1.慢病毒生物學慢病毒生存所需的基本基因是gag、pol和env；gag編碼結構蛋白，pol編碼逆轉錄酶和整合酶，env編碼病毒包膜糖蛋白。所有逆轉錄病毒都有相似的生命周期。當成熟病毒通過直接膜融合或通過包膜糖蛋白與靶細胞表面同源受體結合而介導的內吞作用進入細胞時，生命周期就開始了。融合之后是脫殼過程，在此階段，一些病毒蛋白（包括部分Gag亞基）從病毒核xin解離。病毒RNA經(jīng)過復雜的多步逆轉錄過程轉化為前病毒雙鏈DNA。該前病毒DNA與病毒蛋白形成復合物，進入細胞核并整合到宿主基因組中。整合過程由關鍵的病毒蛋白（例如整合酶）和內源性宿主細胞轉錄因子（例如LEDGF）輔助完成。野生型慢病毒的前病毒基因組轉錄和翻譯依賴于宿主機制來啟動和完成。病毒完成感ran性顆粒組裝后，其后代通過出芽離開宿主細胞。在該過程中，慢病毒利用蛋白轉運途徑所需的內體分選復合物來執(zhí)行復雜的出芽過程并將病毒顆粒釋放到細胞外。在出芽過程中，宿主細胞的內源性膜蛋白會摻入病毒顆粒的包膜中，例如MHC分子，這可能會影響后代病毒顆粒的分布。油紅O是一種脂溶性重氮染料，用于染色細胞和組織中的脂質和脂肪沉積物。MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒
ELISA是一種基于酶的免疫測定方法，由于酶標的放大作用，利用酶標記抗體的免疫檢測，因其高特異性和敏感性而日益受到人們的青睞。細胞因子夾心ELISA是一種敏感的酶免疫分析方法，可以特異性地檢測和定量可溶性細胞因子和趨化因子蛋白的濃度。這一方法的基本原理是：①將已知抗體結合到某種固相載體表面；②加待測抗原，如兩者是特異的，則發(fā)生結合，然后把多余抗體洗除；③加入與待測抗原呈特異反應的酶聯(lián)抗體，使形成“夾心”；④加入該酶的底物，若看到有色的酶解產(chǎn)物產(chǎn)生，說明在孔壁上存在相應的抗原，利用酶標儀測其OD值。有色產(chǎn)物的量與待測抗原的量直接相關，故可根據(jù)顏色反應的深淺進行定性或定量分析。核酸提取試劑盒MTT法又稱MTT比色法，是一種檢測細胞存活和生長的方法。
Elisa試劑盒對于間接ELISA標本般都要進行稀釋，如果加樣不準就會造成誤差，尤其當稀釋倍數(shù)大時，很小的絕dui誤差，會導致較大的相對誤差，使陰性（或弱陽性）標本呈陽性（或陰性）。加樣時應將所加物加在ELISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出，不可產(chǎn)生氣泡。目，大部分血站都已使用全自動酶免加樣系統(tǒng)處理標本，可較好地避免以上誤差。
在ELISA中正確的洗滌是保證得到可重復結果的關健步，ELISA試劑盒應引起操作者重視。無論是手工操作還是機器操作，得出不正確的結果常與不正確的洗滌有關，ELISA就是靠洗滌來達到分離游離和結合的酶標記物的目的。通過洗滌以消除殘留在板孔中沒能與固體抗原或抗體結合的物質，以及在反應過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質。
實驗注意事項：建議先做幾個孔摸索接種細胞的數(shù)量和加入CCK-8試劑后的培養(yǎng)時間。有條件的情況下建議采用多通道移液器，可以減少平行孔間的差異。加入CCK-8試劑時，建議斜貼著培養(yǎng)板壁加，不要插到培養(yǎng)基頁面下加，容易產(chǎn)生氣泡，會干擾OD值讀數(shù)。白細胞可能需要培養(yǎng)較長時間。當使用標準96孔板時，貼壁細胞的*小接種量至少為1,000 個/孔 (100 μL 培養(yǎng)基)。檢測白細胞時的靈敏度相對較低，因此推薦接種量不低于2,500 個/孔 (100 μL 培養(yǎng)基)。如果要使用24孔板或6孔板實驗，請先計算每孔相應的接種量，并按照每孔培養(yǎng)基總體積的10%加入CCK-8溶液。如果沒有450nm的濾光片，可以使用吸光度在430-490 nm之間的濾光片，但是450nm濾光片的檢測靈敏度*高。如果待測物質有氧化性或還原性的話，可在加CCK-8之前更換新鮮培養(yǎng)基，去掉藥物的影響。當然藥物影響比較小的情況可以不更換培養(yǎng)基，直接扣除培養(yǎng)基中加入藥物后的空白吸收即可。細胞活力和增殖的研究對于評估細胞群對外部因素（如生長因子，抗sheng素和抗ai藥物）的反應非常重要。
慢病毒載體（Lentiviralvector）較逆轉錄病毒載體有更廣的宿主范圍，慢病毒能夠有效感ran非周期性和有絲分裂后的細胞。慢病毒載體能夠產(chǎn)生表達shRNA的高滴度的慢病毒，在周期性和非周期性細胞、干細胞、受精卵以及分化的后代細胞中表達shRNA，實現(xiàn)在多種類型的細胞和轉基因小鼠中特異而穩(wěn)定的基因表達的功能性沉默，為在原代的人和動物細胞組織中快速而高效地研究基因功能，以及產(chǎn)生特定基因表達降低的動物提供了可能性。慢病毒作為siRNA的攜帶者，不但具備特異性地使基因表達沉默的能力，而且充分發(fā)揮了慢病毒載體自身所具備的優(yōu)勢，為基因功能的研究提供了更強有力的工具。慢病毒載體可以將外源基因或外源的shRNA有效地整合到宿主染色體上，從而達到持久性表達目的序列的效果。對于一些較難轉染的細胞，如原代細胞、干細胞、不分化的細胞等，使用慢病毒載體，能大da提高目的基因或目的shRNA的轉導效率，且目的基因或目的shRNA整合到宿主細胞基因組的幾率大da增加，能夠比較方便快捷地實現(xiàn)目的基因或目的shRNA的長期、穩(wěn)定表達。為雜交瘤細胞生長期間和之后定性和定量抗體類別同種型提供了一種快速靈敏且簡便的方法，用于評估免疫應答。Absolute Mouse Telomere Length Quantification qPCR Assay Kit
熒光素酶（luciferase）是指能催化不同底物發(fā)生氧化使其發(fā)射出熒光的一類酶的總稱。MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒
His標簽是當前*流行的標簽蛋白。His標簽是指六個組氨酸殘基組成的融合標簽，可插入在目的蛋白的C末端或N末端。當某一個標簽的使用，一是能構成表位利于檢測；二是構成獨特的結構特征（結合配體）利于純化。其特點可總結為以下幾點：1.標簽的分子量小，只有~0.84KD，而GST和蛋白A分別為~26KD和~30KD，一般不影響目標蛋白的功能；2.His標簽融合蛋白可以在非離子型表面活性劑存在的條件下或變性條件下純化，前者在純化疏水性強的蛋白得到應用，后者在純化包涵體蛋白時特別有用，用高濃度的變性劑溶解后通過金屬螯和親和層析去除雜蛋白，使復性不受其它蛋白的干擾，或進行金屬螯和親和層析復性；3.His標簽融合蛋白也被用于蛋白質-蛋白質、蛋白質-DNA相互作用研究；4.His標簽免疫原性相對較低，可將純化的蛋白直接注射動物進行免疫制備抗體；5.可應用于多種表達系統(tǒng)，純化的條件溫和；6.可以和其它的親和標簽一起構建雙親和標簽。純化：組氨酸殘基側鏈與固態(tài)的鎳有強烈的吸引力，可用于固定化金屬螯合層析(IMAC)，對重組蛋白進行分離純化。MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒
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1、原代細胞：ScienCell（中國區(qū)正規(guī)一級代理）人源和動物源各種原代細胞。
2、培養(yǎng)基：原代細胞**低血清、無血清、無異源蛋白無動物成分培養(yǎng)基。
3、細胞培養(yǎng)試劑：胎牛血清、原代細胞轉染試劑盒、細胞實驗檢測試劑盒、細胞生長因子、ELISA試劑盒、定量PCR芯片試劑盒、DNA/RNA及細胞裂解物等。
4、細胞系（株）：種類豐富（1000余種），已通過STR鑒定；提供細胞株完全培養(yǎng)基。
5、自研產(chǎn)品：支原體檢測/qing除試劑盒、端粒酶檢測試劑盒、人源/動物源ELISA試劑盒等系列產(chǎn)品。
6、技術服務：綠/紅色熒光蛋白標記、熒光素酶標記、慢bing毒介導基因沉默或過表達及穩(wěn)轉株的構建，細菌基因敲除、細胞基因敲除、小鼠基因敲除、血管生成功能學實驗。