注意事項(xiàng):1、酚紅和血清對(duì)CCK-8法的檢測不會(huì)造成干擾,可以通過減去空白孔中本底的吸光度而消除。2、CCK-8試劑的顏色為淡紅色,與含酚紅的培養(yǎng)基顏色接近,不注意的話容易產(chǎn)生漏加或多加。3、當(dāng)在培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)時(shí),培養(yǎng)板*外一圈的孔容易干燥揮發(fā),導(dǎo)致體積不準(zhǔn)確而增加誤差。一般情況下,*外一圈的孔只加培養(yǎng)基,不作為測定孔用。4、金屬對(duì)CCK-8顯色有影響:終濃度為1mM的氯化亞鉛、氯化鐵、硫酸銅會(huì)5%、15%、90%的抑zhi顯色反應(yīng),使靈敏度降低。如果終濃度是10mM,將會(huì)100%抑zhi顯色反應(yīng)。5、部分懸浮細(xì)胞由于染色比較困難,一般需要增加細(xì)胞數(shù)量并延長培養(yǎng)時(shí)間。熒光亮度更高,熒光偶聯(lián)物特異性好,熒光溢出效應(yīng)減弱。耐藥細(xì)胞株
眾所周知,ai細(xì)胞有它們自己獨(dú)特的增殖方式,它是一種在幾乎所有ai癥類型中但不在正常的細(xì)胞中觀察到的精明的代謝重編程。
在一篇發(fā)表在2016年10月Cell Reports期刊上的文章“Addiction to Coupling of the Warburg Effect with Glutamine Catabolism in Cancer Cells”中,研究人員shou次證實(shí)導(dǎo)致ai癥的突變?nèi)绾慰刂坪透淖僡i細(xì)胞進(jìn)行生物合成和復(fù)制的方式。
幾十年來,人們已知ai細(xì)胞以一種令人吃驚的速率從血液中攝取葡萄糖。在這篇文章中研究人員發(fā)現(xiàn):盡管葡萄糖是主要的能量來源并且是正常細(xì)胞進(jìn)行生物合成的燃料,但是在ai細(xì)胞中,葡萄糖以不同的方式進(jìn)行代謝。ai細(xì)胞從燃燒葡萄糖轉(zhuǎn)換到發(fā)酵葡萄糖,并且實(shí)驗(yàn)室發(fā)現(xiàn)這一過程是由導(dǎo)致ai癥的突變驅(qū)動(dòng)的。
再者,他們發(fā)現(xiàn)在ai細(xì)胞中,葡萄糖發(fā)酵促進(jìn)谷氨酰胺---另一種營養(yǎng)來源---消耗。谷氨酰胺可從血液中大量獲得,而且ai細(xì)胞大量地獲取它來支持細(xì)胞分裂。
因此,研究ai細(xì)胞中的代謝途徑及代謝變化,可能為ai癥zhi療提供了一個(gè)新的方向。 抗原檢測試劑盒細(xì)胞毒性非常低,因此加入WST-8顯色后,可以在不同時(shí)間反復(fù)用酶標(biāo)儀讀數(shù)從而找到較好測定時(shí)間。
細(xì)胞結(jié)構(gòu)及功能的研究,是細(xì)胞生物學(xué)的基本課題,其重要的研究手段之一是分離純的亞細(xì)胞組分 。這種拆離的方法,使細(xì)胞中各種生物學(xué)過程彼此分開,互不干擾,便于確定一種復(fù)雜過程中的細(xì)節(jié),從而深化我們對(duì)細(xì)胞整體功能的認(rèn)識(shí)。
常規(guī)分離提取方法往往一次jin能提取1-2種細(xì)胞組分,同時(shí)不僅對(duì)設(shè)備要求高,而且操作起來費(fèi)時(shí)費(fèi)力,*后的效果還不佳。作為生命科學(xué)領(lǐng)域知ming的解決方案供應(yīng)商,艾美捷科技為您推薦市場上唯yi一款能夠一次性提取4種組分的試劑盒,能夠滿足絕大多數(shù)科研工作者的分離需求,不僅高效便捷,更確保蛋白以及組分的完整。
來源于生物體內(nèi)的熒光素,常見的有螢火蟲熒光素酶、海腎熒光素酶和Guassia熒光素酶。這些熒光素酶作為“報(bào)告蛋白”被用于分子生物學(xué)研究中,這種技術(shù)被稱為報(bào)告基因檢測法或螢光素酶檢測法(LuciferaseAssay)。跟普通融合蛋白標(biāo)簽不同,使用熒光素酶構(gòu)建的報(bào)告基因可用作目的基因的定量分析。因此常用于研究啟動(dòng)子、miRNA3'UTR克隆的功能與調(diào)控,因?yàn)樗鼈儗?duì)目的基因的調(diào)控可以是漸變的,而不是簡單的開和關(guān)兩種狀態(tài)。優(yōu)點(diǎn):靈敏度高,檢測幅度寬;不是哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)源性基因;重復(fù)性好;與HTS兼容等。螢火蟲和海腎熒光素酶已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于協(xié)同報(bào)告并進(jìn)行均一化研究。由于它們都是快速,容易和高靈敏的監(jiān)測方法。而且螢火蟲和海腎熒光素酶是理想的雙基因報(bào)告系統(tǒng),因?yàn)樗鼈儊碓从诓煌纳镞M(jìn)化方向,蛋白結(jié)構(gòu)和底物差異都很大,在實(shí)驗(yàn)中不會(huì)產(chǎn)生相互影響?;诼《据d體的基因療法已成為zhi liao多種疾病的選擇。
每種試劑都有其佳反應(yīng)模式,其中溫度和溫育時(shí)間控制是重要因素。因孵育溫度高,反應(yīng)時(shí)間長,會(huì)造成整板本底高,陽性率高。溫育般用濕盒或水浴,ELISA試劑盒反應(yīng)板不宜疊放,以保證各板溫度都能迅速平衡,為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋。作為記錄測定結(jié)果的儀器,酶標(biāo)儀的性能穩(wěn)定與否,決定結(jié)果的可靠度。先酶標(biāo)儀應(yīng)定期進(jìn)行保養(yǎng),對(duì)濾光片要定期校正;其次酶標(biāo)儀波長設(shè)置要正確,好使用雙波長,個(gè)檢測波長,個(gè)參比波長,以消除微孔板底部劃痕、不平、指印或液面高度差異造成的光干擾。此外,在用酶標(biāo)儀讀數(shù)時(shí)好先擦試微孔板底部并壓平板條。由于各種酶標(biāo)儀性能有所不同,使用中應(yīng)詳細(xì)閱讀說明書。 這是一種基于熒光信號(hào)將混合細(xì)胞分離成不同群體的流式細(xì)胞術(shù)。信號(hào)放大成像試劑盒
ScienCel已經(jīng)開發(fā)出多種的細(xì)胞檢測試劑盒,幫助您評(píng)估酶活性、代謝水平和細(xì)胞生長狀態(tài)以及干細(xì)胞研究等。耐藥細(xì)胞株
逆轉(zhuǎn)錄病毒生命周期的兩個(gè)獨(dú)特步驟,即逆轉(zhuǎn)錄和整合,是慢病毒載體功能的重要組成部分。脫殼后,剩余的病毒核酸和蛋白復(fù)合物稱為逆轉(zhuǎn)錄復(fù)合物(RTC),RTC通過主動(dòng)運(yùn)輸進(jìn)入細(xì)胞核。轉(zhuǎn)運(yùn)過程中,病毒RNA在RTC中通過以下方式逆轉(zhuǎn)錄為前病毒DNA。首先tRNA與病毒RNA基因組5'端引物結(jié)合位點(diǎn)(primer binding site,PBS)結(jié)合,并生成一個(gè)短片段的反義單鏈DNA,稱為強(qiáng)終止拷貝DNA(strong-stop copy DNA,sscDNA)。該sscDNA段隨后被轉(zhuǎn)移至病毒RNA的3'端,作為合成負(fù)鏈DNA的引物。在此過程中,重建了病毒生命周期必不可少的U3RU5序列。耐藥細(xì)胞株
上海中喬新舟生物科技有限公司
1、原代細(xì)胞:ScienCell(中國區(qū)正規(guī)一級(jí)代理)人源和動(dòng)物源各種原代細(xì)胞。
2、培養(yǎng)基:原代細(xì)胞**低血清、無血清、無異源蛋白無動(dòng)物成分培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞培養(yǎng)試劑:胎牛血清、原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)檢測試劑盒、細(xì)胞生長因子、ELISA試劑盒、定量PCR芯片試劑盒、DNA/RNA及細(xì)胞裂解物等。
4、細(xì)胞系(株):種類豐富(1000余種),已通過STR鑒定;提供細(xì)胞株完全培養(yǎng)基。
5、自研產(chǎn)品:支原體檢測/qing除試劑盒、端粒酶檢測試劑盒、人源/動(dòng)物源ELISA試劑盒等系列產(chǎn)品。
6、技術(shù)服務(wù):綠/紅色熒光蛋白標(biāo)記、熒光素酶標(biāo)記、慢bing毒介導(dǎo)基因沉默或過表達(dá)及穩(wěn)轉(zhuǎn)株的構(gòu)建,細(xì)菌基因敲除、細(xì)胞基因敲除、小鼠基因敲除、血管生成功能學(xué)實(shí)驗(yàn)。