自然殺傷(NK)細胞在識別和殺死**和病毒感ran的先天和后天免疫反應中扮演著關(guān)鍵的角色。因此,已有許多研究嘗試研發(fā)在體外激huo和擴增NK細胞的方法,以用于和免疫細胞相關(guān)研究,而目前的方法包括使用細胞因子、化學試劑以及飼養(yǎng)細胞1,其中細胞因子在調(diào)節(jié)NK細胞的活性中具有核xin作用。據(jù)報道,IL-2、IL-12、IL-15、IL-18、IL-21和IFN-γ被歸類為NK細胞的細胞毒性和增殖的活化細胞因子,并增強NK細胞對各種**的細胞毒性作用2。然而,這些激huoNK細胞的細胞因子組合仍需研究人員進一步優(yōu)化。CCK-8試劑盒可以用于生物活性因子的活性檢測,抗**藥物的篩選,細胞增值的測定。WB試劑盒
隨著病毒生物學的發(fā)展,種類繁多的病毒載體已越來越成為向各種實驗系統(tǒng)(如細胞系、原代細胞、組織臟器等)轉(zhuǎn)運核酸的重要工具。除了在實驗室的組織培養(yǎng)和動物模型生產(chǎn)中發(fā)揮重要作用,它們還被用于zhi 療遺傳性疾病的臨床試驗中。目前主流的病毒載體系統(tǒng)主要包括慢病毒(LV)、(γ-)逆轉(zhuǎn)錄病毒(RV)、腺病毒(Ad)和腺相關(guān)病毒(AAV)。我們分述之。慢病毒和逆轉(zhuǎn)錄病毒均屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒科。其典型特征為其RNA基因組能逆轉(zhuǎn)錄為cDNA副本,cDNA副本又能穩(wěn)定整合至宿主細胞基因組中(這就是常說的穩(wěn)轉(zhuǎn))。逆轉(zhuǎn)錄病毒通常分兩種:簡單的(有時又稱為致ai病毒或γ-逆轉(zhuǎn)錄病毒,如鼠白血病病毒)和復雜的(如慢病毒)。這些亞型間主要的差異在于復雜的逆轉(zhuǎn)錄病毒存在一些附屬基因和調(diào)控基因,而簡單的則沒有(下文有進一步的討論)。這兩類病毒顆粒都含有兩份正鏈RNA,RNA上附有病毒反轉(zhuǎn)錄酶(RT),它們位于病毒的內(nèi)核(圖1)。位于內(nèi)核的還有結(jié)構(gòu)蛋白和酶,包括核殼(NC)、衣殼(CA)、整合酶(IN)和蛋白酶(PR)。內(nèi)核由一圈外周蛋白層包圍,外周蛋白包括基質(zhì)蛋白(MA),基質(zhì)蛋白又被來源于宿主細胞細胞膜插有包膜糖蛋白的腹膜所包圍。金標試劑盒熒光素酶通過載體構(gòu)建可以研究基因組織的特異性表達;對一些細胞的生長和轉(zhuǎn)移等變化進行實時觀測和評估。
您想要快速、準確的了解不同處理、來源的組織或細胞樣品之間某一類信號通路相關(guān)基因的表達情況嗎?為簡化基因分析研究,美國sciencell公司特推出GeneQueryTM qPCR試劑盒,這款產(chǎn)品能夠快速、簡單的獲得這些不同來源樣品之間您感興趣的信號通路相關(guān)基因群之間的精確表達倍數(shù)關(guān)系,并提供后續(xù)基因定量PCR 特異性引物序列信息。該試劑盒主要集中于生物學途徑、ai癥研究、遺傳性疾病和生物標志物等方面的研究,可在一個96 孔板內(nèi)同時檢測96個相關(guān)基因的表達,少至0.1ng cDNA 就可快速準確的檢測和量化靶基因的表達。除了該試劑盒,還提供單獨的引物進行基因表達分析,這些引物組能特異性地識別和高效地擴增靶基因的cDNA。
可以應用以下等領(lǐng)域:
1、探索新型藥物靶向基因,
2、發(fā)現(xiàn)正常和病理細胞之間的信號異常,
3、確定藥物作用機制,
4、預測各種疾病的藥物療效,
5、評估藥物對基因表達和信號傳導的影響。
熒光素(Luciferase)是自然界中能夠產(chǎn)生生物發(fā)光的酶的統(tǒng)稱,其中*有代表性的是來自螢火蟲體內(nèi)(Fire?y)和海腎(Renilla)體內(nèi)的兩類螢光素酶,分別命名為F-Luciferase和R-Luciferase。熒光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,在luciferin氧化的過程中,會發(fā)出生物熒光(bioluminescence),可通過熒光測定儀設備測定luciferin氧化過程中釋放的生物熒光,常應用于啟動子轉(zhuǎn)錄活性調(diào)控及miRNA靶基因驗證等方向研究。熒光素酶的具體應用,主要有以下兩個方面:(一):pGL3-Basic---用于轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點與啟動子活性分析。把待分析啟動子區(qū)段構(gòu)建到F-Luciferase上游,和轉(zhuǎn)錄因子共轉(zhuǎn)染分析F-Luciferase活性即可反應啟動子的活性高低。該質(zhì)粒通常需要結(jié)合持續(xù)性表達R-Luciferase的載體作為內(nèi)參以校正不同樣品之間轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)染效率。(二):psiCHECK2---miRNA與其靶點相關(guān)分析,包括miRNA靶基因驗證、lncRNA與circRNA吸附miRNA驗證等。 需要把miRNA潛在結(jié)合靶點克隆到R-Luciferase (hRLuc) 3’UTR區(qū)域,然后與待測miRNA共同轉(zhuǎn)染細胞內(nèi)測定R-Luciferase活性高低,F(xiàn)-Luciferase (hLuc+)作為校正內(nèi)參校正不同樣品之間轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)染效率。以高效內(nèi)毒su特異吸附物質(zhì)為配基,對內(nèi)毒su有特異高效的去除作用。
逆轉(zhuǎn)錄病毒生命周期的兩個獨特步驟,即逆轉(zhuǎn)錄和整合,是慢病毒載體功能的重要組成部分。脫殼后,剩余的病毒核酸和蛋白復合物稱為逆轉(zhuǎn)錄復合物(RTC),RTC通過主動運輸進入細胞核。轉(zhuǎn)運過程中,病毒RNA在RTC中通過以下方式逆轉(zhuǎn)錄為前病毒DNA。首先tRNA與病毒RNA基因組5'端引物結(jié)合位點(primer binding site,PBS)結(jié)合,并生成一個短片段的反義單鏈DNA,稱為強終止拷貝DNA(strong-stop copy DNA,sscDNA)。該sscDNA段隨后被轉(zhuǎn)移至病毒RNA的3'端,作為合成負鏈DNA的引物。在此過程中,重建了病毒生命周期必不可少的U3RU5序列。熒光素酶(luciferase)是指能催化不同底物發(fā)生氧化使其發(fā)射出熒光的一類酶的總稱。試劑盒銷售
細胞毒性非常低,因此加入WST-8顯色后,可以在不同時間反復用酶標儀讀數(shù)從而找到較好測定時間。WB試劑盒
ELISA是一種基于酶的免疫測定方法,由于酶標的放大作用,利用酶標記抗體的免疫檢測,因其高特異性和敏感性而日益受到人們的青睞。細胞因子夾心ELISA是一種敏感的酶免疫分析方法,可以特異性地檢測和定量可溶性細胞因子和趨化因子蛋白的濃度。這一方法的基本原理是:①將已知抗體結(jié)合到某種固相載體表面;②加待測抗原,如兩者是特異的,則發(fā)生結(jié)合,然后把多余抗體洗除;③加入與待測抗原呈特異反應的酶聯(lián)抗體,使形成“夾心”;④加入該酶的底物,若看到有色的酶解產(chǎn)物產(chǎn)生,說明在孔壁上存在相應的抗原,利用酶標儀測其OD值。有色產(chǎn)物的量與待測抗原的量直接相關(guān),故可根據(jù)顏色反應的深淺進行定性或定量分析。WB試劑盒
上海中喬新舟生物科技有限公司
1、原代細胞:ScienCell(中國區(qū)正規(guī)一級代理)人源和動物源各種原代細胞。
2、培養(yǎng)基:原代細胞**低血清、無血清、無異源蛋白無動物成分培養(yǎng)基。
3、細胞培養(yǎng)試劑:胎牛血清、原代細胞轉(zhuǎn)染試劑盒、細胞實驗檢測試劑盒、細胞生長因子、ELISA試劑盒、定量PCR芯片試劑盒、DNA/RNA及細胞裂解物等。
4、細胞系(株):種類豐富(1000余種),已通過STR鑒定;提供細胞株完全培養(yǎng)基。
5、自研產(chǎn)品:支原體檢測/qing除試劑盒、端粒酶檢測試劑盒、人源/動物源ELISA試劑盒等系列產(chǎn)品。
6、技術(shù)服務:綠/紅色熒光蛋白標記、熒光素酶標記、慢bing毒介導基因沉默或過表達及穩(wěn)轉(zhuǎn)株的構(gòu)建,細菌基因敲除、細胞基因敲除、小鼠基因敲除、血管生成功能學實驗。