幾種慢性肝病(CLD),包括慢性病毒性肝炎、酒精性肝病和非酒精性脂肪肝/非酒精性脂肪性肝炎(NAFLD/NASH),引起肝細胞損傷和壞死,進而引發(fā)炎癥和以細胞外基質(zhì)(ECM)積累為特征的傷口愈合反應。如果損傷是急性的或自限性的,傷口愈合反應會迅速恢復正常組織穩(wěn)態(tài)和肝臟結構。然而,如果損傷持續(xù)存在,隨之而來的慢性炎癥和ECM積累會超過肝臟再生的能力,導致纖維化并終導致肝硬化,這是一種預后不佳的肝臟疾病,也是發(fā)展為肝細胞(HCC)的主要危險因素。上海中喬新舟的 原代肝細胞怎么樣?歡迎來電咨詢上海中喬新舟!浙江鴨 野鴨原代肝細胞購買
Autotaxin(ATX)是一種分泌型溶血磷脂酶D,可催化溶血磷脂酰膽堿(LPC)水解為溶血磷脂酸(LPA),這是一種多效性生長因子樣磷脂。LPA通過其G蛋白偶聯(lián)受體(GPCRs;LPAR1-6)在幾乎所有細胞類型中具有多種作用,表現(xiàn)出重疊的特異性和普遍分布。目前,在各種慢性炎癥性疾病和不同類型的病癥中已檢測到上調(diào)的ATX表達。ATX被證明在肺纖維化的發(fā)展中起決定性作用;然而,對其在其他纖維增生性疾病中的作用和作用方式知之甚少。擴展和補充先前的研究,我們已經(jīng)顯示不同病因的CLD中血清ATX水平升高,這與CLD和HCC患者的存活率降低以及肝臟ATXmRNA表達增加相關。因此,在實驗性中毒性肝炎和HCC的動物模型中顯示肝細胞ATX和肝LPA水平升高。體內(nèi)遺傳和藥理學干預以及離體研究表明,ATX會擾亂脂質(zhì)穩(wěn)態(tài)并促進纖維化和病癥的發(fā)展。 安徽馬肝細胞原代肝細胞購買原代肝細胞廠家直供優(yōu)勢。歡迎來電咨詢上海中喬新舟!
隨著人們飲食結構和生活方式的改變,脂肪肝的發(fā)病率也呈逐年升高趨勢。臨床上根據(jù)飲酒與否,將其分為非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholicfattyliverdisease,NAFLD)和酒精性脂肪性肝病(alcoholicfattyliverdisease,AFLD)2種類型。NAFLD是指除酒精和其他已知致肝損傷因素外,以胰島素抵抗和肝細胞脂肪變性為主要特征的臨床病理綜合征。NAFLD涵蓋從單純性脂肪變性/非酒精性脂肪肝到非酒精性脂肪性肝炎、肝硬化和肝細胞的過程[1-3]。據(jù)有關資料顯示,NAFLD在全世界范圍內(nèi)患病率是25%左右[4],在亞洲地區(qū)的發(fā)病率甚至高達[5],且呈逐年上升趨勢。在中國,NAFLD患病人數(shù)增長迅速且呈低齡化發(fā)病趨勢,發(fā)病率約為,已成為只次于慢性病毒性肝炎的第二大肝病[6-7],嚴重威脅人類健康。
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原代肝細胞體外培養(yǎng)48h后,參照文獻[20-21]報道的方法誘導脂肪變性細胞模型。設置不同濃度(0~)的FFA混合物(油酸∶棕櫚酸=2∶1),F(xiàn)FA混合物與含10%胎牛血清的DMEM高糖培養(yǎng)基充分混勻后按濃度順序依次加入六孔板中,置于37℃、含5%CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),24h后油紅O染色,觀察細胞內(nèi)脂滴沉積情況,并采用全自動生化分析儀檢測肝細胞內(nèi)TG含量。油紅O染色步驟:棄去六孔板中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液清洗1~2次,加入油紅O固定液固定20~30min;棄去固定液,加入新鮮配制的油紅O染液染色10~20min;60%的異丙醇浸洗1~2min,三蒸水清洗2~3次直至無多余染液;加入蘇木素染液染色1~2min,油紅OBuffer清洗1min,晾干,倒置顯微鏡下觀察。細胞內(nèi)TG測定步驟:棄去六孔板中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液清洗1次,按每孔細胞數(shù)量加入150~250μL的RIPA裂解液,刮刀刮取細胞,冰上裂解30min,4℃,13000r/min,離心10min,取上清,全自動生化分析儀檢測肝細胞內(nèi)TG含量。 上海中喬新舟 原代肝細胞的特點。歡迎來電咨詢上海中喬新舟!河北比格犬原代肝細胞購買
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在細胞實驗中,通過原代分離實驗得到的原代細胞,與永生化的細胞系相比,能夠忠實模擬體內(nèi)生理狀態(tài)和功能,屬于“高階”的細胞模型,但是獲得高純度的原代細胞是一個非常艱巨的過程,科學合理的原代細胞提取和培養(yǎng)方法對于任何實驗室都是一筆不可多得的財富。上次小編整理了脂肪原代細胞提取的教程,得到了大家的一致好評。應廣大讀者要求,小編快馬加鞭“肝”出了小鼠原代肝細胞的提取“密鑰”,趕緊收好~肝臟是人體“”代謝,在包括葡萄糖、蛋白質(zhì)和脂肪等多種物質(zhì)代謝過程中發(fā)揮重要作用。肝臟參與多種生理病理過程,與、、糖尿病等代謝性疾病密切相關。肝臟中的細胞主要分為實質(zhì)細胞和非實質(zhì)細胞兩類:實質(zhì)細胞的占比達到整個肝臟的70%-80%,包括肝細胞和少量的膽管內(nèi)皮細胞;非實質(zhì)細胞包括星狀細胞,巨噬細胞,NK細胞,成纖維細胞等。肝原代細胞提取培養(yǎng)的主要是肝細胞。 浙江鴨 野鴨原代肝細胞購買
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