1996年第yi次報道其蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)是一個包含有11個β折疊的“桶”形結(jié)構(gòu),發(fā)色團隱藏在結(jié)構(gòu)的中心,不被水溶劑猝滅。這種緊密排列的結(jié)構(gòu)對整個GFP蛋白是很重要的,它幾乎可以完全維持熒光活性;少量的斷裂是可以平衡的,少量的點突變也是可以接受的。與當(dāng)時的傳統(tǒng)熒光染料相比,GFP的主要優(yōu)勢在于它無毒,并且可以在活細胞中表達,從而能夠用于研究動態(tài)的生理過程。
幾乎就在它的序列被闡明的同時,科學(xué)家們就開始通過誘導(dǎo)突變來設(shè)計新的綠色熒光蛋白版本。1995年,RogerY.Tsien描述了一個S65T點突變,該突變增加了GFP的熒光強度和光穩(wěn)定性。這也使其主激發(fā)峰從395nm轉(zhuǎn)移到488nm,有效地改善了野生型蛋白的缺陷,促進了其在研究中的廣泛應(yīng)用。自那以后,許多其他的突變被引入到綠色熒光蛋白中,新的熒光團迭代不斷地被設(shè)計出來。 為進行神經(jīng)系統(tǒng)疾病或神經(jīng)科學(xué)相關(guān)研究的研究人員提供*** ELISA 試劑盒。探針試劑盒
WST-1細胞活力和增殖檢測試劑盒描述:
通過存在于活細胞中的琥珀酸四唑還原酶將四唑鎓鹽還原成有色甲compounds化合物,提供了測量細胞活力和增殖的靈敏且準(zhǔn)確的方法。然而,*常用的四唑鹽MTT[3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑溴化物]的缺點是由MTT產(chǎn)生的甲dye染料極不溶于水,因此分光光度定量需要額外的提取步驟。ScienCell WST-1細胞活力和增殖測定使用四唑鹽WST-1[2-(4-碘苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺苯基)-2H四唑]。WST-1在代謝活性細胞上產(chǎn)生高度水溶性的福爾馬贊,允許直接和用戶友好的細胞活力和增殖的比色測量。 探針試劑盒該試劑盒中提供了所有必需的PCR試劑。只需添加DNA模板并進行PCR反應(yīng)。
人抗補體1q抗體(C1q)ELISA試劑盒(CTX)ELISA試劑盒對體內(nèi)各種重要生理功能的實現(xiàn)以及疾病的發(fā)生進程不可或缺,如造血作用、淋巴組織發(fā)育、炎癥反應(yīng)、白細胞遷移、過敏、傷口修復(fù)、新血管生成、cancer發(fā)生和**遷移等。顧名思義,人抗補體1q抗體(C1q)ELISA試劑盒(CTX)ELISA試劑盒的功能主要是趨化各種細胞。典型的例子,如人抗補體1q抗體(C1q)ELISA試劑盒(CTX)ELISA試劑盒通過趨化作用向炎癥部位招募各種白細胞。
其中包括兩個步驟:首先是白細胞在血管內(nèi)皮細胞表面的初始性滾動轉(zhuǎn)換成穩(wěn)定性結(jié)合,并穿越血管內(nèi)皮細胞層;然后,引導(dǎo)這些細胞向gan染部位遷移,遷移的方向一般是順人抗補體1q抗體(C1q)ELISA試劑盒 (CTX)ELISA試劑盒 濃度梯度。而這一濃度梯度,又是由胞外基質(zhì)表面和內(nèi)皮細胞表面能結(jié)合人抗補體1q抗體(C1q)ELISA試劑盒 (CTX)ELISA試劑盒 的黏蛋白含量所決定的。這就是說,白細胞一旦穿越內(nèi)皮細胞和基底膜進入組織,它們就沿著基質(zhì)所結(jié)合的遞增性人抗補體1q抗體(C1q)ELISA試劑盒 (CTX)ELISA試劑盒 濃度向炎癥部位游走。
每種試劑都有其佳反應(yīng)模式,其中溫度和溫育時間控制是重要因素。因孵育溫度高,反應(yīng)時間長,會造成整板本底高,陽性率高。溫育般用濕盒或水浴,ELISA試劑盒反應(yīng)板不宜疊放,以保證各板溫度都能迅速平衡,為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋。作為記錄測定結(jié)果的儀器,酶標(biāo)儀的性能穩(wěn)定與否,決定結(jié)果的可靠度。先酶標(biāo)儀應(yīng)定期進行保養(yǎng),對濾光片要定期校正;其次酶標(biāo)儀波長設(shè)置要正確,好使用雙波長,個檢測波長,個參比波長,以消除微孔板底部劃痕、不平、指印或液面高度差異造成的光干擾。此外,在用酶標(biāo)儀讀數(shù)時好先擦試微孔板底部并壓平板條。由于各種酶標(biāo)儀性能有所不同,使用中應(yīng)詳細閱讀說明書。 MTT法又稱MTT比色法,是一種檢測細胞存活和生長的方法。
來自蛋白質(zhì)的生物熒光,如綠色熒光蛋白(GFP)可能已經(jīng)在水母等生物中存在了數(shù)百萬年。直到20世紀(jì)60年代,科學(xué)家才開始真正研究綠色熒光蛋白,并推斷出它的生化特性。現(xiàn)在,GFP及其熒光衍生物已成為實驗室的主要研究對象。GFP被廣泛應(yīng)用于生物學(xué)科的研究,包括:標(biāo)記基因以闡明其表達或定位,作為生物傳感器或細胞標(biāo)記,研究蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用,可視化啟動子活性等等。
GFP是一種由238個氨基酸組成的大約27kda的蛋白,來源于水晶水母Aequorea victoria。它的熒光發(fā)射波長在可見光譜的綠色部分(因此得名),這是由于蛋白中心的三個特定氨基酸(Ser65、Tyr66和Gly67)成熟反應(yīng)形成的發(fā)色團。第yi次發(fā)現(xiàn)時,GFP*令人覺得不可思議的一點是發(fā)色團自發(fā)形成,不需要額外的輔助因子、底物或酶活性——它只需要在成熟過程中存在氧氣。這意味著該蛋白可以直接從維多利亞藻中提取,并在任何生物體中表達,同時仍然保持熒光。 對人類端粒長度定量qPCR檢測試劑盒旨在直接測量人類細胞群的平均端粒長度。探針試劑盒
抗體是免疫系統(tǒng)用來發(fā)現(xiàn)、標(biāo)記和消滅入侵病原體的生物分子。探針試劑盒
GST(谷胱甘肽巰基轉(zhuǎn)移酶)標(biāo)簽蛋白本身是一個在解du過程中起到重要作用的轉(zhuǎn)移酶,它的天然大小為26KD。將它應(yīng)用在原核表達的原因大致有兩個,一個是因為它是一個高度可溶的蛋白,希望可以利用它增加外源蛋白的可溶性;另一個是它可以在大腸桿菌中大量表達,起到提高表達量的作用。結(jié)合的融合蛋白在非變性條件下用10mM還原型谷胱甘肽洗脫。在大多數(shù)情況下,融合蛋白在水溶液中是可溶的,并形成二聚體。GST標(biāo)簽可用酶學(xué)分析或免疫分析很方便的檢測。標(biāo)簽有助于保護重組蛋白免受胞外蛋白酶的降解并提高其穩(wěn)定性。在大多數(shù)情況下GST融合蛋白是完全或部分可溶的。純化:該表達系統(tǒng)表達的GST標(biāo)簽蛋白可直接從細菌裂解液中利用含有還原型谷胱甘肽瓊脂糖凝膠親和樹脂進行純化。GST標(biāo)簽蛋白可在溫和、非變性條件下洗脫,因此保留了蛋白的抗原性和生物活性。GST在變性條件下會失去對谷胱甘肽樹脂的結(jié)合能力,因此不能在純化緩沖液中加入強變性劑如:鹽酸胍或尿素等。如果要去除GST融合部分,可用位點特異性蛋白酶切除。 探針試劑盒
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1、原代細胞:ScienCell(中國區(qū)正規(guī)一級代理)人源和動物源各種原代細胞。
2、培養(yǎng)基:原代細胞**低血清、無血清、無異源蛋白無動物成分培養(yǎng)基。
3、細胞培養(yǎng)試劑:胎牛血清、原代細胞轉(zhuǎn)染試劑盒、細胞實驗檢測試劑盒、細胞生長因子、ELISA試劑盒、定量PCR芯片試劑盒、DNA/RNA及細胞裂解物等。
4、細胞系(株):種類豐富(1000余種),已通過STR鑒定;提供細胞株完全培養(yǎng)基。
5、自研產(chǎn)品:支原體檢測/qing除試劑盒、端粒酶檢測試劑盒、人源/動物源ELISA試劑盒等系列產(chǎn)品。
6、技術(shù)服務(wù):綠/紅色熒光蛋白標(biāo)記、熒光素酶標(biāo)記、慢bing毒介導(dǎo)基因沉默或過表達及穩(wěn)轉(zhuǎn)株的構(gòu)建,細菌基因敲除、細胞基因敲除、小鼠基因敲除、血管生成功能學(xué)實驗。