收和排泄。而且,水溶液對(duì)維持細(xì)胞形態(tài)、進(jìn)行生物化學(xué)反應(yīng)、溫度傳導(dǎo)、調(diào)節(jié)滲透壓和酸堿度的平衡都有著重要作用。體外培養(yǎng)細(xì)胞對(duì)水的質(zhì)量很敏感,要求很高。水的純度不夠,即使混雜有一些含量極微的有害元素,有時(shí)也會(huì)對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生不利的影響,甚至引起細(xì)胞中毒死亡。因此,配制培養(yǎng)液的水必須經(jīng)過(guò)純化。細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室需要純凈的水,常可分為離子交換水和蒸餾水兩種。前者由于仍然帶有非離子物質(zhì)和有機(jī)物,在組織培養(yǎng)中很少使用。組織培養(yǎng)必須使用玻璃蒸餾器制備的三次蒸餾水;二次蒸餾水或外購(gòu)的金屬蒸餾器制的蒸餾水只能用于清洗器皿,蒸餾水的儲(chǔ)存對(duì)保持水的質(zhì)量有很大影響;周?chē)h(huán)境和空氣能使水污染或改變其pH,所以?xún)?chǔ)存水的容器要盡量減少啟開(kāi)的次數(shù),避免和外界過(guò)多接觸,存放時(shí)間不宜太長(zhǎng),一般不要超過(guò)兩周,**好現(xiàn)制現(xiàn)用。二、平衡鹽溶液(balancedsaltsolution,BSS),主要由無(wú)機(jī)鹽和葡萄糖組成。BSS中的無(wú)機(jī)離子不僅是細(xì)胞生命所需成分,而且在維持滲透壓、緩沖和調(diào)節(jié)溶液的酸堿度方面,起著重要作用。 與 PBS 相比,DPBS 還包括氯化鉀。天津DPBS平衡鹽溶液進(jìn)貨價(jià)
在生物實(shí)驗(yàn)中,選擇合適的緩沖劑對(duì)于維持實(shí)驗(yàn)環(huán)境的穩(wěn)定性和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性至關(guān)重要。在眾多緩沖劑中,HEPES和PBS是兩種***使用的生物緩沖劑。本文將對(duì)比分析HEPES和PBS這兩種緩沖劑的特點(diǎn)和適用場(chǎng)景,幫助您選擇適合您研究需求的緩沖劑。
一、HEPES緩沖劑特點(diǎn)HEPES是一種高pH緩沖劑,具有較好的熱穩(wěn)定性和化學(xué)穩(wěn)定性。它能夠提供穩(wěn)定的pH環(huán)境,適用于多種生物實(shí)驗(yàn)。此外,HEPES還具有一定的抗氧化性能,能夠保護(hù)細(xì)胞免受活性氧的攻擊。使用場(chǎng)景HEPES適用于細(xì)胞培養(yǎng)、分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)、電泳、光譜分析等生物實(shí)驗(yàn)。特別是在細(xì)胞培養(yǎng)中,HEPES可以作為***使用的緩沖劑,提供穩(wěn)定的pH環(huán)境和適宜的離子濃度,促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化。 河南HBSS平衡鹽溶液是什么平衡鹽溶液PBS(Phosphate-Buffered Saline,即磷酸鹽緩沖液)。
(四)PBS液可配成含0.85%NaCl,pH7.2的PBS(簡(jiǎn)稱(chēng)pH7.2PBS)。1.PBS貯存液(10×)配法NaCl8.5gKCl0.2gNa2HP04·12H202.85g(或Na2HP04·2H201.13g)KH2P040.27g溶于100ml雙蒸水中。2.PBS應(yīng)用液配法取貯存液50ml加雙蒸水450m1即成,經(jīng)103kPa(121.3℃)15分鐘滅菌,置室溫或4℃保存?zhèn)溆?。除上述三種常用的平衡鹽溶液外,尚有其他幾種次常用的平衡鹽溶液,如低鈣鎂的Dul-becc。液和無(wú)鈣鎂的D-Hanks液(或CMF-Hanks)等。可用于配制消化液和洗滌細(xì)胞(可防止抑制酶活性和致細(xì)胞凝聚等)。其成分見(jiàn)表1-5,配制方法可參照上述幾種平衡鹽溶液的方法進(jìn)行。
平衡鹽溶液配方比例??平衡鹽溶液的定義、用途和重要性??12平衡鹽溶液(BalancedSaltSolution,BSS)是一種電解質(zhì)含量與血漿內(nèi)含量相仿的鹽溶液,用于維持細(xì)胞滲透壓平衡,保持pH穩(wěn)定及提供簡(jiǎn)單的營(yíng)養(yǎng)。它廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、生物學(xué)研究和臨床***中,特別是在重度缺水或休克狀態(tài)下,使用平衡鹽溶液可以避免輸入過(guò)多的氯離子,減少高氯性酸中毒的風(fēng)險(xiǎn)。?具體配方???乳酸鈉和復(fù)方氯化鈉溶液?:1/3的。??碳酸氫鈉和等滲鹽水溶液?:1/3的。??PBS(磷酸鹽緩沖液)?:,調(diào)節(jié)pH至。??DPBS(無(wú)鈣鎂磷酸鹽緩沖液)?:與PBS相似,但不含有鈣鎂離子。?HEPES緩沖液?:,調(diào)節(jié)pH至。?配置步驟??準(zhǔn)備材料?:準(zhǔn)備好干凈的瓶子、純水和所需的各種化學(xué)試劑。?稱(chēng)量試劑?:根據(jù)配方稱(chēng)量各種試劑。?溶解試劑?:將稱(chēng)量的試劑加入純水中,攪拌至完全溶解。?調(diào)節(jié)pH值?:使用氫氧化鈉或鹽酸將溶液的pH值調(diào)節(jié)至所需范圍(如PBS的pH值為)。?定容和過(guò)濾?:將溶液定容至所需體積,并進(jìn)行高溫高壓滅菌或通過(guò)μm濾膜過(guò)濾除菌。?儲(chǔ)存?:將配制好的溶液冷卻后,密封保存于4℃冰箱中備用。 磷酸鹽緩沖液是一種平衡鹽溶液。
滲透壓平衡和水鹽平衡的定義??:滲透壓平衡是指溶液中溶質(zhì)微粒對(duì)水的吸引力達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡的狀態(tài)。水鹽平衡則是指人體內(nèi)水和氯化鈉等無(wú)機(jī)鹽的攝入量和排出量達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡,維持體內(nèi)含量相對(duì)恒定。?滲透壓平衡的機(jī)制和調(diào)節(jié)過(guò)程?滲透壓平衡是通過(guò)半透膜兩側(cè)的溶液濃度差異來(lái)實(shí)現(xiàn)的。當(dāng)溶液濃度較高時(shí),水分子會(huì)從濃度較低的一側(cè)向濃度較高的一側(cè)移動(dòng),直到兩側(cè)的溶質(zhì)濃度達(dá)到均衡。這種移動(dòng)是通過(guò)水分子通過(guò)半透膜的擴(kuò)散來(lái)實(shí)現(xiàn)的。在體內(nèi),血漿、細(xì)胞內(nèi)液和細(xì)胞外液之間的滲透壓需要保持平衡,以確保細(xì)胞的正常功能和體液的穩(wěn)定。?水鹽平衡的機(jī)制和調(diào)節(jié)過(guò)程?水鹽平衡是通過(guò)神經(jīng)-體液-內(nèi)分泌網(wǎng)絡(luò)的調(diào)節(jié)來(lái)實(shí)現(xiàn)的。下丘腦作為調(diào)節(jié)中樞,根據(jù)體內(nèi)的水和鹽分含量來(lái)調(diào)節(jié)抗******的分泌。當(dāng)體內(nèi)水分過(guò)多或鹽分過(guò)多時(shí),抗******的分泌會(huì)減少,促進(jìn)尿液排出,以恢復(fù)水和鹽分的平衡。這種調(diào)節(jié)機(jī)制確保了體內(nèi)水和鹽分的動(dòng)態(tài)平衡,維持了正常的生理功能。?總結(jié)兩者的區(qū)別?滲透壓平衡主要涉及溶液中溶質(zhì)微粒對(duì)水的吸引力達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡的狀態(tài),而水鹽平衡則是指人體內(nèi)水和氯化鈉等無(wú)機(jī)鹽的攝入量和排出量達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡,維持體內(nèi)含量相對(duì)恒定。滲透壓平衡主要發(fā)生在細(xì)胞內(nèi)外液之間。 平衡鹽溶液細(xì)胞培養(yǎng)緩沖液——PBS/DPBS。山東EBSS平衡鹽溶液進(jìn)口
由于 HBSS 反應(yīng)性低,常用于大氣條件下。天津DPBS平衡鹽溶液進(jìn)貨價(jià)
平衡鹽溶液平衡鹽溶液(BSS)是從Ringer生理鹽水進(jìn)展起來(lái)的,主要由無(wú)機(jī)鹽和葡萄糖組成。BSS中的無(wú)機(jī)離子是細(xì)胞生命的須要成分,在維持滲透壓、緩沖作用和調(diào)整溶液pH方面也起著重要作用。另外,Ca2+、Mg2+能為酶系統(tǒng)的活化提供條件,也是細(xì)胞膜的重要組成成分。等為細(xì)胞代謝提供能量。作為核酸分子的合成也需要S,P等作為基質(zhì)。BSS內(nèi)還含有少量的(酚紅),作為pH變幻的指示劑,溶液變酸性時(shí)呈黃色,變堿性時(shí)呈紫紅色,中性時(shí)呈桃紅色,以此來(lái)觀看和判定培養(yǎng)液pH的變幻。天津DPBS平衡鹽溶液進(jìn)貨價(jià)