文獻(xiàn)2“混合硝酸稀土對谷氨酸產(chǎn)生菌的影響,氨基酸雜志”發(fā)現(xiàn),在發(fā)酵培養(yǎng)基中添加一定量的稀土元素,能夠提高谷氨酸的產(chǎn)量。申請人之前的**技術(shù)“一種谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基制備方法”,在常規(guī)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上進(jìn)行了改進(jìn),通過添加菌體蛋白浸膏來替代酵母膏氮源,不但節(jié)約了成本,還能提高氨基酸發(fā)酵產(chǎn)率,一舉兩得。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:在已有發(fā)酵培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上,申請人針對微生物發(fā)酵的特點(diǎn),繼續(xù)進(jìn)行了改進(jìn),以提高發(fā)酵效率,據(jù)此,提出了一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基。本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的:一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基,其包括發(fā)酵培養(yǎng)基a和發(fā)酵培養(yǎng)基b;所述發(fā)酵培養(yǎng)基a首先添加,然后間隔12h以上添加發(fā)酵培養(yǎng)基b。進(jìn)一步地,所述發(fā)酵培養(yǎng)基a的制備方法為:取各原料:葡萄糖,酵母浸膏,k2hpo4,mgso4·7h2o,2-羥基乙胺,cecl3,mnso4·h2o,feso4·7h2o,vb1,生物素;將各原料攪拌均勻后,調(diào)節(jié)ph,**,制得發(fā)酵培養(yǎng)基a。進(jìn)一步地,所述發(fā)酵培養(yǎng)基b的制備方法為:取各原料:琥珀酸,尿素,殼聚糖;將各原料攪拌均勻后,調(diào)節(jié)ph,**,制得發(fā)酵培養(yǎng)基b。推薦地,所述發(fā)酵培養(yǎng)基a的制備方法為:取各原料:葡萄糖50-100g/l,酵母浸膏10-30g/l,k2hpo41-5g/l。RPMI1640培養(yǎng)基含有多種關(guān)鍵營養(yǎng)成分,支持細(xì)胞生長。河南DMEM高糖培養(yǎng)基有哪些
2-羥基乙胺可以促進(jìn)磷脂酰乙醇胺細(xì)胞壁組分的合成,從而提高菌株增殖速率,后期菌株增殖放緩,以產(chǎn)酸為主,2-羥基乙胺還能夠作為陽離子表面活性劑,使得細(xì)胞壁疏松,提高細(xì)胞通透性,促進(jìn)谷氨酸釋放到發(fā)酵液;cecl3稀土鹽能夠促進(jìn)菌株增殖,提高谷氨酸相關(guān)合成酶的活力,提高谷氨酸的產(chǎn)量;但是過高的濃度會(huì)造成菌株增殖放緩和死亡,谷氨酸產(chǎn)量相應(yīng)下降;發(fā)酵中后期,菌株增殖速度放緩,以產(chǎn)酸為主,殼聚糖上的氨基與**細(xì)胞壁中帶負(fù)電荷的磷壁酸或脂多糖結(jié)合,并螯合mg2+、ca2+等陽離子,從而改變細(xì)胞壁的通透性,促進(jìn)谷氨酸分泌到胞外。發(fā)酵培養(yǎng)基中添加了琥珀酸,三羧酸循環(huán)有一定促進(jìn)作用,而對乙醛酸循環(huán)途徑具有**作用,從而導(dǎo)致中間代謝物更多地流向三羧酸循環(huán)途徑,進(jìn)而促進(jìn)谷氨酸產(chǎn)量的增加。說明書附圖圖1:cecl3稀土鹽對菌體濃度的影響;圖2:cecl3稀土鹽對谷氨酸含量的影響;圖3:2-羥基乙胺對菌體濃度的影響;圖4:2-羥基乙胺對谷氨酸含量的影響;圖5:2-羥基乙胺對糖酸轉(zhuǎn)化率的影響。具體實(shí)施方式為了使本技術(shù)領(lǐng)域:的人員更好地理解本申請中的技術(shù)方案,下面將結(jié)合本申請具體實(shí)施例,對本申請的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述,顯然。江蘇DMEM/F12培養(yǎng)基哪家好DMEM培養(yǎng)基在實(shí)驗(yàn)室中廣泛應(yīng)用于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)。
SLM)低血清培養(yǎng)基添加1%小牛血清在轉(zhuǎn)瓶中培養(yǎng)CHO細(xì)胞生產(chǎn)EOP,可提高收液次數(shù),每次收液表達(dá)量明顯提高。概述無血清培養(yǎng)基是用來在無血清條件下生長特殊類型的細(xì)胞或進(jìn)行專門應(yīng)用的培養(yǎng)基。一般是由基礎(chǔ)培養(yǎng)基和替代血清的補(bǔ)充因子組成。無血清培養(yǎng)基中沒有添加血清,但含有個(gè)別蛋白或大量蛋白組分。無血清培養(yǎng)基與無蛋白培養(yǎng)基的區(qū)別在于培養(yǎng)基中沒有添加蛋白,但含有一些動(dòng)物或植物來源成分,如低分子量肽的水解物。還有一種化學(xué)限定培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中不含有蛋白、水解產(chǎn)物或未知結(jié)構(gòu)的組分,所有成分均有已知的化學(xué)結(jié)構(gòu)。***:1)未知組分少;2)培養(yǎng)基中不存在血清中的抗體、補(bǔ)體等成分,對培養(yǎng)細(xì)胞影響??;3)雜蛋白含量少,生產(chǎn)的產(chǎn)品后期處理較容易,例如*苗生產(chǎn)由于人用*苗需要純化減少雜蛋白,純化過程中成本消耗很大,*苗的損失也很大;4)無血清培養(yǎng)既可以實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的大規(guī)模懸浮培養(yǎng),增加培養(yǎng)液的利用率,可以采用發(fā)酵罐培養(yǎng)減少了人力消耗。缺點(diǎn):目前為止不是所有的細(xì)胞都能在無血清培養(yǎng)基中培養(yǎng)。無血清培養(yǎng)基的某些組分價(jià)格昂貴,導(dǎo)致無血清無法工業(yè)推廣的主要原因。
本發(fā)明涉及植物**培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域,特別涉及一種植物**培養(yǎng)基。背景技術(shù):ms培養(yǎng)基于1962年由murashige和skoog設(shè)計(jì),是目前植物**培養(yǎng)中應(yīng)用**為***的培養(yǎng)基。據(jù)《危險(xiǎn)化學(xué)品安全管理?xiàng)l例》(***令第591號(hào))、《民用物品安全管理?xiàng)l例》及《易制爆危險(xiǎn)化學(xué)品名錄》(2017年版)可知,ms培養(yǎng)基的主要成分硝酸鉀、硝酸銨均為易制爆管制試劑,隨著**監(jiān)管越發(fā)嚴(yán)格,所有易制爆試劑的購買、儲(chǔ)存及使用變得越來越困難,尤其是兼有硝態(tài)氮和銨態(tài)氮的硝酸銨,其純品被禁止市場流通,為植物**培養(yǎng)帶來很大難度。b5培養(yǎng)基于1968年由gamborg等為培養(yǎng)大豆根細(xì)胞而設(shè)計(jì),n6培養(yǎng)基于1974年由朱至清等為水稻等禾谷類作物花*培養(yǎng)而設(shè)計(jì),兩者均由ms培養(yǎng)基衍生而來,在有些植物**培養(yǎng)研究中***應(yīng)用,雖然b5和n6培養(yǎng)基除了硝酸鉀外不含其他易制爆成分,但兩者中的鈣離子和鎂離子含量均大幅降低,且b5培養(yǎng)基中銨離子大幅減少、n6培養(yǎng)基中鉀離子大幅增加,這些離子濃度的大幅波動(dòng)對一些植物的**培養(yǎng)是不利的。cna草莓增殖培養(yǎng)基公開了一種無硝酸銨培養(yǎng)基,但其硝酸鉀及**銨含量過高,*適用于草莓**培養(yǎng);cna一種草莓**培養(yǎng)基及其配制方法公開了一種無硝酸銨培養(yǎng)基,在草莓**培養(yǎng)中取得很好的效果。F12培養(yǎng)基提供了豐富的營養(yǎng),支持細(xì)胞增殖。
留點(diǎn)溫度計(jì)標(biāo)化合格后方可用于驗(yàn)證試驗(yàn)。檢測前,需將溫度計(jì)的**柱甩至40℃以下。每次監(jiān)測后留點(diǎn)溫度計(jì)的溫差應(yīng)存l℃之間,則說明**器內(nèi)的溫度分布是均勻的。**后的菌片應(yīng)在嚴(yán)格無菌操作條件下放入**后的溴甲酚紫胨水培養(yǎng)基內(nèi)56-60℃培養(yǎng)24-48小時(shí),觀察顏色變化。如培養(yǎng)基變?yōu)辄S色,說明菌片中的嗜熱脂肪芽胞桿菌尚未完全滅活,**仍可在培養(yǎng)基中生長,分解葡萄糖產(chǎn)酸變?yōu)辄S色。如培養(yǎng)基顏色不變化仍為紫色,則說明芽胞已滅活。同時(shí)要用未經(jīng)**的紙片放入培養(yǎng)基內(nèi)作為陽性對照,不加紙片的空白培養(yǎng)基作為陰性對照。化學(xué)指示卡上的指示色塊,在高壓蒸氣**時(shí),由淡黃色變?yōu)楹谏kS著顏色變化的深淺,并與對照色相比,可判斷**效果是否達(dá)到要求?;瘜W(xué)指示卡應(yīng)在干燥處保存。遇潮會(huì)變色,影響**效果的觀測。高壓蒸氣**必須使蒸氣順利進(jìn)入**器內(nèi),與**物品接觸,并將原有的冷空氣排出方可達(dá)到**的效果。要進(jìn)行空載熱分布和滿載熱穿透力驗(yàn)證(滿載時(shí)不超過總體積的2/3)。二種驗(yàn)證各重復(fù)三次,共做六次。5個(gè)點(diǎn)六次試驗(yàn)表明溫度均在121℃,化學(xué)指示卡變黑;程度與對照色一致;培養(yǎng)基均未改變顏色,說明高壓蒸氣**效果合格。高壓**器屬于強(qiáng)檢儀器,但強(qiáng)檢只是對儀器物理參數(shù)的考核。MEM培養(yǎng)基適用于多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞。上海減血清培養(yǎng)基一般多少錢
DMEM培養(yǎng)基在組織工程中有重要應(yīng)用。河南DMEM高糖培養(yǎng)基有哪些
nh4)2so4264mg、nh4h2po4288mg、mgso4·7h2o370mg、cacl2332mg、mnso4·h2o15mg、znso4·7h2o4mg、h3bo33mg、cocl2·、cuso4·、na2moo4·、nafeedta37mg、肌醇100mg、煙酸2mg、鹽酸硫胺素7mg、鹽酸吡哆醇1mg、甘氨酸2mg。本發(fā)明廣適性植物**1/2培養(yǎng)基,其每1000ml培養(yǎng)基中含有:kno31331mg、(nh4)2so4132mg、nh4h2po4144mg、mgso4·7h2o185mg、cacl2166mg、mnso4·h2o15mg、znso4·7h2o4mg、h3bo33mg、cocl2·、cuso4·、na2moo4·、nafeedta37mg、肌醇100mg、煙酸2mg、鹽酸硫胺素7mg、鹽酸吡哆醇1mg、甘氨酸2mg。本發(fā)明的有益效果:1、本發(fā)明植物**培養(yǎng)基,其能***應(yīng)用于多種植物**培養(yǎng),培養(yǎng)效果與ms培養(yǎng)基相當(dāng)或優(yōu)于ms培養(yǎng)基,可規(guī)?;茝V使用。2、本發(fā)明植物**培養(yǎng)基,其在不新增加易制爆試劑種類的情況下,去除了現(xiàn)有培養(yǎng)基中含有的市場禁止流通的易制爆試劑nh4no3,不*消除了培養(yǎng)基的安全**,也便于培養(yǎng)基的購買、儲(chǔ)存及管理。3、本發(fā)明植物**培養(yǎng)基,其配方用適量的(nh4)2so4和nh4h2po4取代nh4no3及kh2po4,該替換減少的鉀離子和硝態(tài)氮通過適當(dāng)增加kno3成分來補(bǔ)充,并且適當(dāng)提高鉀離子含量,可促進(jìn)植物發(fā)芽,有利于維管束、纖維**以及胚的發(fā)育。河南DMEM高糖培養(yǎng)基有哪些