寧夏國(guó)產(chǎn)胰酶介紹

淡黃色的胰酶溶液能放心使用嗎？能，對(duì)于胰酶呈黃色的問題，不同品牌也都對(duì)此現(xiàn)象進(jìn)行了測(cè)試實(shí)驗(yàn)。變色的胰酶同樣能很好的用于細(xì)胞的解離，請(qǐng)放心使用。細(xì)胞消化時(shí)，胰酶不去除對(duì)細(xì)胞的影響？細(xì)胞消化時(shí)，如果消化液中只有胰酶，不含EDTA，不去除是沒有問題的。如果消化液中含有胰酶和EDTA，比較好去除。EDTA是一種化學(xué)螯合劑，主要作用在于能螯合Ca、Mg離子，使細(xì)胞分離。但EDTA不能被血清中和，消化后要徹底清洗去除，否則細(xì)胞易脫壁。胰酶胰酶和EDTA聯(lián)合使用可提高消化效率，所以常二者合用。胰酶的保存消化液經(jīng)過過濾除菌,可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞的消化,或者一些組織的消化。寧夏國(guó)產(chǎn)胰酶介紹

0.25%胰酶是細(xì)胞生物學(xué)中常用的一種生物試劑，下面匯總一下胰酶使用過程中常見的一些問題。

胰酶的使用濃度是多少？胰酶濃度：常用0.25%胰酶+0.02%EDTA作為消化液。

胰酶的保存胰酶可在-20℃下保存一年。隨著時(shí)間延長(zhǎng)，胰酶的消化能力減弱。胰酶可分裝凍存，在使用前從-20℃冰箱取出。盡量避免在4℃長(zhǎng)期保存。胰酶使用的時(shí)候要注意什么？（1）在使用胰酶細(xì)胞消化液的過程中要特別注意避免消化液被細(xì)菌污染。（2）胰酶細(xì)胞消化液消化細(xì)胞時(shí)間不宜過長(zhǎng)，否則細(xì)胞鋪板后生長(zhǎng)狀況會(huì)較差。 山東EDTA胰酶介紹胰酶在PH值7.2-8.0的時(shí)候，溶液呈淡紅色。

    胰蛋白酶**點(diǎn)評(píng)胰蛋白酶能使痰、血凝塊溶化變稀，易于引流排痰，加速創(chuàng)面愈合凈化，促進(jìn)肉芽**增生，而不損傷正常**，臨床上有消消腫功能。[4]胰蛋白酶其他胰蛋白酶細(xì)胞培養(yǎng)胰蛋白酶的作用是使細(xì)胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細(xì)胞離散。不同的**或者細(xì)胞對(duì)胰酶的作用反應(yīng)不一樣。胰酶分散細(xì)胞的活性還與其濃度、溫度和作用時(shí)間有關(guān)，在pH為、溫度為37℃時(shí)，胰酶溶液的作用能力**強(qiáng)。使用胰酶時(shí)，應(yīng)把握好濃度、溫度和時(shí)間，以免消化過度造成細(xì)胞損傷。因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白質(zhì)可降低胰酶的活性，所以配制胰酶溶液時(shí)應(yīng)選用不含Ca2+、Mg2+的BSS，如：D-Hanks液。終止消化時(shí)，可用含有血清培養(yǎng)液或者胰酶**劑終止胰酶對(duì)細(xì)胞的作用。1.稱取胰蛋白酶：按胰蛋白酶液濃度為%，用電子天平準(zhǔn)確稱取粉劑溶入小燒杯中的雙蒸水（若用雙蒸水需要調(diào)PH到左右）或PBS（D-hanks）液中。攪拌混勻，置于4℃內(nèi)過夜。2.用注射濾器抽濾消毒：配好的胰酶溶液要在超凈臺(tái)內(nèi)用注射濾器（微米微孔濾膜）抽濾**。3.分裝成小瓶于-20℃保存以備使用可！詞條圖冊(cè)更多圖冊(cè)參考資料1.胰蛋白酶．化學(xué)品數(shù)據(jù)庫[引用日期2017-05-26].***典**會(huì)，***典2010版[M]，北京：**醫(yī)*科技出版社。

乙二胺四乙酸：（EDTA）是一種有機(jī)化合物，常溫常壓下為白色粉末。它是一種能與Mg2+、Ca2+、Mn2+、Fe2+等二價(jià)金屬離子結(jié)合的螯合劑。動(dòng)物細(xì)胞在粘附的時(shí)候，需要有Ca或Mg離子的參與，EDTA與他們結(jié)合后，導(dǎo)致動(dòng)物細(xì)胞粘附能力降低，再加上胰蛋白酶的消化作用，使得細(xì)胞與瓶壁快速脫離。兩者起到了協(xié)同消化的作用。難消化的細(xì)胞，胰酶中可填加EDTA。EDTA對(duì)細(xì)胞貼壁性有影響，因此使用時(shí)要甚重。如果影響貼壁，但消化時(shí)必須要用，那么在用完全培養(yǎng)基終止消化后，可離心棄上清，再加完全培養(yǎng)基培養(yǎng)，可去除EDTA。如果對(duì)貼壁沒影響，那么可不離心。胰酶和胰蛋白酶不一樣，前者包括后者。

1、胰酶是，就是說PBS,注意，盡量不要用水來溶，因?yàn)橐３譂B透壓。2、EDTA的工作液溶度是－，根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度自己調(diào)整。EDTA并不是必須的，容易消化的細(xì)胞可不加。EDTA對(duì)細(xì)胞貼壁性有影響，因此使用時(shí)要甚重。如果影響貼壁，但消化時(shí)必須要用，那么在用完全培養(yǎng)基終止消化后，可離心棄上清，再加完全培養(yǎng)基培養(yǎng)，可去除EDTA。如果對(duì)貼壁沒影響，那么可不離心。3、EDTA的濃度也是質(zhì)量體積比。和胰酶一起溶于PBS。4、注意，血清可終止胰酶的作用，但不能終止EDTA的作用，對(duì)有些細(xì)胞來說，終止消化后的離心是必要的。5、胰酶和EDTA在pH為8左右的時(shí)候**易溶解，在配制時(shí)可先滴幾滴NaOH將pH調(diào)至8，注意，胰酶可使溶液變酸，所以要邊溶邊測(cè)pH，隨時(shí)調(diào)整。注意，不可加過量NaOH，否則過堿，細(xì)胞會(huì)受不了。6、胰酶EDTA相對(duì)比較難溶，可用磁力攪拌器，或放入4度冰箱過夜，待溶解后過濾**。7、可配2－3乘的胰酶，這樣比較節(jié)約時(shí)間和濾器，用的時(shí)候?qū)ι?*PBS即可。8、儲(chǔ)存液放在－20度冰箱凍存，使用液放在4度，用的時(shí)候不要放在27度水浴鍋溫浴，因?yàn)檫@樣會(huì)讓胰酶很快失效，使用前放在室溫下一會(huì)。胰酶PH值6.8左右時(shí)呈淡黃色。山東進(jìn)口胰酶有哪些

胰酶顏色的變化是由PH值的變化引起，歸因于使用干冰運(yùn)輸。寧夏國(guó)產(chǎn)胰酶介紹

    胰蛋白酶試劑同酶速率法測(cè)定。胰蛋白酶操作方法同酶速率法測(cè)定。胰蛋白酶正常值（1）RIA法：陰性。（2）酶速率法（37℃）：十二指腸液：150～600μg/ml胰蛋白酶化驗(yàn)結(jié)果臨床意義（1）升高：急性胰腺、慢性胰腺（復(fù)發(fā)期）、胰腺*、腎功能不全等。（2）降低：胰腺外分泌功能不全（慢性胰腺后期）。胰蛋白酶附注急性胰腺時(shí)血清胰蛋白酶可上升至正常人的2～400倍，一般在10～15天**正常。胰蛋白酶相關(guān)疾病急性胰腺、慢性胰腺、胰腺*[4]胰蛋白酶生物*品說明胰蛋白酶*理作用胰蛋白酶為肽鏈內(nèi)切酶，對(duì)精氨酸和賴氨酸肽鏈具有選擇性水解作用，可使天然蛋白、變性蛋白、纖維蛋白和黏蛋白等水解為多肽或氨基酸。由于血清中含有非特異性抑肽酶，故胰蛋白酶不會(huì)消化正常**，而能分解黏痰、膿性痰等黏性分泌物，能促進(jìn)***、化療*物向病灶滲透。胰蛋白酶適應(yīng)證1.用于膿胸、血胸、外科癥、潰瘍、創(chuàng)傷性損傷、婁管等所產(chǎn)生的局部水腫、血腫、膿腫。2.用于呼吸道疾患溶解黏痰和膿性痰。3.用于***毒蛇咬傷，曾試用于竹葉青、銀環(huán)蛇、眼鏡蛇、蝮蛇等毒蛇咬傷的各型病人800余例，均獲***。胰蛋白酶禁忌證1.肝腎出血、出血傾向及結(jié)核性膿腫患者禁用。2.不可用于急性癥及出血空腔中。寧夏國(guó)產(chǎn)胰酶介紹