緩沖液的作用和使用注意事項
一、緩沖液的概念緩沖液(Buffersolution)通常是由弱酸及其共軛堿或弱堿及其共軛酸緩沖對所組成的溶液,能夠在加入一定量其他物質時減緩pH的改變。以生物實驗中**常用的一種緩沖液PBS為例,是由Na2HPO4、KH2PO4組成的緩沖對,在PH5.8-8.0范圍內有較強的緩沖能力。二、緩沖液的作用緩沖溶液的作用是在有限的范圍內調整溶液的pH值,使待測溶液的酸度符合分析方法所規(guī)定的范圍。例如,苯酚在堿性介質及鐵**鉀存在下,可與4-氨基安替比林反應生成橙紅色的安替比林染料,為了防止芳香胺類的干擾以pH在10士0.2時**為適宜。為此,就需要在待測溶液中加入氨一氯化錢緩沖溶液調整和控制待測溶液的pH為10.0士0.2。 緩沖液的濃度會影響其緩沖能力。上海無酚紅緩沖液價格
PBS緩沖液密度和水接近嗎?PBS緩沖液的密度與水接近。?PBS緩沖液,主要成分為Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl,這些成分的密度與水的密度相近。PBS緩沖液的作用主要是提供一個穩(wěn)定的pH環(huán)境,用于保護生物化學研究中的試劑和細胞等,同時保持實驗條件的穩(wěn)定性。由于PBS緩沖液的主要成分與水的密度相近,它在水溶液中的行為也與水相似,這使得PBS成為生物化學實驗中常用的溶液之一。此外,PBS緩沖液可以調整其成分以適應不同的pH值需求,從而在***的pH范圍內提供穩(wěn)定的緩沖能力?12??偟膩碚f,PBS緩沖液的密度與水非常接近,這種特性使得PBS在生物化學研究中得到***應用,因為它能夠提供一個類似于水的環(huán)境,同時保持實驗條件的穩(wěn)定性。?PBS緩沖液的密度與水接近。?PBS緩沖液,主要成分為Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl,這些成分的密度與水的密度相近。PBS緩沖液的作用主要是提供一個穩(wěn)定的pH環(huán)境,用于保護生物化學研究中的試劑和細胞等,同時保持實驗條件的穩(wěn)定性。由于PBS緩沖液的主要成分與水的密度相近,它在水溶液中的行為也與水相似,這使得PBS成為生物化學實驗中常用的溶液之一。此外,PBS緩沖液可以調整其成分以適應不同的pH值需求。 北京緩沖液生產(chǎn)企業(yè)使用pH計可以更準確地測量pH值的變化,判斷是否為緩沖溶液。
PBS溶液又稱磷酸鹽緩沖溶液,一般選擇Na2HPO4和KH2PO4配制,因為鈉鹽溶解的較慢。根據(jù)不同pH的溶液,稱量不同質量的磷酸鹽,也可以用pH計調溶液的pH。PBS一般用作支持電解質。
配置方法播報編輯采用去離子水、KH2PO4和Na2HPO4·2H2O配制PBS溶液,按以下步驟進行:(1) 配制1/15mol/L KH2PO4,即每升水中溶解9.078克KH2PO4;(2) 配制1/15mol/LNa2HPO4·2H2O,即每升水中溶解11.876克Na2HPO4·2H2O;(3) 將18.2%(體積分數(shù))KH2PO4溶液和81.8%Na2HPO4·2H2O混合;
淀粉酶活力的測定中緩沖液有什么作用
緩沖液1)緩沖溶液作用原理和pH值當往某些溶液中加入一定量的酸和堿時,有阻礙溶液pH變化的作用,稱為緩沖作用,這樣的溶液叫做緩沖溶液.弱酸及其鹽的混合溶液(如HAc與NaAc),弱堿及其鹽的混合溶液(如NH3·H2O與NH4Cl)等都是緩沖溶液.由弱酸HA及其鹽NaA所組成的緩沖溶液對酸的緩沖作用,是由于溶液中存在足夠量的堿A-的緣故.當向這種溶液中加入一定量的強酸時,H離子基本上被A-離子消耗:所以溶液的pH值幾乎不變;當加入一定量強堿時,溶液中存在的弱酸HA消耗OH-離子而阻礙pH的變化.2)緩沖溶液的緩沖能力在緩沖溶液中加入少量強酸或強堿,其溶液pH值變化不大,但若加入酸,堿的量多時,緩沖溶液就失去了它的緩沖作用.這說明它的緩沖能力是有一定限度的. PBS緩沖液的離子濃度與人體血液相似。
該酶標IsC的工作濃度應為1/1?600。?????棋盤滴定法選擇包被抗原工作濃度:①用包被液將抗原由1:50開始作比倍稀釋后進行包被,洗滌。②將強陽性參考血清、弱陽性參考血清和陰性參考血清用稀釋液作1:100稀釋,加樣,保溫、洗滌。③加按工作濃度稀釋的酶標IsC抗體,保溫、洗滌。④加底物顯色。加酸終止反應后讀取A值。⑤選擇強陽性參考血清的A值為0.8左右、陰性參考血清的A值小于0.1的包被抗的稀釋度作為工作濃度,從中選取**適工作濃度。?1.2夾心法測抗原?????在夾心ELISA法中,可用棋盤滴定法同時選擇包被抗體和酶標抗體的工作濃度。①抗體免*球蛋白用包被緩沖液稀釋至蛋白濃度為10.0、1.0和0.1微克/毫升,分別在ELISA板上進行包被,每一濃度包括3個縱行,洗滌。②在1個橫行各包被孔中加入強陽性抗原液,另1橫行加入弱陽性抗原液,第3橫行加入陰性對照液,保溫、洗滌。③將酶標抗體用稀釋液稀釋成3個濃度,例如1:1?000、1:5?000和1:25000。分別加入每個包被濃度的1個縱行中,保溫、洗滌。④加底物顯色。加酸終止反應后,讀取A值。⑤以強陽性抗原的A值在0.8左右、陰性參考的A值小于0.1的條件作**適條件,據(jù)此選擇包被抗體和酶抗體的工作濃度。緩沖溶液在醫(yī)學檢驗中有著重要的意義。安徽有酚紅緩沖液價格查詢
緩沖溶液的作用是在有限的范圍內調整溶液的pH值,使待測溶液的酸度符合分析方法所規(guī)定的范圍。上海無酚紅緩沖液價格
Buffer組份濃度:137mMNaCl,mMKCl,10mMNa2HPO4,2mMKH2PO4配制量:1L配制方法:1.稱量下列試劑,置于1L燒杯中。2.向燒杯中加入約800ml的去離子水,充分攪拌溶解。3.滴加濃鹽酸將pH值調節(jié)至,然后加入去離子水將溶液定容至1L。4.高溫高壓**后,室溫保存。注意:上述Buffer中無二價陽離子,如需要,可在配方中補充1mMCaCl2和mMMgCl2。10M醋酸銨組份濃度:10M醋酸銨配制量:100ml配制方法:1.稱量g醋酸銨置于100~200ml燒杯中,加入約30ml的去離子水攪拌溶解。2.加去離子水將溶液定容至100ml。3.使用mm濾膜過濾**。4.密封瓶口于室溫保存。注意:醋酸銨受熱易分解,所以不能高溫高壓**。Tris-HCl平衡苯酚配制方法:1.使用原料:大多數(shù)市售液化苯酚是清亮無色的,無需重蒸餾便可用于分子生物學實驗。但有些液化苯酚呈粉紅色或黃色,應避免使用。同時也應避免使用結晶苯酚,結晶苯酚必須在160℃對其進行重蒸餾除去諸如醌等氧化產(chǎn)物,這些氧化產(chǎn)物可引起磷酸二酯鍵的斷裂或導致RNA和DNA的交聯(lián)等。因此,苯酚的質量對DNA、RNA的提取極為重要,我們推薦使用高質量的苯酚進行分子生物學實驗。2.操作注意:苯酚腐蝕性極強,并可引起嚴重灼傷,操作時應戴手套及防護鏡等。上海無酚紅緩沖液價格