云南比格犬原代肝細(xì)胞有哪些

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2023-03-14

原代肝細(xì)胞分離試劑盒說(shuō)明書(shū)實(shí)驗(yàn)方案參考一、設(shè)備和試劑準(zhǔn)備(一)儀器設(shè)備(組織塊)超凈工作臺(tái)或者生物安全柜、水浴鍋、一次性100mm培養(yǎng)皿1個(gè)、滅菌剪刀和鑷子若干、滅菌100mL搖瓶、電動(dòng)移液器、一次性15/50mL離心管若干、一次性50mL注射器及μm過(guò)濾器若干、100mL無(wú)菌試劑瓶、離心機(jī)、一次性5ml巴氏吸管、75%酒精及其噴壺、、碎冰、泡沫盒。(二)儀器設(shè)備(實(shí)體消化)超凈工作臺(tái)或者生物安全柜、水浴鍋、蠕動(dòng)泵(LongerPump,YZ1515X)、手推式電動(dòng)廢液缸、一次性100mm培養(yǎng)皿1個(gè)、乳膠管(滅菌、長(zhǎng)度168cm,規(guī)格充滿14ml液體)、滅菌剪刀和鑷子若干、滅菌動(dòng)脈夾、滅菌止血鉗、一次性輸液針(黑色*25)、電動(dòng)移液器、一次性15/50mL離心管若干、一次性50mL注射器及μm過(guò)濾器若干、100mL無(wú)菌試劑瓶、離心機(jī)、泡沫板、廢液托盤(pán)、固定針頭、一次性5ml巴氏吸管、75%酒精及其噴壺、、碎冰、泡沫盒、新鮮配置6%的戊巴比妥鈉。 原代肝細(xì)胞的市場(chǎng)應(yīng)用分析。歡迎來(lái)電咨詢(xún)上海中喬新舟!云南比格犬原代肝細(xì)胞有哪些

傳代培養(yǎng):1.倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),確定細(xì)胞是否需要傳代。2.培養(yǎng)液瓶打開(kāi)后,過(guò)酒精燈火焰,置酒精燈火焰周?chē)?.拿出直頭滴管,套上橡皮吸頭,過(guò)火,放入培養(yǎng)液瓶中。4.打開(kāi)培養(yǎng)瓶,瓶口過(guò)火,將培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液輕輕倒入廢液缸,用2-3mLPBS洗去殘留的舊培養(yǎng)基。5.培養(yǎng)瓶加入,用量以薄薄蓋滿一層為宜,37℃消化,倒置顯微鏡下觀察到細(xì)胞收回突起變圓時(shí)立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶,使細(xì)胞脫離胰酶,然后將胰酶倒掉,加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基。6.取彎頭滴管反復(fù)吹打細(xì)胞使其脫壁并分散,再根據(jù)分傳瓶數(shù)補(bǔ)加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基,制成細(xì)胞懸液,然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋上瓶蓋,適度擰緊后再稍回轉(zhuǎn),以利于CO2氣體的進(jìn)入,將培養(yǎng)瓶放回CO2培養(yǎng)箱。7.對(duì)半貼壁培養(yǎng)細(xì)胞,不需胰酶,直接吹打,加入新鮮培養(yǎng)基,然后分裝到各瓶中。 貴州鴨 北京鴨原代肝細(xì)胞種類(lèi)原代肝細(xì)胞的規(guī)格介紹。歡迎來(lái)電咨詢(xún)上海中喬新舟!

肝臟表面有一薄層致密的結(jié)締組織構(gòu)成的被膜。被膜深入肝內(nèi)形成網(wǎng)狀支架,將肝實(shí)質(zhì)分隔為許多具有相似形態(tài)和相同功能的基本單位,稱(chēng)為肝小葉。人類(lèi)肝臟約有50萬(wàn)個(gè)肝小葉。肝小葉呈多角棱柱體,約l毫米×2毫米大小,小葉的中軸貫穿一條靜脈,為靜脈。肝細(xì)胞以靜脈為中心呈放射狀排列,形成肝細(xì)胞索。肝細(xì)胞索相互吻合成網(wǎng),網(wǎng)眼間有竇狀隙和血竇。肝細(xì)胞間的管狀間隙形成毛細(xì)膽管。因此可以說(shuō),肝小葉是由肝細(xì)胞、毛細(xì)膽管、血竇和相當(dāng)于毛細(xì)淋巴管的竇周隙(狄氏間隙)所組成。

    原代培養(yǎng):1.取出小鼠后瀝干酒精,放入超凈臺(tái)內(nèi),固定在泡沫板上。2.用鑷子提起皮膚,用解剖剪剪開(kāi)皮膚一個(gè)橫切口,將皮膚向上撕開(kāi),然后剪開(kāi)肌肉等,暴露出腹腔,在左側(cè)找到脾臟,用彎頭眼科鑷取出脾臟,置于無(wú)菌培養(yǎng)皿中。3.用生理鹽水將取出的脾臟清洗多次,并剔除多余無(wú)用的組織。4.將篩網(wǎng)置于平皿中,脾臟置于篩網(wǎng)上,用彎頭鑷鑷住,輕輕在篩網(wǎng)上進(jìn)行碾磨,同時(shí)不停滴加不含血清的培養(yǎng)液沖洗。5.將碾磨好的細(xì)胞懸液吸入至離心管中,離心(1000rpm,5min),吸去上清(去除血液等)。6.加入10ml培養(yǎng)液,吹打混勻,取樣計(jì)數(shù)。7.將稀釋好的細(xì)胞懸液分裝于培養(yǎng)瓶中,輕輕搖晃混勻,在培養(yǎng)瓶上。面做好標(biāo)志,注明細(xì)胞、組別及日期。然后將培養(yǎng)瓶置于二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 原代肝細(xì)胞的服務(wù)價(jià)格更優(yōu)惠。歡迎來(lái)電咨詢(xún)上海中喬新舟!

細(xì)胞培養(yǎng)方法:1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入完全培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。 上海中喬新舟告訴您 原代肝細(xì)胞的選擇方法。歡迎來(lái)電咨詢(xún)上海中喬新舟!云南比格犬原代肝細(xì)胞有哪些

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肝臟是人體“的”代謝,與、、糖尿病等代謝性疾病密切相關(guān)。肝細(xì)胞在肝臟參與的各種代謝過(guò)程中發(fā)揮了主要作用。肝細(xì)胞是實(shí)質(zhì)細(xì)胞,在肝臟中的比例多;此外實(shí)質(zhì)細(xì)胞還包括少量的膽管內(nèi)皮細(xì)胞。而非實(shí)質(zhì)細(xì)胞則包括星狀細(xì)胞,巨噬細(xì)胞,NK細(xì)胞,成纖維細(xì)胞等,只占整個(gè)肝臟細(xì)胞的20%左右。原代肝細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn):①原代肝細(xì)胞由于離體時(shí)間短,因此其能夠保持在體內(nèi)的生物學(xué)特性,是更接近體內(nèi)環(huán)境的研究模型。②原代肝細(xì)胞能夠避免體內(nèi)實(shí)驗(yàn)時(shí)肝臟其他細(xì)胞對(duì)肝細(xì)胞的影響,從而得出更加準(zhǔn)確的研究結(jié)果。③原代細(xì)胞相比體內(nèi)實(shí)驗(yàn)具有更好的可控性。 云南比格犬原代肝細(xì)胞有哪些

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