PBS緩沖液什么是PBS緩沖液?PBS緩沖液是一種常用的生物化學(xué)緩沖液,全稱為磷酸鹽緩沖液(PhosphateBufferedSaline)。PBS緩沖液主要由磷酸鹽、鹽和水組成,pH值一般在。它被***用于生物實(shí)驗(yàn)室中,用于稀釋、洗滌和儲(chǔ)存生物樣品,保持生物樣品的穩(wěn)定性和活性。PBS緩沖液的組成PBS緩沖液的主要成分包括三個(gè)部分:1.磷酸鹽:PBS緩沖液中的磷酸鹽是為了維持緩沖液的酸堿平衡。磷酸鹽能夠抵抗外界酸堿環(huán)境的影響,并且能夠穩(wěn)定細(xì)胞的PH值,保護(hù)細(xì)胞免受外界環(huán)境的傷害。2.鹽:PBS緩沖液中的鹽主要是氯化鈉(NaCl),用于調(diào)節(jié)PBS緩沖液的離子濃度。PBS緩沖液中的適當(dāng)離子濃度可以提供細(xì)胞所需的離子環(huán)境,維持細(xì)胞的生理功能。3.水:水是PBS緩沖液的基礎(chǔ)成分,用于稀釋磷酸鹽和鹽。純凈的水可以保證PBS緩沖液的質(zhì)量,避免其他雜質(zhì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。 酸和鹽濃度等比例增減時(shí),溶液的pH值不變。福建EBSS緩沖液聯(lián)系方式
2.配制方法:將Tris-HCl平衡苯酚與等體積的氯仿/異戊醇(24:1)混合均勻后,移入棕色玻璃瓶中4℃保存。10%(W/V)SDS組份濃度:10%(W/V)SDS配制量:100ml配制方法:1.稱量10g高純度的SDS置于100-200ml燒杯中,加入約80ml的去離子水,68℃加入溶解2.滴加濃鹽酸調(diào)節(jié)pH值至3.將溶液定容至100ml后,室溫保存。2NNaOH組份濃度:2NNaOH配制量:100ml配制方法:1.量取80ml去離子水置于100~200ml塑料燒杯中(NaOH溶解過(guò)程中大量放熱,有可能使玻璃燒杯炸裂)。2.稱取8gNaOH小心地逐漸加入到燒杯中,邊加邊攪拌。3.待NaOH完全溶解后,用去離子水將溶液體積定容至100ml。4.將溶液轉(zhuǎn)移至塑料容器中后,室溫保存。NHCl組份濃度:NHCl配制量:100ml配制方法:1.在ml的去離子水中加入ml的濃鹽酸(N),均勻混合。2.室溫保存。5MNaCl組份濃度:5MNaCl配制量:1L配制方法:1.稱取gNaCl置于1L燒杯中,加入約800ml的去離子水后攪拌溶解。2.加去離子水將溶液定容至1L后,適量分成小份。3.高溫高壓**后,4℃保存。20%(W/V)Glucose組份濃度:20%(W/V)Glucose配制量:100ml配制方法:1.稱取20gGlucose置于100~200ml燒杯中,加入約80ml的去離子水后,攪拌溶解。2.加去離子水將溶液定容至100ml。廣東EBSS緩沖液是什么配制緩沖溶液作用有哪些?
從中選取包被抗體濃度和酶標(biāo)抗體的稀釋度。為了進(jìn)一步節(jié)省試劑,可以此濃度為基點(diǎn),縮小間距再進(jìn)一步做棋盤滴定。?2測(cè)定方法的標(biāo)準(zhǔn)化?2.1加樣?????ELISA中除了包被外,一般需進(jìn)行96孔加樣。定性測(cè)定中有時(shí)不強(qiáng)調(diào)加樣量的準(zhǔn)確性。例如規(guī)定為加樣1滴,如不具備相當(dāng)?shù)臈l件,要盡量使用相同口徑的滴管,保持準(zhǔn)確的加樣姿勢(shì),使每滴液體的體積基本相同。在定量測(cè)定中,加樣量應(yīng)力求準(zhǔn)確,**好采用量程準(zhǔn)確的微量移液器。加樣時(shí)應(yīng)將液體加在孔底,不要加在孔壁上部,避免出現(xiàn)氣泡。?2.2保溫?????在ELISA中,一般在加標(biāo)本和結(jié)合物后,反應(yīng)的溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定的要求,保溫容器**好是水浴箱,可使溫度迅速平衡。各ELISA板不應(yīng)疊在一起。為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕紗布的濕盒中。如用保溫箱,空濕盒應(yīng)預(yù)先放在其,以平衡溫度。?2.3洗滌?????洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。在標(biāo)本和結(jié)合物的稀釋液和洗滌液中加入聚山梨酯一類物質(zhì)即避免非特異性吸附,在ELISA中**為常用。ELISA板的洗滌一般可采用以下方法:吸干孑L內(nèi)反應(yīng)液;將洗滌液注滿板孔;發(fā)表評(píng)論請(qǐng)自覺(jué)遵守互聯(lián)網(wǎng)相關(guān)的政策法規(guī),嚴(yán)禁發(fā)布***、**、反動(dòng)的言論。
分析測(cè)試中,在絡(luò)合滴定和分光光度法等許多反應(yīng)里都要求溶液的pH值保持在一個(gè)范圍內(nèi),以保證指示劑的變色和顯色劑的顯色等,這些條件都是通過(guò)加入一定量的緩沖溶液達(dá)到的,所以緩沖溶液是分析測(cè)試中經(jīng)常需要的一種試劑。 采用電位滴定法測(cè)定外加酸或堿對(duì)不同配比同一種緩沖溶液的滴定曲線,不僅有助于理解緩溶液及緩沖容量的概念而且對(duì)分析測(cè)試中正確選緩沖溶液的配制方法及用量具有指導(dǎo)意義。 [3]采用電位滴定法測(cè)定緩沖溶液的滴定曲線,選擇 了常見(jiàn)的氨水-氯化銨緩沖溶液,分別按照不同的配比得到4種緩沖溶液,實(shí)驗(yàn)測(cè)定了強(qiáng)酸、強(qiáng)堿對(duì)緩沖 溶液的滴定曲線,滴定結(jié)果直觀清晰,對(duì)理解緩沖容 量的概念及實(shí)踐中緩沖溶液的選擇有積極的意義。 [3]緩沖液(Buffer solution)通常是由弱酸及其共軛堿或弱堿及其共軛酸緩沖對(duì)所組成的溶液。
PBS 與 DPBSPBS 和 DPBS 都包括氯化鈉和磷酸鹽緩沖液,是生物學(xué)研究中常用的試劑,用于維持 pH 值,同時(shí)可大幅度地減少活細(xì)胞中的滲透壓休克;然而,與 PBS 相比,DPBS 還包括氯化鉀,配方中可含或不含鈣和鎂以及含或不含葡萄糖和**酸。根據(jù)您的具體應(yīng)用選擇 PBS 或 DPBS。
Dulbecco 的磷酸鹽緩沖液(DPBS)DPBS 與 PBS 的不同之處在于它還包括氯化鉀,并且提供多種配方。它也用于生物應(yīng)用,水基緩沖液,包括氯化鈉和磷酸鹽緩沖液。
HBSS 與 EBSSHanks 的平衡鹽溶液(HBSS)和 Earle 的平衡鹽溶液(EBSS)都是等滲溶液,用于維持生物應(yīng)用中的滲透壓和 pH 值。雖然 HBSS 和 EBSS 包括葡萄糖和碳酸氫鈉,用于短期維持生長(zhǎng)培養(yǎng)基以外的細(xì)胞,但 EBSS 在 5% CO2 下使用,而 HBSS 包含較少的碳酸氫鈉,可以在沒(méi)有 CO2 的情況下使用。從各種依應(yīng)用而定的配方中進(jìn)行選擇。 緩沖液能夠提供酶所需的適pH值,這對(duì)于酶的活性至關(guān)重要。新疆DPBS緩沖液介紹
磷酸緩沖鹽溶液一般作為溶劑,起到溶解保護(hù)試劑的作用。福建EBSS緩沖液聯(lián)系方式
PBS溶液又稱磷酸鹽緩沖溶液,一般選擇Na2HPO4和KH2PO4配制,因?yàn)殁c鹽溶解的較慢。根據(jù)不同pH的溶液,稱量不同質(zhì)量的磷酸鹽,也可以用pH計(jì)調(diào)溶液的pH。PBS一般用作支持電解質(zhì)。
配置方法播報(bào)編輯采用去離子水、KH2PO4和Na2HPO4·2H2O配制PBS溶液,按以下步驟進(jìn)行:(1) 配制1/15mol/L KH2PO4,即每升水中溶解9.078克KH2PO4;(2) 配制1/15mol/LNa2HPO4·2H2O,即每升水中溶解11.876克Na2HPO4·2H2O;(3) 將18.2%(體積分?jǐn)?shù))KH2PO4溶液和81.8%Na2HPO4·2H2O混合; 福建EBSS緩沖液聯(lián)系方式